蛋白質精氨酸甲基轉移酶1-非對稱性二甲基精氨酸-二甲基精氨酸二甲胺水解酶1路徑在肝纖維化、腎小管間質纖維化大鼠組織中的作用及意義

馬雪豐，張景耀，毛 慶，陳 果，秦德萍，李 傲,3*

·論著·

蛋白質精氨酸甲基轉移酶1-非對稱性二甲基精氨酸-二甲基精氨酸二甲胺水解酶1路徑在肝纖維化、腎小管間質纖維化大鼠組織中的作用及意義

馬雪豐1，張景耀2，毛 慶1，陳 果1，秦德萍1，李 傲2,3*

目的 觀察蛋白質精氨酸甲基轉移酶1(PRMT1)-非對稱性二甲基精氨酸(ADMA)-二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)代謝軸在肝纖維化、腎小管間質纖維化大鼠模型體內的變化情況，并探討血清ADMA水平與肝纖維化、腎小管間質纖維化程度間的相關性。方法 2015年9—12月，從40只SPF級Sprague-Dawley雄性大鼠中隨機抽取20只，將其平均分為溶劑對照組(A組)和肝纖維化模型組(B組)；再將剩余的20只Sprague-Dawley大鼠平均分為假手術組(C組)和模型組(D組)，各10只。采用四氯化碳(CCl4)慢性染毒和單側輸尿管結扎的方法分別建立大鼠肝纖維化模型(B組)和腎小管間質纖維化模型(D組)。采用皮下注射等量花生油和單側輸尿管只分離不結扎的方法分別建立溶劑對照模型(A組)和假手術模型(C組)。A、B組大鼠分別于干預8周后，C、D組大鼠分別于干預2周后，采用Masson三色染色后計算肝、腎膠原纖維面積百分比；采用化學比色法檢測肝、腎組織羥脯氨酸(Hyp)水平；采用改良的高效液相色譜法檢測血清ADMA水平；采用蛋白質免疫印跡法檢測肝、腎組織PRMT1、DDAH1表達水平。結果 A組、B組、C組、D組大鼠血清ADMA水平分別為(0.43±0.07)、(1.10±0.21)、(0.45±0.03)、(1.26±0.21)μmol/L。B組大鼠血清ADMA水平高于A組(t=6.32，P<0.05)；D組血清ADMA水平高于C組(t=6.96，P<0.05)。血清ADMA水平與肝、腎膠原纖維面積百分比均呈正相關(r值分別為0.913、0.934，P<0.05)。血清ADMA水平與肝、腎組織Hyp水平均呈正相關(r值分別為0.856、0.878，P<0.05)。B組大鼠肝組織PRMT1表達水平高于A組，DDAH1表達水平低于A組(P<0.05)。D組大鼠腎組織PRMT1表達水平高于C組，DDAH1表達水平低于C組(P<0.05)。結論 在肝纖維化、腎小管間質纖維化狀態下，PRMT1-ADMA-DDAH1代謝軸中PRMT1表達增高，而DDAH1表達減低，可導致血清ADMA水平升高，引起肝血竇和腎小管周圍毛細血管內皮細胞的損傷，從而參與纖維化進程的啟動和病理改變的發生。

纖維化；模型，動物；蛋白質精氨酸N-甲基轉移酶；非對稱性二甲基精氨酸

馬雪豐，張景耀，毛慶，等.蛋白質精氨酸甲基轉移酶1-非對稱性二甲基精氨酸-二甲基精氨酸二甲胺水解酶1路徑在肝纖維化、腎小管間質纖維化大鼠組織中的作用及意義[J].中國全科醫學，2017，20(12)：1474-1479.[www.chinagp.net]

MA X F,ZHANG J Y,MAO Q，et al.Role and significance of PRMT1-ADMA-DDAH1 pathway in rats with hepatic and renal tubulointerstitial fibrosis[J].Chinese General Practice，2017，20(12)：1474-1479.

