基于總皂苷臨床利用量的麥冬質量評價研究

徐玉玲， 徐騰達， 將天宇， 寇 強， 陳如雪， 鄧燕君

(成都大學 藥學與生物工程學院， 四川 成都 610106)

基于總皂苷臨床利用量的麥冬質量評價研究

徐玉玲， 徐騰達， 將天宇， 寇 強， 陳如雪， 鄧燕君

(成都大學 藥學與生物工程學院， 四川 成都 610106)

基于麥冬總皂苷的臨床利用量對麥冬的品質進行評價研究.采用正交實驗法優選麥冬中總皂苷的最佳提取工藝，根據最佳提取工藝采用UV法測定4批麥冬中總皂苷的含量，從而計算其臨床利用量.麥冬總皂苷最佳提取工藝為，8倍量60%乙醇提取3次，每次1.5 h；4批麥冬總皂苷臨床利用量(g/100 g)分別為，0.166 g，0.213 g，0.226 g，0.178 g.結果表明，建立的方法符合中藥材成分復雜的特點，并與臨床利用相關的評價方法，為麥冬中藥材品質評價研究提供了一種新的思路.

麥冬；總皂苷；臨床利用量；質量評價

0 引 言

麥冬為百合科沿階草屬植物麥冬的肉質塊莖[1]，主產于浙江、四川等地，為常用中藥品種，臨床上常用于治療冠心病、心絞痛等癥[2].麥冬所含總皂苷現已被《中國藥典》2015版第一部及相關文獻列為麥冬主要質量控制指標之一[3].中藥成分臨床利用量，是指藥材成分在臨床應用時，藥材中的化學成分可被臨床使用時利用的量.基于中藥成分臨床利用量的中藥材藥用品質評價指標，符合中醫藥臨床應用特點，是體現中藥特色的中藥品質評價方法,該方法可為豐富中藥材品質評價理論提供新的研究思路和方法，能保證藥材的臨床應用療效[4].目前，未見對麥冬的品質采用化學成分臨床利用量進行評價的相關研究報道,對此，為了探索麥冬臨床利用量與現行指標之間的差異，本研究進行了相關工作.

1 試藥與儀器

1.1 試 藥

實驗所用試藥包括：麥冬(產地四川，批號，20151210、20160407、20160407；產地湖北，批號，20160407)，購自于四川成都市荷花池藥材批發市場，經成都大學劉濤研究員檢驗為百合科沿階草屬植物麥冬的肉質塊莖，共4個樣品；魯斯可皂苷元對照品(批號，151220，純度>98%)，購自于四川維克奇生物科技有限公司，甲醇(批號，20160124)、正丁醇(批號，20160121)、氨水(批號，20151102)、高氯酸(批號，20151021)、95%乙醇(批號，20151002)，均購自于成都市科龍化工試劑廠；甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純.

1.2 儀 器

實驗所用儀器包括：TU-1810型紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)，HH-6型數顯恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司)，BS-6KH型電子天平(上海友聲衡器有限公司) ，FA2004型電子分析天平(上海良平儀器儀表有限公司).

2 麥冬總皂苷最佳提取工藝研究

2.1 麥冬原藥材總皂苷測定方法

2.1.1 供試品溶液的制備.

取麥冬細粉約3 g，精密稱定，精密加入甲醇50 mL，加熱回流2 h，放冷，再稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過.精密量取續濾液25 mL，回收溶劑至干，殘渣加水10 mL溶解，再用水飽和正丁醇振搖，提取5次，每次10 mL，合并正丁醇液，用氨液洗滌2次，每次5 mL，棄去氨液.正丁醇液蒸干，殘渣用80%甲醇溶解，轉移至50 mL量瓶中，加80%甲醇至刻度線，搖勻，精密量取供試品溶液2～5 mL，置10 mL具塞試管中，水浴揮干溶劑，精密加高氯酸10 mL，搖勻，置熱水中保溫15 min，取出，冷水冷卻，在397 nm波長下測定吸光度.

2.1.2 對照品溶液的制備.

取魯斯可皂苷元對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含50 μg的溶液，作為對照品溶液.

2.1.3 標準曲線的制備.

精密量取對照品溶液0.5、1、2、3、4、5、6 mL，分別置具塞試管中，于水浴中揮干溶劑，精密加人高氯酸10 mL，搖勻，置熱水中保溫15 min，取出，冰水冷卻，以相應的試劑為空白，按照紫外—可見分光光度法，在397 nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，其回歸方程為，

Y=0.0183X+0.01135，r=0.9995.

2.2 麥冬提取液總皂苷測定方法

2.2.1 單因素實驗.

取麥冬4份，每份50 g，置于燒瓶中，分別加10倍水，40%、60%、80%乙醇，加熱回流2 h，提取后濾過，待濾液冷卻至室溫，測定體積，搖勻，精密量取濾液25 mL，水浴蒸干，殘渣加水10 mL使溶解.用水飽和正丁醇振搖提取5次，每次10 mL，合并正丁醇液，再用氨試液洗滌2次，每次5 mL，棄去氨液，蒸干正丁醇，殘渣用甲醇溶解，轉移至50 mL容量瓶中，加甲醇至刻度線，搖勻，精密量取供試品3 mL，置10 mL具塞試管中，于水浴中揮干溶劑，精密加入高氯酸10 mL，搖勻，置70～80 ℃水中保溫15 min取出，冰水冷卻，作為供試品，采用UV法測定麥冬總皂苷含量，結果見表1.

表1 單因素實驗結果

單因素實驗結果表明，麥冬總皂苷提取方法采用60%乙醇提取為佳.

2.2.2 正交實驗.

