AFAP1-AS1與惡性腫瘤發生發展關系的研究進展

蔣薛偉，王中林

(蘇州大學附屬第三醫院，江蘇常州213000)

AFAP1-AS1與惡性腫瘤發生發展關系的研究進展

蔣薛偉，王中林

(蘇州大學附屬第三醫院，江蘇常州213000)

長鏈非編碼RNA(lncRNA)在多種惡性腫瘤類型中異常表達，在癌癥診斷和預后方面有積極的意義。肌動蛋白纖維相關蛋白1-反義RNA1(AFAP1-AS1)是lncRNA的一種，研究表明其與多種類型的惡性腫瘤相關。深入了解AFAP1-AS1在腫瘤中的作用可以為惡性腫瘤的早期篩查、診斷及治療提供理論指導。

肌動蛋白纖維相關蛋白1-反義RNA1；腫瘤；預后

長鏈非編碼RNA(lncRNA)是一組長度超過200 nt的RNA轉錄物[1]，具有調控基因轉錄、轉錄后和表觀遺傳水平的作用[2]。lncRNA沒有編碼蛋白質的能力，但能調節蛋白質編碼基因的表達[3]。目前已發現數以千計的lncRNA在細胞生長和凋亡、腫瘤的轉移中具有重要作用。在腫瘤發生中，lncRNA可以發揮致癌以及抑癌基因的作用，如lncRNA-UCA1在非小細胞肺癌[4]和乳腺癌[5]中表現為致癌作用，lncRNATARID可以預防癌癥形成，通過甲基化抑癌基因的表達[6]。肌動蛋白纖維相關蛋白1-反義RNA1(AFAP1-AS1)是新發現的一種lncRNA，近年研究發現，AFAP1-AS1與惡性腫瘤的增殖、轉移關系密切。現將AFAP1-AS1與惡性腫瘤關系的研究進展綜述如下。

1 AFAP1-AS1的結構與功能

AFAP1-AS1是一個長6 810 nt的lncRNA，定位于4號染色體上，是蛋白編碼基因AFAP1的反義lncRNA，而反義lncRNA是一類從蛋白或非蛋白編碼基因的相反鏈上轉錄而來的lncRNA，彼此有一定的重疊關系。AFAP1-AS1外顯子2和AFAP1外顯子14、15、16是重疊和互補的區域[7]。AFAP1對維持上皮細胞張力絲的完整性有重要作用，AFAP1磷酸化可導致細胞內癌基因SRC家族成員的激活[8]。作為一個連接其他蛋白質(如SRC、PKC)的銜接分子，AFAP1能夠調整肌動蛋白的完整性，影響細胞吞噬作用、細胞運動、腫瘤侵襲和轉移[8～10]。在lncRNA的研究中發現，基因正、反義轉錄產物間常以RNA-RNA的方式發揮作用，而AFAP1-AS1能通過RNA-RNA之間相互作用影響正義鏈AFAP1的轉錄水平或磷酸化狀態，導致腫瘤的發生發展；也有可能通過AFAP1影響細胞內張力絲的形成，從而影響細胞骨架的形成。

2 AFAP1-AS1與惡性腫瘤的相關性

2.1 AFAP1-AS1與食管癌 食管鱗狀細胞癌(ESCC)是我國最常見的惡性腫瘤之一。Luo等[11]發現，AFAP1-AS1在ESCC組織中表達升高，而且其高表達與腫瘤直徑、臨床TNM分期有關。體外實驗發現，AFAP1-AS1能促進ESCC細胞增殖；抑制AFAP1-AS1在ESCC細胞中的表達后，細胞凋亡明顯減少。Wu等[12]發現，早期Barrett食管(BE)組織中AFAP1-AS1表現出的低甲基化而不是高甲基化是主要的表觀遺傳，全基因組早期低甲基化似乎也影響了基因組的編碼和非編碼區域。在BE和食管腺癌(EAC)中，長非編碼RNA AFAP1-AS1的甲基化降低，AFAP1-AS1的表達抑制EAC細胞的癌癥相關生物學功能。Zhou等[13]發現，腫瘤組織與相鄰正常組織相比，其AFAP1-AS1表達明顯上調，而且AFAP1-AS1的過表達與淋巴結轉移、遠處轉移、臨床分期和針對性的放化療有關。AFAP1-AS1高表達的患者對針對性的放化療(dCRT)有抵抗，提示下調AFAP1-AS1表達對ESCC患者來說可能是一個新的治療方法。