1.ChonggingInstituteforFoodandDrugControl,Chongqing401121,China

2.CollegeofPharmacyandBioengineering,ChongqingUniversityofTechnology,Chongqing400054,China

3.StateKeyLaboratoryofQualityResearchinChineseMedicine,InstituteofChineseMedicalSciences,UniversityofMacau,Macau999078,China

*Correspondingauthor:LIAo，Associateprofessor;E-mail:ao_livip@sina.com

纖維化是一種組織病理學概念,幾乎所有的組織器官，包括心、肺、肝、腎、皮膚等均可發生纖維化[1]。器官纖維化進程的持續發展可進一步破壞器官結構，最終引起器官衰竭[2-3]。在不同的組織器官中，雖然纖維化的發病機制和過程存在差別，但現在仍無有效的措施延緩纖維化的發生、發展[4]。因此，尋找并鑒定出纖維化相關的生物學標志物不僅可以提高人們對纖維化發病機制的認識，還能為抗纖維化治療藥物提供新的靶點。非對稱性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)作為內源性一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制物，已在心血管疾病和腎臟疾病中受到廣泛關注[5-6]。ADMA在體內的生成主要通過蛋白質精氨酸甲基轉移酶1(protein arginine methyltransferase,PRMT1)催化生成。體內ADMA的最終清除通過二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(dimethylamino hydrolase,DDAH1)完成，其催化ADMA轉變為瓜氨酸和二甲胺[7]。已有多項證據表明，ADMA在預示慢性腎病及心血管并發癥的發生乃至死亡方面具有重要意義[6-7]。同時，在乙型肝炎肝纖維化患者體內，也出現了DDAH1活性的降低和ADMA水平的升高[8]。然而，在纖維化實驗動物模型中，尚未有動物血清中ADMA水平及其相關代謝酶表達水平的相關報道。因此，本研究構建了四氯化碳(CCl4)慢性染毒的大鼠肝纖維化模型和單側輸尿管結扎的大鼠腎小管間質纖維化模型，擬通過經典的肝纖維化、腎小管間質纖維化模型，考察其是否也存在與臨床相似的PRMT1-ADMA-DDAH1代謝軸紊亂，并進一步探討纖維化模型動物血清中ADMA水平與纖維化程度間的相關性，旨在為纖維化性疾病的診斷及鑒別提供幫助。

1 材料與方法

1.1 實驗材料及時間

1.1.1 實驗動物 成年SPF級Sprague-Dawley大鼠40只，均為雄性，6～7周齡，體質量180～220 g，由中國人民解放軍第三軍醫大學第三附屬醫院實驗動物中心提供〔SCXK(渝)2012-0005〕。動物飼養及實驗操作在第三軍醫大學實驗動物中心進行〔SYXK(軍)2007-0037〕，并按實驗動物使用的3R原則給予Sprague-Dawley大鼠人道關懷。飼養條件：溫度20～24 ℃，相對濕度55%，自由進食及飲水，12 h明/12 h暗交替，適應性飼養7 d 后開始實驗。

1.1.2 實驗試劑 鄰苯二甲醛、三巰基丙酸(美國Sigma公司)，ADMA標準品(美國Cayman公司),色譜級乙腈、甲醇(美國Fisher公司)，固相萃取陽離子交換柱Waters Oasis MCX (60 mg/3 ml),兔抗大鼠PRMT1多克隆抗體、HRP標記羊抗兔或小鼠IgG(武漢博士德生物工程有限公司)，小鼠抗大鼠DDAH1單克隆抗體(美國Santa Cruz公司)，Masson染液、羥脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)測定試劑盒(南京建成生物工程研究所)，其余試劑均為國產分析純試劑。

1.1.3 儀器 Waters e2695高效液相色譜儀，配熒光檢測器(美國Waters公司)；高速冷凍離心機(德國Sartorius公司)；氮吹儀(瑞典Biotage公司)；色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm，美國Agilent公司)；041BR88778型蛋白電泳和電轉移裝置、ChemiDoc XRS+型化學發光成像系統(美國BIO-RAD公司)；T10B型電動組織勻漿機(德國IKA公司)；BX53正置顯微鏡(日本Olympus公司)。

1.1.4 實驗時間 2015年9—12月。

1.2 方法

1.2.1 動物模型建立

1.2.1.1 肝纖維化模型建立 大鼠肝纖維化模型建立參照文獻[9]。從40只Sprague-Dawley大鼠中隨機抽取20只，再將20只Sprague-Dawley大鼠平均分為溶劑對照組(A組)和肝纖維化模型組(B組)，各10只。B組大鼠在造模第1周飲用0.03%苯巴比妥(苯巴比妥30 mg溶于100 ml純凈水)以誘導混合功能氧化酶活性，增加CCl4代謝產物的產生，提高造模成功率，減少造模時間。造模大鼠首次皮下注射含40% CCl4的花生油混合液，5 ml/kg皮下注射，以后每次皮下注射2 ml/kg，每周2次，連續注射8周誘導肝纖維化模型。A組大鼠按相同方法和劑量皮下注射等量花生油。

