高溫應激下日糧中添加維生素E對不同存放期雞蛋蛋品質及血清抗氧化能力的影響

安婷婷， 張菁菁， 楊建生， 林雨鑫， 楊鳳萍， 辛世杰， 關富康， 王詩琴， 戴國俊*

（1.揚州大學，江蘇揚州 225009；2.昆山市畜牧獸醫站，江蘇昆山 215300）

高溫應激下日糧中添加維生素E對不同存放期雞蛋蛋品質及血清抗氧化能力的影響

安婷婷1， 張菁菁1， 楊建生2， 林雨鑫2， 楊鳳萍1， 辛世杰1， 關富康1， 王詩琴1， 戴國俊1*

（1.揚州大學，江蘇揚州 225009；2.昆山市畜牧獸醫站，江蘇昆山 215300）

為研究高溫應激條件下蛋雞日糧中添加維生素E對不同存放時間雞蛋蛋品質及血清抗氧化能力的影響，試驗選取健康的41周齡京粉Ⅰ號蛋雞360只，隨機分為4個組，每組3個重復，每個重復30只雞。其中Ⅰ組為對照組，第Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ組為試驗組，分別在日糧中添加不同水平的維生素E（0、100、200、300 mg/kg），預試期1周，試驗期為6周。結果表明：在熱應激（26～33℃，平均28.5℃）狀態下，日糧中添加維生素E的試驗Ⅲ組蛋白高度顯著提高（P＜0.05）；日糧中添加維生素E的試驗Ⅲ組哈氏單位在存放15 d時顯著高于對照組（P＜0.05）；日糧中添加維生素E的試驗Ⅲ、Ⅳ組蛋黃重在存放25 d時顯著高于對照組（P＜0.05）；日糧中添加維生素E的試驗Ⅱ組丙二醛（MDA）含量顯著降低（P＜0.05），試驗Ⅲ組總抗氧化能力（T-AOC）顯著升高（P＜0.05）。由此可見，高溫應激下日糧中添加200 mg/kg維生素E可顯著改善蛋雞的抗氧化能力，提高雞蛋蛋品質。

維生素E；高溫應激；蛋雞；蛋品質；抗氧化性

夏季氣溫高，并且持續時間長，導致高產蛋雞采食量下降，能量攝取不足，從而影響產蛋性能，蛋重減輕。Cerci等（2003)認為雞適宜生長環境溫度為16～25℃，超過該范圍會引起雞糖皮質激素和皮質醇等分泌過多，誘導體內產生過多的自由基，細胞膜內多不飽和脂肪酸氧化，產生過量的脂質過氧化物（張菁菁等，2016)，致使生產性能下降，蛋品質受到影響（劉宏芹等，2014)，同時，雞蛋在高溫下存放時間過長，會損壞雞蛋蛋白質結構和蛋黃膜。有關熱應激對蛋雞的影響，國內外大量研究表明，日糧中添加抗氧化劑可有效緩解蛋雞在高溫季節的氧化熱應激反應。維生素E（VE）是生育酚類化合物的總稱，且作為一種有效的生物抗氧化劑，可與易受攻擊的細胞膜選擇性結合，從而保護細胞膜的穩定性 （Scheideler等，2010；吳迪，2009）。汪求真等（2005）研究表明，當日糧中維生素E含量增高時，可有效提高機體抗氧化能力。本試驗通過對高溫環境下在蛋雞日糧中添加不同水平的維生素E，研究其對雞蛋不同存放期蛋品質和血清抗氧化能力的影響，以期提供用于夏季高溫條件下，提高蛋品質的解決方法。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 維生素E購自揚州大學飼料廠，濃度為500 IU/mg，試驗地點為江蘇昆山星期九休閑農莊蛋雞場，試驗蛋雞選用北京市華都峪口禽業有限責任公司培育的京粉Ⅰ號商品蛋雞。

試驗日糧參照美國NRC（1994）蛋雞營養需要配制而成。試驗基礎日糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養水平

1.2 試驗設計與飼養管理 選用健康的41周齡京粉I號蛋雞360只，隨機分為4個試驗組，每組3個重復，每個重復30只雞，采用3層階梯式籠養。試驗Ⅰ組為對照組，用基礎日糧飼喂，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組為試驗組，在基礎日糧的基礎上，分別添加100、200和300 mg/kg的維生素E。試驗設1周預試期，正式試驗從2014年8月1日至9月11日，為期42 d。試驗期內雞只自由采食，自由飲水，產蛋期恒定光照16 h，每天上下午分別給料1次，采用濕簾通風降溫。