AFAP1-AS1對于ESCC的預后具有重要的評估價值。Kaplan-Meier生存分析顯示，AFAP1-AS1高表達與短的無進展生存期(PFS)和總體生存率(OS)有關，因此AFAP1-AS1可能作為一種預測腫瘤的潛在生物標記物。多變量分析顯示，AFAP1-AS1在ESCC中高表達是OS最明顯的不利因素。在dCRT后，AFAP1-AS1高表達患者PFS明顯縮短。因此，AFAP1-AS1和其他臨床數據相比可以作為一個更有價值的生物標志物。

2.2 AFAP1-AS1與肺癌 Deng等[14]發現，lncRNA AFAP1-AS1在非小細胞肺癌(NSCLC)中表達上調，而且其表達與臨床分期、吸煙史、浸潤度、淋巴結轉移和遠處轉移有關。Zeng等[15]用兩個微陣列數據來檢測肺癌組織和正常肺組織中表達的基因，發現在20種lncRNA中，13個出現上調，7個出現下調，AFAP1-AS1是失調最明顯的lncRNA；并且在所有的獨立的肺癌基因表達譜數據集中，AFAP1-AS1的表達都明顯上調。通過調節AFAP1基因表達，進而作用于Rho/Rac信號通路和肌動蛋白細胞角蛋白信號通路，誘導細胞骨架的調控，最終促進腫瘤細胞在肺內的入侵和轉移。通過對GSE31210和GSE37745這2個肺癌數據集研究，發現AFAP1-AS1的高表達與更短的OS和無瘤生存期有關，表明AFAP1-AS1的上調與肺癌預后密切相關，提示AFAP1-AS1可能成為肺癌進展與預后預測的生物標記物。體外實驗表明，AFAP1-AS1敲除后明顯抑制了肺癌細胞的侵襲和轉移能力，這可能成為治療肺癌的新的方向。

2.3 AFAP1-AS1與結直腸癌(CRC) CRC在中國的患病人數逐年上升，盡管治療方法在改進，但仍然不能被治愈。Han等[16]把有AFAP1-AS1轉染的結直腸癌細胞注射到裸鼠脾臟中，4周后發現，裸鼠脾臟中轉移結節的數量較對照組少，提示AFAP1-AS1具有抗腫瘤轉移的作用。另有研究顯示，AFAP1-AS1能引起上皮細胞鈣黏蛋白表達增強，從而發揮抗腫瘤轉移的作用。Wang等[17]報道，AFAP1-AS1在CRC組織中表達升高，其高表達與腫瘤直徑、TNM分期和遠處轉移有關。Kaplan Meier生存分析和log-rank檢驗進一步表明AFAP1-AS1高表達與更短的OS和無病生存期(DFS)相關，AFAP1-AS1可作為CRC患者OS和DFS的獨立預測因子。以上研究表明，AFAP1-AS1高表達可能與CRC的發生發展及預后有關。

2.4 AFAP1-AS1與肝癌(HCC) Lu等[18]發現，AFAP1-AS1在肝癌組織中的表達上調，而且其高表達與腫瘤直徑、血管浸潤、臨床TNM分期和預后有關，說明AFAP1-AS1在HCC的進展中發揮著致癌基因的作用。AFAP1-AS1沉默引起Ki-67、BCL-2、MMP-9基因表達下降，Bax表達升高，進而抑制體內腫瘤的生長。Zhang等[19]研究發現，AFAP1-AS1低表達的HCC患者中位生存期更短，只有33.7個月，而AFAP1-AS1高表達的HCC患者中位生存期顯著延長，為59.3個月；多變量分析表明，AFAP1-AS1表達在OS上可能會作為一個獨立的預測因素。AFAP1-AS1敲除可以減少RhoA和Rac2在HCC細胞中的表達，這可能為HCC提供一個新的治療靶點。

