缸染法抗酸染色顯微鏡方法檢查抗酸桿菌結果分析

王敏娣+孫麗娜+梁慧+邱穎+陳然

[摘要] 目的 分析抗酸桿菌應用缸染法抗酸染色顯微鏡方法進行檢查的結果。方法 方便選擇2008年1月—2016年1月該單位收治的100例結核病患者作為觀察組，并將該單位同期收治的100例結核病患者設為對照組，予以對照組單片分置染色，予以觀察組單片浸入混合染色，比較兩組檢查結果。 結果 觀察組抗酸桿菌檢出率95.00%，對照組抗酸桿菌檢出率80%，對比差異有統計學意義（P<0.05）。觀察組污染率0.00%，對照組污染率10.00%，對比差異有統計學意義（P <0.05）。結論 缸染法抗酸染色顯微鏡方法應用在抗酸桿菌檢驗中，檢出率高，污染發生率較低，值得推廣。

[關鍵詞] 抗酸桿菌；缸染法抗酸染色顯微鏡；檢查結果

[中圖分類號] R331 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）03（b）-0083-03

[Abstract] Objective To analyze the application effect of cylinder dyeing acid-fast stain microscopy method in examining the acid-fast bacilli results. Methods 100 cases of patients with tuberculosis admitted and treated in our unit from January 2008 to January 2016 were conveniently selected as the observation group， and 100 cases of patients with tuberculosis admitted and treated in our unit at the same period were selected as the control group， the control group were given the monolithic separated dyeing， while the observation group were given the monolithic immersion mixture dyeing， and the examine results were compared between the two groups. Results The difference in the test rate of acid-fast bacillus between the observation group and the control group had statistical significance by comparison （95.00%vs 80.00%）（P<0.05）， and the difference in the pollution rate between the observation group and the control group had statistical significance（0.00% vs 10.00%）（P<0.05）. Conclusion The test rate of cylinder dyeing acid-fast stain microscopy method in examining the acid-fast bacilli is high and the incidence rate of pollution is lower， which is worth promotion.

[Key words] Acid-fast bacilli； Cylinder dyeing acid-fast stain microscopy； Examination results

結核病是我國發病率極高的一種慢性傳染病，該病主要由結核桿菌感染而誘發，因此給予結核病患者應用一種可靠、操作簡單的篩選方法進行檢查意義重大[1-2]。在臨床上預防和診斷結核疾病的途徑主要是通過檢測結核桿菌及分析其病理而實施的，所以，如何科學有效地檢查出分支桿菌的細菌，準確迅速發現傳染源對于結核病患者的臨床診治具有十分重要的意義。缸染法抗酸染色顯微鏡方法是當前臨床檢查結核病常用的方法之一，該檢查方法查找患者痰液中的抗酸桿菌時，操作較簡單，并不需要使用昂貴的儀器設備，同時具有極強的特異性，臨床工作人員可以省去進一步確認的步驟，從而明顯提高結核病控制工作的質量[3-5]。為了分析抗酸桿菌應用缸染法抗酸染色顯微鏡方法進行檢查的結果，該文對2008年1月—2016年1月該單位收治的200例結核病患者作出研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇該單位收治的100例結核病患者作為觀察組，其中男64例，女36例；年齡21～37歲，平均年齡（22.26±1.08）歲；病程0.1～3年，平均病程（1.02±0.27）年。同時將該單位同期收治的100例結核病患者設為對照組，其中男62例，女38例；年齡20～36歲，平均年齡（22.14±1.02）歲；病程0.2～3年，平均病程（1.06±0.25）年。兩組患者的一般資料經對比差異無統計學意義（P>0.05），可進行對比。

1.2 方法

兩組患者在2周內已進行抗酸桿菌檢查，若患者檢查結果顯示為陽性，則均取1份痰液標本，每份痰液標本均作直接涂片6張，自然干燥后，固定放置在100 mL初染劑中進行染色，時間為5 min，然后取出4片使用自來水沖洗，用脫色劑脫色后，再用自來水沖洗，其中2片放置在100 mL脫色劑中，剩下2片則放置在100 mL復染劑中。上述涂片均各使用1張新玻片將其涂層盡量刮擦下來混入各染色組分中，并且當做當天的污染攻擊染液組分。其中對照組患者的標本直接涂片采取單片分置染色，觀察組患者的標本直接涂片采取單片浸入混合染色，模擬進行平行檢測。同時取兩組抗酸桿菌檢查結果為陰性者的痰標本直接涂片3份，主要當做污染法陰性無污染對照。

