缸染法抗酸染色顯微鏡方法檢查抗酸桿菌結(jié)果分析

王敏娣+孫麗娜+梁慧+邱穎+陳然

[摘要] 目的 分析抗酸桿菌應(yīng)用缸染法抗酸染色顯微鏡方法進(jìn)行檢查的結(jié)果。方法 方便選擇2008年1月—2016年1月該單位收治的100例結(jié)核病患者作為觀察組，并將該單位同期收治的100例結(jié)核病患者設(shè)為對(duì)照組，予以對(duì)照組單片分置染色，予以觀察組單片浸入混合染色，比較兩組檢查結(jié)果。 結(jié)果 觀察組抗酸桿菌檢出率95.00%，對(duì)照組抗酸桿菌檢出率80%，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組污染率0.00%，對(duì)照組污染率10.00%，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P <0.05）。結(jié)論 缸染法抗酸染色顯微鏡方法應(yīng)用在抗酸桿菌檢驗(yàn)中，檢出率高，污染發(fā)生率較低，值得推廣。

[關(guān)鍵詞] 抗酸桿菌；缸染法抗酸染色顯微鏡；檢查結(jié)果

[中圖分類號(hào)] R331 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2017）03（b）-0083-03

[Abstract] Objective To analyze the application effect of cylinder dyeing acid-fast stain microscopy method in examining the acid-fast bacilli results. Methods 100 cases of patients with tuberculosis admitted and treated in our unit from January 2008 to January 2016 were conveniently selected as the observation group， and 100 cases of patients with tuberculosis admitted and treated in our unit at the same period were selected as the control group， the control group were given the monolithic separated dyeing， while the observation group were given the monolithic immersion mixture dyeing， and the examine results were compared between the two groups. Results The difference in the test rate of acid-fast bacillus between the observation group and the control group had statistical significance by comparison （95.00%vs 80.00%）（P<0.05）， and the difference in the pollution rate between the observation group and the control group had statistical significance（0.00% vs 10.00%）（P<0.05）. Conclusion The test rate of cylinder dyeing acid-fast stain microscopy method in examining the acid-fast bacilli is high and the incidence rate of pollution is lower， which is worth promotion.

[Key words] Acid-fast bacilli； Cylinder dyeing acid-fast stain microscopy； Examination results

結(jié)核病是我國發(fā)病率極高的一種慢性傳染病，該病主要由結(jié)核桿菌感染而誘發(fā)，因此給予結(jié)核病患者應(yīng)用一種可靠、操作簡單的篩選方法進(jìn)行檢查意義重大[1-2]。在臨床上預(yù)防和診斷結(jié)核疾病的途徑主要是通過檢測結(jié)核桿菌及分析其病理而實(shí)施的，所以，如何科學(xué)有效地檢查出分支桿菌的細(xì)菌，準(zhǔn)確迅速發(fā)現(xiàn)傳染源對(duì)于結(jié)核病患者的臨床診治具有十分重要的意義。缸染法抗酸染色顯微鏡方法是當(dāng)前臨床檢查結(jié)核病常用的方法之一，該檢查方法查找患者痰液中的抗酸桿菌時(shí)，操作較簡單，并不需要使用昂貴的儀器設(shè)備，同時(shí)具有極強(qiáng)的特異性，臨床工作人員可以省去進(jìn)一步確認(rèn)的步驟，從而明顯提高結(jié)核病控制工作的質(zhì)量[3-5]。為了分析抗酸桿菌應(yīng)用缸染法抗酸染色顯微鏡方法進(jìn)行檢查的結(jié)果，該文對(duì)2008年1月—2016年1月該單位收治的200例結(jié)核病患者作出研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇該單位收治的100例結(jié)核病患者作為觀察組，其中男64例，女36例；年齡21～37歲，平均年齡（22.26±1.08）歲；病程0.1～3年，平均病程（1.02±0.27）年。同時(shí)將該單位同期收治的100例結(jié)核病患者設(shè)為對(duì)照組，其中男62例，女38例；年齡20～36歲，平均年齡（22.14±1.02）歲；病程0.2～3年，平均病程（1.06±0.25）年。兩組患者的一般資料經(jīng)對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），可進(jìn)行對(duì)比。

1.2 方法

兩組患者在2周內(nèi)已進(jìn)行抗酸桿菌檢查，若患者檢查結(jié)果顯示為陽性，則均取1份痰液標(biāo)本，每份痰液標(biāo)本均作直接涂片6張，自然干燥后，固定放置在100 mL初染劑中進(jìn)行染色，時(shí)間為5 min，然后取出4片使用自來水沖洗，用脫色劑脫色后，再用自來水沖洗，其中2片放置在100 mL脫色劑中，剩下2片則放置在100 mL復(fù)染劑中。上述涂片均各使用1張新玻片將其涂層盡量刮擦下來混入各染色組分中，并且當(dāng)做當(dāng)天的污染攻擊染液組分。其中對(duì)照組患者的標(biāo)本直接涂片采取單片分置染色，觀察組患者的標(biāo)本直接涂片采取單片浸入混合染色，模擬進(jìn)行平行檢測。同時(shí)取兩組抗酸桿菌檢查結(jié)果為陰性者的痰標(biāo)本直接涂片3份，主要當(dāng)做污染法陰性無污染對(duì)照。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