2.5 AFAP1-AS1與胰腺癌(PDAC) Ye等[20]報道，AFAP1-AS1在胰腺癌細胞中顯著上調，而且其過表達與淋巴結轉移、神經浸潤和預后有關，而這些對于PDAC患者來說是預測OS的最強指標，這可能為識別需要強化治療的高危患者提供新的方法。體外實驗中，在PDAC細胞中敲除AFAP1-AS1可抑制細胞增殖活性和侵襲性，提示AFAP1-AS1可作為PDAC預后的生物標志物以及治療靶點。Fu等[21]通過基因集合富集分析，發現AFAP1-AS1高表達與一些腫瘤發生相關的通路有關，在PDAC細胞系中，AFAP1-AS1是有效入侵和促進增殖所必需的。

2.6 AFAP1-AS1與卵巢癌(OC) Yang等[22]發現，卵巢癌細胞在轉染AFAP1-AS1 siRNA后出現了顯著的凋亡，表明敲低AFAP1-AS1可以促進細胞凋亡，并發現AFAP1-AS1在卵巢癌組織中的表達上調，并能促進細胞增殖，提示AFAP1-AS1可能會作為卵巢癌的治療靶點。

2.7 AFAP1-AS1與膽管癌(CCA) Shi等[23]發現，與人肝內膽管上皮細胞相比，AFAP1-AS1在膽管癌細胞中明顯上調，AFAP1-AS1表達增加與CCA的惡性行為和預后相關。提示AFAP1-AS1在CCA進程中是一個致癌基因。Lu等[24]將AFAP1-AS1敲除的膽管癌細胞注入裸鼠皮下，觀察腫瘤的生長情況，發現腫瘤體積明顯小于對照組，AFAP1-AS1敲除組c-Myc表達降低。表明下調AFAP1-AS1可以抑制腫瘤生長，AFAP1-AS1可能作為CCA潛在的治療靶點。

2.8 AFAP1-AS1與鼻咽癌(NPC) Tang等[25]發現，鼻咽癌復發患者體內淋巴結浸潤的NPC細胞中，高表達AFAP1-AS1發生遠處轉移的可能性更大。在NPC患者中，AFAP1-AS1陽性表達者的預后更差，生存率更低，5年生存率僅為47.7%，而AFAP1-AS1陰性表達者的5年生存率為92.8%。He等[26]認為，AFAP1-AS1在預測腫瘤進展方面具有潛在的臨床價值。Hao等研究了AFAP1-AS1敲除對于肌動蛋白纖維完整性的影響，發現AFAP1-AS1敲除后壓力纖維完整性喪失，表明AFAP1-AS1可能通過調節腫瘤細胞黏附遷移來促進腫瘤轉移。

2.9 AFAP1-AS1與胃癌 Guo等[27]報道，在胃癌細胞中，AFAP1-AS1敲除可降低p-AKT蛋白水平，升高PTEN mRNA和蛋白水平，而PTEN是一種腫瘤抑制基因，可以降低AKT信號，表明AFAP1-AS1可通過PTEN/p-AKT通路來調節腫瘤細胞增殖。

3 結語

綜上所述，AFAP1-AS1在惡性腫瘤增殖、侵襲、轉移和預后中發揮重要作用,在許多腫瘤中表達升高，在另一些腫瘤中表達下降，充當致癌基因或抑癌基因的角色。AFAP1-AS1作為惡性腫瘤的潛在分子標志物，此過程通過何種靶點、作用于哪條信號通路尚不十分明確。對這些問題的探索有助于今后更全面、更深入了解AFAP1-AS1及其在腫瘤中的作用，為惡性腫瘤的早期篩查、診斷及預后預測提供更多的理論依據。

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A

1002-266X(2017)42-0105-03

王中林(E-mail: wzl_cz@163.com)

2017-08-15)