1.3 指標測定

1.3.1 溫度測定 試驗期間每天分5個點 （舍內東南西北和中心）測定雞舍內溫度三次（8∶00、12∶00、18∶00），記錄每日平均溫度。

1.3.2 蛋品質指標測定 在試驗結束當天收集當日所產雞蛋，在室內恒定的25℃環境中放置1、15和25 d后用于雞蛋蛋品質的測定，每次每個重復隨機抽取雞蛋5枚，測定的蛋品質指標有蛋重、蛋形指數、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋黃重、蛋白高度、蛋殼厚度、蛋殼強度。雞蛋蛋重、蛋白高度、哈氏單位和蛋黃顏色采用SONOVA蛋品質自動分析儀（Egg Analyzer TM，Orka）測定；蛋殼強度采用蛋殼強度分析儀 （Egg Force Reader，Orka）測定；蛋殼厚度采用蛋殼厚度測定儀（Egg Shell Thickness Gauge，Orka）測定；蛋形指數采用游標卡尺測定。蛋黃在分離蛋清后采用電子天平進行稱重；蛋殼在清洗、曬干后采用電子天平進行稱重。

1.3.3 血清抗氧化指標測定 在試驗結束時，以重復為單位，每個重復隨機抽取6只蛋雞，禁食24 h后，翅靜脈采血，冰盒中靜置15 min，4000 r/min離心，取上清液4℃保存，用于測定血清中超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）、總抗氧化能力（T-AOC）。其中SOD采用羥胺法測定；MDA采用 TBA法測定；CAT采用鉬酸銨法測定；T-AOC采用還原鐵法測定。試劑的配制和操作步驟均按照試劑盒（購自南京建成生物工程研究所）說明書進行。

1.4 數據統計與處理 試驗數據采用SPSS18.0軟件進行單因子方差分析，不同處理間多重比較采用LSD法進行差異顯著性檢驗，P＜0.05為差異顯著水平。數值用“平均數±標準差”表示。

2 結果

2.1 溫度分析 試驗期間舍內環境最高溫度33℃，最低溫度26℃，平均溫度為28.5℃，均超出了蛋雞產蛋期的最適溫度，試驗期舍內溫度變化見圖1。

圖1 舍內溫度變化圖

2.2 蛋品質分析 由表2可知，在日糧中添加不同水平維生素E對蛋品質有一定影響。在蛋重方面，試驗Ⅱ組、試驗Ⅲ組相比于對照組，分別升高了5.76%、4.03%，但試驗組與對照組間差異并不顯著，而在試驗組間，試驗Ⅱ組較試驗Ⅳ組顯著升高（P＜0.05)；在蛋白高度方面，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組較對照組分別升高了10.53%、34.73%、23.16%，且試驗Ⅲ組較對照組顯著升高（P＜0.05)；在蛋形指數方面，試驗Ⅱ組較試驗Ⅳ組顯著上升（P＜0.05)；在蛋殼強度、殼重、蛋黃顏色、蛋黃重、哈氏單位方面各試驗組未出現顯著性變化（P＞0.05)，且在哈氏單位方面各組均值在72以上，為AA級（A級及以上為食用蛋）。

由表3、表4可知，日糧中添加維生素E的試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組與對照組在雞蛋放置不同時間蛋重、蛋殼強度、蛋殼厚度、殼重、蛋黃顏色、蛋形指數方面差異不顯著（P＞0.05)。在蛋白高度方面，放置15 d時，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組相對于對照組分別升高20.11%、58.97%、45.38%，且試驗Ⅲ、Ⅳ組顯著高于對照組（P＜0.05)，在放置 25 d時，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組無顯著差異（P＞0.05)；在蛋黃重方面，放置15 d時，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組無顯著差異（P＞0.05)，放置25 d時，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組相對于對照組分別升高3.13%、12.36%、13.99%，其中試驗Ⅲ、Ⅳ組顯著高于對照組（P＜0.05)；在哈氏單位方面，放置15 d時，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組相對于對照組分別升高13.82%、24.92%、23.68%，且試驗Ⅲ組顯著高于對照組（P＜0.05)，放置25 d時，各處理組間無顯著差異（P＞0.05)。

2.3 血清抗氧化指標分析 由表5可知，高溫季節日糧中添加維生素E的試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組和試驗Ⅰ組（對照組）在蛋雞血液抗氧化指標中，SOD、CAT含量各試驗組之間差異不顯著 （P＞0.05)。在T-AOC方面，試驗Ⅲ組較對照組升高了30.2%，且顯著高于對照組、試驗Ⅱ組（P＜0.05)；在MDA方面，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組較對照組降低了33.84%、30.78%、20.71%，且試驗Ⅱ組顯著低于對照組（P＜0.05)。

3 討論

3.1 高溫應激下日糧中添加維生素E對高產蛋雞蛋品質的影響 雞蛋的蛋黃顏色主要由葉黃素決定，葉黃素是蛋黃穩定的著色物質之一，家禽自身不能合成葉黃素，日糧中的葉黃素是蛋黃沉積的唯一來源。有研究表明，在日糧中添加維生素E能緩解高溫引起的產蛋雞蛋品質的下降（Yardibi等，2008)，可有效防止色素氧化，提高色素對蛋黃的著色能力（吳迪等，2009)；但也有研究表明，日糧中添加維生素E對蛋雞蛋品質 （蛋殼強度、哈氏單位、蛋黃顏色）并無顯著影響 （Manne等，2008)，造成這種差異的原因可能與維生素E的添加量有關。本試驗結果表明，日糧中添加維生素E的試驗組與對照組間蛋黃顏色并無顯著差異。Sahin等（2002)報道，高溫下日糧中添加維生素E可增加雞蛋蛋黃沉積能力，本試驗結果中，日糧中添加維生素E的試驗組與對照組在存放1、15 d時雞蛋蛋黃重并無顯著差異，但存放25 d時，日糧中添加200、300 mg/kg維生素E組的蛋黃重分別升高了12.36%、13.99%，維生素E是否對存放時間較長的雞蛋蛋黃重有影響，有待進一步研究分析。