1.2.1.2 腎小管間質纖維化模型建立 采用單側輸尿管結扎方法建立大鼠腎間質纖維化模型[10]。將剩余的20只Sprague-Dawley大鼠平均分為假手術組(C組)和模型組(D組)，各10只。Sprague-Dawley大鼠以水合氯醛(350 mg/kg)腹腔注射麻醉后，D組大鼠右側臥位固定于手術臺，用眼科鑷分離左側輸尿管，距腎門5～7 mm處用4號絲線上下結扎兩處，從中剪斷輸尿管，最后逐層縫合皮下組織及皮膚。C組大鼠在暴露腎臟后，只分離左側輸尿管不結扎，直接分層縫合皮膚。

1.2.2 標本采集 A、B組大鼠分別于干預8周后，C、D組大鼠分別于干預2周后，腹腔注射l%戊巴比妥鈉(30 mg/kg)麻醉，收集腹主動脈血，檢測血清ADMA水平。同時暴露腹腔，分別切取纖維化肝左外葉以及結扎側腎組織，制作5 μm石蠟切片，用于組織病理學檢查。

1.2.3 肝、腎組織病理檢查及半定量組織學評分 石蠟切片常規脫蠟，經HE染色后于200倍光鏡下觀察組織切片的病理變化。

半定量組織學評分：將肝纖維化分為5個等級，0級(計1分)：無肝纖維化；1級(計2分)：膠原纖維從中央靜脈或匯管區向外延伸；2級(計3分)：膠原纖維延伸明顯，纖維間隔開始形成；3級(計4分)：膠原纖維不全分隔包繞肝小葉；4級(計5分)：纖維結締組織在全小葉多處彌漫性增生，膠原纖維包繞分隔肝小葉，假小葉形成。觀察大鼠腎組織內炎性細胞浸潤情況，腎小管上皮細胞水腫、變性、壞死情況，腎間質增寬等病變程度，并按病變程度分為5個等級，0級(計1分):正常；1級(計2分)：病變范圍為1%～24%；2級(計3分)：病變范圍為25%～50%；3級(計4分)：病變范圍為51%～75%；4級(計5分)，病變范圍>75%。

Masson三色染色后，在200倍光鏡下觀察組織切片，采用Image Pro plus 6.0圖像分析系統，分析膠原纖維面積百分比，計算方法為(膠原纖維面積/肝、腎組織面積)×100%。

1.2.4 肝、腎組織Hyp水平測定 采用化學比色法檢測肝、腎組織Hyp水平。精確稱取大鼠肝左外葉、腎組織各100 mg，嚴格按照Hyp測定試劑盒說明進行操作；將Hyp標準品配成標準液，蒸餾水為空白對照，做標準曲線，通過標準曲線計算肝、腎組織Hyp水平。

1.2.5 血清ADMA水平測定 采用改良的高效液相色譜法[11-12]檢測血清ADMA水平。色譜條件為：流動相采用磷酸鹽緩沖溶液(25 mmol/L，pH=6.5)：乙腈(90∶10)；流速：1.0 ml/min；柱溫：30 ℃；進樣量：10 μl；激發波長：340 nm，檢測波長：455 nm；將ADMA標準品溶于10 mmol/L HCl中，配制成濃度為1.0 mmol/L的存儲溶液。然后將存儲溶液稀釋成濃度為0.05 μmol/L、0.50 μmol/L、2.50 μmol/L、5.00 μmol/L、10.00 μmol/L的標準工作溶液進行測定。以ADMA標準品的保留時間對血清中ADMA水平進行定性檢測，采用外標峰面積法對血清中ADMA水平進行定量檢測。

1.2.6 肝、腎組織PRMT1、DDAH1表達水平檢測 采用蛋白質免疫印跡法檢測肝、腎組織PRMT1、DDAH1表達水平。分別稱取大鼠肝左外葉、腎組織各100 mg，采用BCA比色法測定蛋白表達水平。將蛋白樣品進行12%十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分離，電轉移至PVDF膜上，5%脫脂牛奶封閉1 h，4 ℃下與一抗孵育過夜，加入辣根過氧化物酶標記的二抗，37 ℃孵育1 h，經ECL底物化學發光顯影，結果采用Quantity One軟件定量分析各條帶的積分吸光度(IA)值。將檢測到的PRMT1、DDAH1與各自內參β條帶IA值比值作為衡量參數，分析肝、腎組織中PRMT1、DDAH1表達水平。