1)提取條件選擇.為考察麥冬總皂苷制備條件，取每份50 g麥冬以總皂苷含量為指標做L9(34)正交實驗.實驗因素分別為，60%乙醇溶媒量(A)、提取次數(B)、提取時間(C)，因素水平如表2所示.

表2 實驗因素水平

2)正交實驗與結果.按照正交實驗設計表，按照“2.1.1”項下方法進行含量測定，以總皂苷為指標進行分析，實驗結果見表3，方差分析見表4.

表3 正交實驗設計與結果L9(34)

表4 方差分析表

注：F0.05(2，2)=19，F0.01(2，2)=99.

由表3可知，溶媒量、提取次數及提取時間3個因素對麥冬總皂苷的提取影響程度不同，R值大小依次為RC>RA>RB，提取次數對于含量的影響最大.由表4方差分析可知，提取次數(C)對實驗結果有顯著性差異，提取時間(B)和溶媒量(A)對實驗結果無顯著性差異.根據此分析結果，本研究選擇最佳提取工藝為，A2B2C3，即用8倍量60%乙醇提取3次，每次1.5 h.

2.2.3 驗證實驗.

根據正交實驗所得最佳提取工藝，以每份50 g麥冬對其進行3組平行驗證實驗，所得麥冬總皂苷的含量分別為，80.56 mg、81.72 mg及85.12 mg(RSD=3.5%).結果表明，正交實驗所得最佳工藝穩定可行.

2.3 總皂苷含量、提取轉移率及臨床利用量測定

按照《中國藥典》2015版第一部麥冬項下相關方法測定4批樣品的總皂苷含量、提取轉移率及臨床利用量，測定結果見表5.

表5 4批麥冬總皂苷測定結果

注：臨床利用量=100 g×藥材含量×含量轉移率.

由表5可知，20151210批次麥冬總皂苷含量最高，為0.315%.20160407批次麥冬總皂苷含量最低，為0.266%.20151210批麥冬總皂苷臨床利用量最高，為0.226 g/100 g，20160407批次麥冬總皂苷臨床利用量最低，為0.166 g/100 g.

3 結 語

本研究表明，麥冬總皂苷含量和臨床利用量具有一致性，所以對于麥冬品質評價可通過麥冬總皂苷含量或麥冬總皂苷臨床利用量這2個指標來進行評價.基于麥冬中藥材用于臨床用藥，建議以臨床利用量進行考察麥冬品質.總體來看，中藥成分臨床利用量不僅可以反映藥材含量和轉移率的高低，同時對該成分在臨床上實際被利用的情況具有重要參考價值.此外，現行藥材質量標準多以化學成分含量高低來對藥材進行質量評價，此評價與其是否在臨床中被應用之間相關性不強.例如，劉濤等[5]在評價黃芩質量時發現，黃芩苷的含量與臨床利用量差異明顯，徐玉玲等[6]測定黃柏中鹽酸小檗堿的藥材含量較高，而臨床利用量卻較低，含量與臨床利用量不具一致性.中藥成分臨床利用量是聯系藥材成分的含量和提取利用率的一種量化指標，在一定程度上能夠表征藥材的臨床實際效用.因此，該方法對藥材某一臨床功效進行質量評價有一定的意義，但對藥材整體進行質量評價，涉及權重系數的比重問題，有待結合藥效進行綜合討論.另外，本實驗中樣品批次較少，對實驗結果可能有一定影響，有待進一步驗證.

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京:中國醫藥科技出版社，2015.

[2]袁春麗,孫立,袁勝濤.等.麥冬有效成分的藥理活性及作用機制研究進展[J].2013(22)：212-214.

[3]曹原湘,張興國一,楊言探.麥冬質量控制技術的研究[J].安徽農業科學，2009(37):33-36.

[4]劉濤,茍小軍,萬德光.等.基于“中藥成分臨床利用率"的中藥材藥用品質評價模式的商建[J].中草藥,2015(13):1863-1866.

[5]劉濤,張蕾,劉婷.等.不同產地黃芩中的黃芩苷提取轉移率研究[J].成都大學學報(自然科學版),2014,33(1):8-10.

[6]徐玉玲,吳南軒,李鵬程.等.基于化學成分臨床利用量的不同產地黃柏質量評價[J].中國測試，2016(12):45-48.

Evaluation Research on Ophiopogon Japonicus Quality Based on Clinical Utilization Amount of Total Saponins

XUYuling,XUTengda，JIANGTianyu，KOUQiang，CHENRuxue，DENGYanjun

(School of Pharmacy and Bioengineering, Chengdu University, Chengdu 610106, China)

The paper is going to evaluate the quality of ophiopogonin japonicus based on the clinical utilization amount of saponins.The optimum extraction process of total saponins in ophiopogon japonicus are optimized by orthogonal experiments.Based on the optimum extraction process,UV method is used to measure the content of total saponins in the 4 batches of ophiopogon japonicus in order to calculate the accurate amount for clinical use.The results show that the optimum extraction process of total saponins of ophiopogon japonicus is 8 times the amount of 60% ethano,extract 3 times,each time 1.5 h.The clinical utilization amount of the total saponins of ophiopogonin japonicus from those 4 batches e(g/100 g) are 0.166,0.213,0.226,0.178 g respectively.The conclusion drawn from the study is that the method established in this paper conforms to the characteristics of Chinese herbal medicine with complex composition.The method is also related to clinical use.It provides a new way to evaluate the quality of medicinal materials in ophiopogon japonicus.

ophiopogon japonicus;clinic utilization amount;quality evaluation

1004-5422(2017)01-0012-03

2016-12-28.

徐玉玲(1975 — )， 女， 碩士， 副教授， 從事中成藥新藥開發與中藥質量再評價研究.

R284.2；R286.07

A