選擇SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件以及excel軟件分析兩組患者的全部數(shù)據(jù)資料，計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P <0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者鏡檢結(jié)果對(duì)比

觀察組患者的抗酸桿菌檢出率為95.00%，對(duì)照組患者的抗酸桿菌檢出率為80%，將兩組患者的抗酸桿菌檢出率進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)觀察組明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.2 兩組患者污染率對(duì)比

觀察組患者的抗酸桿菌檢查污染率為0.00%，對(duì)照組患者的抗酸桿菌檢查污染率為10.00%，將兩組患者的抗酸桿菌檢查污染率進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)觀察組明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表3。

3 討論

目前臨床檢查抗酸桿菌時(shí)，臨床標(biāo)本直接涂片抗酸染色顯微鏡方法是應(yīng)用范圍較廣的一種檢查方法，該檢查方法相對(duì)于熱染法來說，操作步驟更簡單，并且染液用量更少，同時(shí)還能對(duì)環(huán)境進(jìn)行保護(hù)[6-9]。當(dāng)前國內(nèi)結(jié)核病控制對(duì)策中，通過痰涂片對(duì)抗酸桿菌進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)方法是結(jié)核病控制工作人員找出傳染源的主要方法，該檢查方法設(shè)備并不復(fù)雜，操作難度低，同時(shí)可以快速獲取報(bào)告結(jié)果，具有極高的特異性[10-12]。但是直接涂片抗酸染色顯微鏡方法也存在部分缺點(diǎn)，比如敏感性不高，檢驗(yàn)結(jié)果較容易受痰標(biāo)本質(zhì)量、留置時(shí)間以及臨床檢驗(yàn)人員等因素的影響。基于此，詳細(xì)分析缸染法抗酸染色顯微鏡方法的優(yōu)缺點(diǎn)，并制定對(duì)應(yīng)措施，可直接關(guān)系到抗酸桿菌的臨床檢查結(jié)果[13-14]。

該研究結(jié)果顯示，觀察組抗酸桿菌檢出率95.00%，對(duì)照組抗酸桿菌檢出率80.00%，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組污染率0.00%，對(duì)照組污染率10.00%，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。該研究結(jié)論與孫麗娜等人[15]的研究觀點(diǎn)一致。值得一提的是，在該研究中，觀察組患者均未出現(xiàn)污染現(xiàn)象，該結(jié)果充分缸染法值得應(yīng)用在日常工作中。目前，已有部分臨床實(shí)驗(yàn)報(bào)道指出，通常情況下涂片陽性1 mL標(biāo)本內(nèi)含菌量并不低于5萬，一般需要大概10 000個(gè)抗酸菌/mL才可以取得陽性結(jié)果。如果標(biāo)本污染濃度低于上述濃度，則說明污染造成的影響并不大，再通過多個(gè)步驟沖洗后，也許污染已經(jīng)被消除。但是為了確保檢查結(jié)果，臨床工作人員還是應(yīng)該建議復(fù)核，這是因?yàn)槊刻旃ぷ髦械臋z出片數(shù)并不是很多[16-17]。基于此，缸染法并未產(chǎn)生污染現(xiàn)象，檢出者也提出復(fù)核建議，若該檢查方法進(jìn)一步被改善后，則能夠在很大程度降低臨床工作人員的工作量，再加上該檢查方法所使用的儀器價(jià)格并不高，全面推廣的難度也不大。即使缸染法沒有進(jìn)一步被改善，但是其手工操作也十分簡單，相對(duì)于單片分置手動(dòng)染色來說，工作效率更大，因此在某種程度上也可以緩解臨床工作人員的工作量，并且為臨床治療提供有參考價(jià)值的數(shù)據(jù)[18-20]。另外，該研究中，缸染法抗酸染色顯微鏡方法檢查組患者的檢出率為95.00%，再結(jié)合以往登記情況，需要進(jìn)行復(fù)核的人數(shù)并不多，該結(jié)果從另外一個(gè)方面說明，臨床對(duì)于己知感染患者，可省去復(fù)核這一步驟。由此可知，缸染法能夠當(dāng)做目前臨床未檢出抗酸桿菌的篩選方法。此外，缸染法中所使用的各試劑組分只要不對(duì)染色效果產(chǎn)生影響，則可以適當(dāng)重復(fù)應(yīng)用或者進(jìn)行過濾后再繼續(xù)應(yīng)用，甚至再次添加原液繼續(xù)應(yīng)用，從而在很大程度上降低成本[21]。但是臨床工作人員還是需要注意：參與混染全部涂片均需要徹底自然干燥同時(shí)固定后才可以進(jìn)行染色，如果未干燥，則多數(shù)屬于問題標(biāo)本，較容易致使污染，甚至形成染液報(bào)廢現(xiàn)象[22]。該種現(xiàn)象出現(xiàn)后，臨床鏡檢特點(diǎn)表現(xiàn)為產(chǎn)生的陳舊性絮狀?yuàn)A帶與背景并不相同，同時(shí)出現(xiàn)連續(xù)多片污染，染色過程中一觸碰便為污染。除非染色原因外，涂片或者涂片前也能造成污染，這些均值得臨床工作人員的重視。

綜上所述，抗酸桿菌檢驗(yàn)過程中使用缸染法抗酸染色顯微鏡方法，污染發(fā)生率較低，保證檢查結(jié)果，值得推廣。

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