2 結果

2.1 各組大鼠肝、腎組織病理學改變 HE染色后200倍光鏡下顯示，A組大鼠肝小葉結構清晰，肝小葉內肝細胞索由中央靜脈向四周整齊排列，肝細胞大小均勻，無變性和壞死(見圖1A，本文圖1彩圖見本刊官網www.chinagp.net電子期刊相應文章)；B組大鼠肝細胞發生大面積脂肪變性和壞死，大量的纖維組織在肝小葉內伸展，并與鄰近匯管區及中央靜脈相連，纖維間隔較厚，分割包繞肝實質，形成大小不一的假小葉(見圖1B)。半定量組織學評分結果顯示，B組大鼠半定量組織學評分〔(3.40±0.23)分〕高于A組〔(0.28±0.14)分〕，差異有統計學意義(t=29.96，P<0.05)。Masson三色染色法結果顯示，A組大鼠僅在肝組織匯管區和中央靜脈區血管壁附著藍色，無明顯膠原增生(見圖1C)；B組大鼠肝小葉結構被破壞，肝組織匯管區和肝小葉間膠原纖維明顯增生，形成薄厚不一的纖維間隔，分割包繞肝實質(見圖1D)。B組大鼠肝膠原纖維面積百分比〔(34.9±1.7)%〕大于A組〔(2.4±0.8)%〕，差異有統計學意義(t=55.98，P<0.05)。同時，B組大鼠肝組織中Hyp水平〔(820±29)μg/g〕高于A組〔(493±84)μg/g〕，差異有統計學意義(t=11.59，P<0.05)。以上結果提示肝纖維化模型成功建立。

HE染色后200倍光鏡下顯示，C組大鼠腎小球結構完整，未見腎小管擴張、小管上皮細胞壞死和間質炎性細胞浸潤(見圖1E)；D組大鼠腎臟組織中腎小球結構基本正常，但出現不同程度的腎小管擴張，小管間質中出現大量的炎性細胞浸潤，纖維組織增生，小管上皮細胞部分脫落、壞死等情況(見圖1F)。半定量組織學評分結果提示，D組大鼠半定量組織學評分〔(3.70±0.17)分〕高于C組〔(0.31±0.20)分〕，差異有統計學意義(t=40.81，P<0.05)。Masson三色染色法結果顯示，C組大鼠腎小球基底膜、腎小管基底膜、系膜基質染成藍色，腎間質無明顯膠原纖維(見圖1G)；D組大鼠腎間質部位明顯增寬，存在大量的膠原沉積(見圖1H)。D組大鼠腎膠原纖維面積百分比〔(34.8±2.2)%〕大于C組〔(0.9±0.8)%〕，差異有統計學意義(t=45.79，P<0.05)。同時，D組大鼠腎組織Hyp水平〔(372±60)μg/g〕高于C組〔(145±26)μg/g〕，差異有統計學意義(t=11.01，P<0.05)。以上結果提示腎間質纖維化模型成功建立。

2.2 各組大鼠血清ADMA水平比較 A組、B組、C組、D組大鼠血清ADMA水平分別為(0.43±0.07)、(1.10±0.21)、(0.45±0.03)、(1.26±0.21)μmol/L。B組大鼠血清ADMA水平高于A組，差異有統計學意義(t=6.32，P<0.05)；D組血清ADMA水平高于C組，差異有統計學意義(t=6.96，P<0.05)。

2.3 血清ADMA水平與肝、腎膠原纖維面積百分比及肝、腎組織Hyp水平的相關性分析 血清ADMA水平與肝、腎膠原纖維面積百分比均呈正相關(r值分別為0.913、0.934，P<0.05，見圖2A～B)。血清ADMA水平與肝、腎組織Hyp水平均呈正相關(r值分別為0.856、0.878，P<0.05,見圖2C～D)。

注：A、B、E、F為HE染色，C、D、G、H為Masson三色染色；A和C為溶劑對照組(A組)，B和D為肝纖維模型組(B組)，E和G為假手術組(C組)，F和H為模型組(D組)

圖1 肝、腎組織病理檢查(×200)