1.3 統計方法

選擇SPSS 19.0統計學軟件以及excel軟件分析兩組患者的全部數據資料，計數資料采用[n（%）]表示，采用χ2檢驗，以P <0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者鏡檢結果對比

觀察組患者的抗酸桿菌檢出率為95.00%，對照組患者的抗酸桿菌檢出率為80%，將兩組患者的抗酸桿菌檢出率進行對比，發現觀察組明顯高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.2 兩組患者污染率對比

觀察組患者的抗酸桿菌檢查污染率為0.00%，對照組患者的抗酸桿菌檢查污染率為10.00%，將兩組患者的抗酸桿菌檢查污染率進行對比，發現觀察組明顯低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），見表3。

3 討論

目前臨床檢查抗酸桿菌時，臨床標本直接涂片抗酸染色顯微鏡方法是應用范圍較廣的一種檢查方法，該檢查方法相對于熱染法來說，操作步驟更簡單，并且染液用量更少，同時還能對環境進行保護[6-9]。當前國內結核病控制對策中，通過痰涂片對抗酸桿菌進行的實驗方法是結核病控制工作人員找出傳染源的主要方法，該檢查方法設備并不復雜，操作難度低，同時可以快速獲取報告結果，具有極高的特異性[10-12]。但是直接涂片抗酸染色顯微鏡方法也存在部分缺點，比如敏感性不高，檢驗結果較容易受痰標本質量、留置時間以及臨床檢驗人員等因素的影響。基于此，詳細分析缸染法抗酸染色顯微鏡方法的優缺點，并制定對應措施，可直接關系到抗酸桿菌的臨床檢查結果[13-14]。

該研究結果顯示，觀察組抗酸桿菌檢出率95.00%，對照組抗酸桿菌檢出率80.00%，對比差異有統計學意義（P<0.05）。觀察組污染率0.00%，對照組污染率10.00%，對比差異有統計學意義（P<0.05）。該研究結論與孫麗娜等人[15]的研究觀點一致。值得一提的是，在該研究中，觀察組患者均未出現污染現象，該結果充分缸染法值得應用在日常工作中。目前，已有部分臨床實驗報道指出，通常情況下涂片陽性1 mL標本內含菌量并不低于5萬，一般需要大概10 000個抗酸菌/mL才可以取得陽性結果。如果標本污染濃度低于上述濃度，則說明污染造成的影響并不大，再通過多個步驟沖洗后，也許污染已經被消除。但是為了確保檢查結果，臨床工作人員還是應該建議復核，這是因為每天工作中的檢出片數并不是很多[16-17]。基于此，缸染法并未產生污染現象，檢出者也提出復核建議，若該檢查方法進一步被改善后，則能夠在很大程度降低臨床工作人員的工作量，再加上該檢查方法所使用的儀器價格并不高，全面推廣的難度也不大。即使缸染法沒有進一步被改善，但是其手工操作也十分簡單，相對于單片分置手動染色來說，工作效率更大，因此在某種程度上也可以緩解臨床工作人員的工作量，并且為臨床治療提供有參考價值的數據[18-20]。另外，該研究中，缸染法抗酸染色顯微鏡方法檢查組患者的檢出率為95.00%，再結合以往登記情況，需要進行復核的人數并不多，該結果從另外一個方面說明，臨床對于己知感染患者，可省去復核這一步驟。由此可知，缸染法能夠當做目前臨床未檢出抗酸桿菌的篩選方法。此外，缸染法中所使用的各試劑組分只要不對染色效果產生影響，則可以適當重復應用或者進行過濾后再繼續應用，甚至再次添加原液繼續應用，從而在很大程度上降低成本[21]。但是臨床工作人員還是需要注意：參與混染全部涂片均需要徹底自然干燥同時固定后才可以進行染色，如果未干燥，則多數屬于問題標本，較容易致使污染，甚至形成染液報廢現象[22]。該種現象出現后，臨床鏡檢特點表現為產生的陳舊性絮狀夾帶與背景并不相同，同時出現連續多片污染，染色過程中一觸碰便為污染。除非染色原因外，涂片或者涂片前也能造成污染，這些均值得臨床工作人員的重視。

綜上所述，抗酸桿菌檢驗過程中使用缸染法抗酸染色顯微鏡方法，污染發生率較低，保證檢查結果，值得推廣。

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