表2 存放1 d時各組蛋品質指標比較

表3 存放15 d時各組蛋品質指標比較

表4 存放25 d時各組蛋品質指標比較

表5 各組血清抗氧化指標

哈氏單位是用來衡量雞蛋新鮮程度的重要指標。哈氏單位值越大說明蛋白越黏稠，品質越好，哈氏單位72以上為AA級，71～55為A級，54～31為B級，30以下為C級（A級以上為食用蛋，B級為加工蛋，C級僅部分供加工用）（趙夢瑩等，2013)。Kirunda等（2001)報道，在高溫環境下哈氏單位隨維生素E添加量的增加而提高，說明添加維生素E會影響蛋品質。本研究結果表明，在25℃室溫下存放1 d測樣，日糧中添加200 mg/kg維生素E的試驗組蛋白高度相較于對照組升高了34.73%，哈氏單位差異不顯著；室溫存放15 d后測樣，日糧中添加200 mg/kg維生素E的試驗組蛋白高度、哈氏單位均顯著高于對照組；放置25 d測樣，雖然試驗組與對照組蛋白高度、哈氏單位差異不顯著，但試驗組均高于對照組。由試驗結果可看出，日糧中添加維生素E可提高雞蛋蛋品質。蛋殼的強度和厚度也是衡量雞蛋蛋品質的重要指標，本研究結果表明，在日糧中添加維生素E并不影響雞蛋的蛋殼強度和厚度，這與 Jiang等（2013)的研究結論一致。

3.2 高溫應激下日糧中添加維生素E對高產蛋雞血清抗氧化指標的影響 熱應激可誘導體內產生過多自由基，自由基可破壞和攻擊DNA、細胞膜、蛋白質和脂類，在動物機體內引發膜脂質過氧化反應（Wolf等，1998)。SOD是生物體內一種重要的抗氧化防御酶，MDA是脂質過氧化物的最終分解產物之一，其含量直接反映機體脂質過氧化程度，并導致細胞膜的損傷（唐飛江等，2011)。體內SOD活力強時，MDA含量隨之降低。CAT是一類廣泛存在于動植物和微生物體內的末端氧化酶，通過催化轉移一對電子而最終將過氧化氫分解為水和氧氣。T-AOC的大小可反映機體抗氧化酶系統和非酶系統對外來刺激的代償能力以及機體自由基代謝狀態的強弱。本試驗結果表明，添加維生素E的試驗II組（100 mg/kg）MDA含量顯著低于未添加維生素E的對照組，這與武江利等（2008)的結論一致。試驗III組（200 mg/kg）的T-AOC顯著高于對照組。綜合分析表明，200 mg/kg維生素E能提高蛋雞的抗氧化能力。

4 結論

日糧中添加適量的維生素E有利于緩解蛋雞受高溫應激的影響。高溫條件下，在日糧中添加200 mg/kg維生素E，可提高雞蛋的蛋品質和蛋雞的抗氧化能力。

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The influence of dietary vitamin E（VE）supplementation on eggs quality stored at different times and antioxidant of hens in high temperature environment was investigated in this study.A total of 360 41-weeks old healthy laying hens of Jingfen numberⅠwere randomly divided into 4 groups.Each group had 3 repeats and each repeat had 30 hens.GroupⅠwas control group（basal diet），groupⅡ（basal diet+100 mg/kgVE），Ⅲ（basal diet+200 mg/kgVE）andⅣ（basal diet+ 300 mg/kgVE）were treatment groups.The first week was set for an adjustment period，the following six weeks were set for experiment period.The results showed that under heat stress（26～33℃，an average of 28.5℃）status，protein height of groupⅢwas significantly increased（P＜0.05），haugh unit in the storage 15 days of groupⅢwas significantly increased（P＜0.05）；yolk weight in the storage 25 days of groupⅢand groupⅣwere significantly increased（P＜0.05）；malondialdehyde（MDA) of groupⅡwas significantly decreased （P＜0.05），total antioxidant capacity （T-AOC）of groupⅢwas significantly increased（P＜0.05）.In conclusion，under the condition of heat stress，feeding daily ration added with 200 mg/kgVE could significantly improve the antioxidant of laying hens，and improve the egg quality of deposit 15 to 25 days.

vitamin E；heat stress；laying hens；egg quality；antioxidant

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20170807

S816.7

A

1004-3314（2017）08-0025-04

“十二五”國家科技支撐計劃（2014BAD13B02）；江蘇省農業三新工程項目（SXGC[2015]327）；江蘇省高校優勢學科建設項目（PAPD）；蘇州市農業科技支撐計劃項目（SNG201407）

*通訊作者