Figure 1 Histopathological examination of hepatic and renal tissue

注：ADMA=非對稱性二甲基精氨酸

圖2 血清ADMA水平與肝、腎膠原纖維面積百分比及肝、腎組織Hyp水平的相關性分析

Figure 2 Correlation analysis of serum ADMA levels with the percentages of areas of hepatic and renal collagen fibers,and with the level of Hyp in hepatic and renal tissue

2.4 各組大鼠肝、腎組織PRMT1、DDAH1表達水平比較 B組大鼠肝組織PRMT1表達水平(0.39±0.04)高于A組(0.19±0.05)，DDAH1表達水平(0.42±0.10)低于A組(1.20±0.17)，差異有統計學意義(t值分別為10.55、12.69，P<0.05)。D組大鼠腎組織PRMT1表達水平(1.80±0.12)高于C組(0.92±0.14)，DDAH1表達水平(0.46±0.04)低于C組(1.05±0.26)，差異有統計學意義(t值分別為15.23、7.17，P<0.05，見圖3)。

注：PRMT1=蛋白質精氨酸甲基轉移酶1，DDAH1=二甲基精氨酸二甲胺水解酶1

圖3 各組大鼠肝、腎組織PRMT1、DDAH1表達情況

Figure 3 Expression levels of PRMT1 and DDAH1 in hepatic and renal tissues of rats

3 討論

目前，纖維化的診斷治療主要依賴于組織穿刺病理檢查，但易受患者病情、依從性以及活檢取樣的誤差性和創傷性等限制。迄今為止，尚未發現一個真正意義上明確診斷纖維化的標準指標。近年來大量文獻表明，作為內源性NOS的抑制劑，ADMA通過競爭性抑制NOS，減少NO的合成，不僅可收縮血管平滑肌，引發內皮細胞損傷和凋亡，還可以通過誘導單核/巨噬細胞趨化和浸潤，參與炎性反應[13-14]。在CCl4或膽管結扎誘導的肝纖維化模型中發現NOS合成NO的能力下降，從而使阻力血管的緊張性增加，介導肝硬化門脈高壓癥形成[15]。同時，肝血竇內皮細胞的損傷常會引發竇壁結構改變，竇壁血管改變一方面阻礙了血氧彌散進入竇狀隙(Disse腔)，引起肝星狀細胞(HSCs)的缺氧和激活，誘發肝纖維化的發生；另一方面妨礙肝細胞從Disse腔攝取營養和氧氣，加重肝細胞損傷或引起其凋亡，此時正常肝細胞膜對HSCs的接觸性抑制作用喪失，從而間接引起HSCs增殖[16]。另有研究顯示，當腎小管周圍毛細血管內皮細胞受損時，同樣可以引起細胞和組織缺氧，引發炎性反應[17]。通過基因敲除或特異性抑制誘生型NOS(iNOS)活性的方式，可導致單側輸尿管結扎腎小管間質纖維化大鼠腎組織中L-精氨酸(NO合成的前體)水平上調，加速模型大鼠的腎臟纖維化進程。此項研究同時還發現，NO水平越低，纖維化的程度越顯著[16]。本實驗結果提示，在CCl4誘導和單側輸尿管結扎的大鼠肝纖維化、腎小管間質纖維化模型中，ADMA在大鼠血清中的水平均高于各自的對照大鼠；同時，本研究還發現血清ADMA水平與肝、腎膠原纖維面積百分比及Hyp水平呈正相關性，提示在肝纖維化、腎小管間質纖維化疾病中，ADMA可通過抑制NO的生成，引起肝血竇和腎小管周圍毛細血管收縮和微循環障礙，加重血管內皮細胞的損傷，這可能是纖維化疾病共有的始動因素和病理變化。

體內ADMA水平主要由PRMT1、DDAH1表達和活性來調節，從而形成一條PRMT1-ADMA-DDAH1代謝軸。通過研究PRMT1-ADMA-DDAH1代謝軸在臟器纖維化發生過程中的作用，可為纖維化疾病的診斷及研發有效的治療手段提供實驗依據。本實驗結果發現，在CCl4誘導和單側輸尿管結扎的纖維化模型大鼠中，ADMA水平升高同時受到PRMT1表達上調和DDAH1表達降低的調控。因此，通過下調PRMT1和/或上調DDAH1活性或表達水平，降低血清中ADMA水平，可能是預防或逆轉纖維化進程的有效途徑。

綜上所述，肝纖維化、腎小管間質纖維化大鼠體內存在有紊亂的ADMA-PRMT1-DDAH1代謝軸，尤其是血清中ADMA水平的升高，與纖維化惡性程度存在明顯的正相關性。針對現有的肝纖維化、腎小管間質纖維化血清學指標，普遍存在陽性檢出率不高，更不能替代組織活檢這一金標準的現實，本課題組擬進一步開展臨床患者血清ADMA水平的檢測，并通過評價該指標的各項診斷效能(靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值、陰性似然比、陽性似然比、診斷準確率、約登指數等)，為其成為纖維化疾病的治療和預后判定指標提供有效的實驗依據。

作者貢獻：馬雪豐進行實驗實施、撰寫論文、資料收集整理；張景耀、毛慶、陳果、秦德萍進行實驗實施；李傲進行實驗設計、質量控制并對文章負責。

本文無利益沖突。

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(本文編輯：毛亞敏)

Role and Significance of PRMT1-ADMA-DDAH1 Pathway in Rats with Hepatic and Renal Tubulointerstitial Fibrosis

MAXue-feng1,ZHANGJing-yao2,MAOQing1,CHENGuo1,QINDe-ping1,LIAo2,3*

Objective To study the changes of protein-arginine N-methyltransferases 1(PRMT1)-asymmetrical dimethylarginine(ADMA)-dimethylarginine dimethylaminohydrolase 1(DDAH1) axis in rat models of hepatic and renal tubulointerstitial fibrosis,and discuss the correlation between serum ADMA levels and degree of fibrosis.Methods From September to December 2015,20 Sprague-Dawley rats were randomly selected from 40 male SPF Sprague-Dawley rats,and equally divided into control group of solvent(group A) and model group of hepatic fibrosis(group B);the remaining 20 Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham operation group(group C) and model group(group D),each had 10 rats.The rat models of hepatic fibrosis(group B) and tubulointerstitial fibrosis(group D) were established by chronic exposure to carbon tetrachloride(CCl4) and unilateral ureteral obstruction.The solvent control model(group A) and sham operation model(group C) were established by subcutaneous injection of the same amount of peanut oil and unilateral ureteral separation without ligation respectively.After 8-week and 2-week intervention for rats in group A and B,group C and D respectively,Masson trichrome staining method was calculated percentages of areas of hepatic and renal collagen fibers;the levels of hydroxyproline(Hyp) in hepatic and renal were detected by chemical colorimetry.Serum ADMA levels were measured by the modified HPLC method.The expression levels of PRMT1 and DDAH1 in hepatic and renal tissues were detected by Western blotting.Results The serum ADMA levels of group A,group B,group C and group D were(0.43±0.07)(1.10±0.21)(0.45±0.03)(1.26±0.21) μmol/L respectively.The serum ADMA level of group B was higher than that of group A(t=6.32,P<0.05).The serum ADMA level of group D was higher than that of group C(t=6.96，P<0.05).There was a positive correlation between the ADMA level in serum and the percentage of areas of hepatic and renal collagen fibers(r=0.913,0.934 respectively,P<0.05).There was a positive correlation between the ADMA level in serum and the level of Hyp in hepatic and renal tissues(r=0.856,0.878 respectively,P<0.05).The expression level of PRMT1 in hepatic tissues of group B was higher than that of group A,while its expression level of DDAH1 was lower than that of group A(P<0.05).The expression level of PRMT1 in renal tissues of group D was higher than that of group C,while its expression level of DDAH1 was lower than that of group C(P<0.05).Conclusion Under the condition of hepatic and renal fibrosis,increased expression of PRMT1 and decreased expression of DDAH1 in PRMT1-ADMA-DDAH1 can lead to elevated levels of serum ADMA,cause damages of capillary endothelial cells around hepatic sinusoids and renal tubules,and thus involve in the initiation of and pathological changes of the fibrosis process.

Fibrosis;Models，animal;Protein-arginine N-methyltransferases;Asymmetrical dimethylarginine

國家自然科學基金資助項目(81001675)；重慶市科委前沿與應用基礎研究(一般)項目(cstc2014jcyjA10030)

R 364.24

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2017.12.013

2016-09-12；

2017-01-02)

1.401121重慶市，重慶市食品藥品檢驗檢測研究院

2.400054重慶市，重慶理工大學藥學與生物工程學院

3.999078澳門，澳門大學中華醫藥研究院，中藥質量研究國家重點實驗室

*通信作者：李傲，副教授；E-mail:ao_livip@sina.com