染色法、鹽水法及五聯檢法在陰道分泌物檢測中的對比分析

董林芳

（北京市羊坊店醫院婦科，北京 100102）

臨床采用陰道分泌物常規檢測（俗稱白帶常規）判斷女性生殖道健康，其中染色法和鹽水法是白帶常規檢測常用的方法，然而這兩種方法對檢查人員的經驗要求高，影響因素多，不易標準化且效率低[1]。近年來，五聯檢法在陰道分泌物檢測中的作用受到越來越廣泛的重視，該方法簡單便捷，無需染色和顯微觀察，易于臨床推廣。為了探討五聯檢法的準確性，本研究將其與染色法和鹽水法進行了比較，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年6月～2016年12月于我院婦科門診就診，且因病情需要選擇進行陰道分泌物檢測的338例患者作為研究對象，平均年齡（37.71±12.42）歲。納入標準：①有白帶增多，陰部瘙癢，白帶有異味，尿頻尿急等癥狀的患者；②年齡15～60歲。排除標準：在經期、絕經期、陰道用藥后及性生活后采集標本的患者。本研究已經倫理委員會批準，且所有患者家屬均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 由我院婦科醫生采集，采用無菌專用棉拭子取患者陰道、宮頸及后穹隆處提取分泌物，將采集后的棉拭子放入試劑盒配套的潔凈無菌加樣試管中。將同一份標本分成3分后立即送檢，分別用染色法、鹽水法及五聯檢法進行檢測。

1.2.2 染色法 用滅菌后的接種環從培養液中取一環標本，均勻涂抹在載玻片上，用酒精燈微微加熱使其迅速干燥，待冷卻用結晶紫、碘液、沙黃及脫色液進行染色，染色成功后用顯微鏡進行觀察。

1.2.3 鹽水法 將標本直接涂抹在載玻片上，滴入2滴濃度為0.9%的生理鹽水，混合均勻后用顯微鏡觀察。

1.2.4 五聯檢法 嚴格按照試劑盒說明書進行操作，將稀釋的陰道分泌物分別滴1滴至檢測板反應孔中，再在唾液酸反應孔中滴加唾液酸酶顯色液，將反應板置于37℃恒溫箱15 min后取出，在乙酰胺基葡萄糖苷酶孔中滴加終止液，觀察并記錄結果。

1.3 判定標準

①染色法、鹽水法：乳酸桿菌以每高倍鏡下視野革蘭陽性長桿菌≥6個為陽性；念珠菌以高倍鏡下看到孢子和菌絲為陽性；白細胞以每高倍視野白細胞≥15個為陽性；滴蟲以顯微鏡下看到滴蟲為陽性；細菌性陰道病（BV）以顯微鏡發現線索細胞≥20%為陽性。②五聯檢法：乳酸桿菌以過氧化氫不顯色或顯淡黃色為異常；白細胞以白細胞酯酶顯藍色為異常；BV以生唾液酸苷酶顯紅色或紫紅色，脯氨酸氨基肽酶顯黃色為異常；念珠菌和滴蟲以乙酰胺基酶為指標，顯黃色為異常，若pH≥4.8，表明滴蟲感染；若pH≤4.6，則為念珠菌感染。③清潔度：染色法、鹽水法清潔度按照《全國臨床檢驗操作規程》進行劃分，五聯檢法按各指標提示進行綜合劃分，共I-IV度。

1.4 統計學方法

采用SPSS 19.0統計學軟件進行分析。計量資料采用“±s”表示，計數資料采用x2檢驗，采用t 檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 各種方法診斷清潔度檢測結果比較

3種方法對陰道分泌物清潔度異常率的診斷，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 各種方法診斷清潔度檢測結果比較

2.2 各種方法病原微生物檢出率比較

染色法及五聯檢法對念珠菌的檢出率顯著高于鹽水法，差異有統計學意義（P＜0.05），五聯檢法對BV的檢出率顯著高于染色法及鹽水法，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 各種方法病原微生物檢出率比較 [n（%）]

3 討 論

陰道炎是婦女的一種常見疾病，主要由陰道黏膜及黏膜下結締組織發生炎癥引起，患者多伴外陰瘙癢、陰道分泌物增多等癥狀，對患者的生活和工作造成一定困擾[2]。傳統的染色法和鹽水法為手工操作，人為影響因素較大，標準不易統一，檢測耗時較長，因此急需新的檢測方法提高檢測效率。五聯檢法是將過氧化氫濃度、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶連同pH值一起做成聯檢卡，檢測白帶中乳酸桿菌、白細胞、BV、念珠菌、滴蟲及清潔度的方法，具有簡單方便，結果易判斷等優點，在臨床推廣中具有重要意義[3]。

本研究顯示，將染色法和鹽水法進行比較時，鹽水法對念珠菌的檢出率較低，原因為鹽水法在實際操作過程中經常會出現陰道上皮細胞核及細胞膜卷曲、有形成分重疊等現象，從而使鹽水對念珠菌的檢出率偏低，而染色法檢測將真菌的芽生孢子和假菌絲進行染色，使真菌的典型形態更加突出，提高了念珠菌的檢出率[4]。

本研究中，五聯檢法對清潔度診斷與鹽水法及染色法保持較好的一致性，對滴蟲、乳酸桿菌、白細胞的檢出率較高，與鹽水法及染色法比較，差異無統計學意義（P＞0.05），對BV的檢出率高于鹽水法及染色法，對念珠菌的檢出率高于鹽水法。原因為過氧化氫主要由乳酸桿菌產生，因此通過檢測過氧化氫含量指示乳酸桿菌的含量可保持較高的靈敏度和特異度；白細胞多為中性粒細胞，這類細胞中含白細胞酯酶，白細胞被細菌分解時，白細胞酯酶將被釋放出來，因此檢測白細胞酯酶含量可間接反應白細胞含量，還能避免白細胞破碎導致的漏檢；BV中的各種細菌有的會產生唾液酸苷酶，有的會產生脯氨酸氨基肽酶，五聯檢法綜合利用了這兩種酶，克服了單一酶檢測帶來的靈敏度缺陷；念珠菌和滴蟲均具有乙酰氨基葡萄糖苷酶，但感染念珠菌時pH≤4.6，感染滴蟲時pH≥4.8，因此可以根據乙酰氨基葡萄糖苷酶和pH值聯合判斷[5]，而滴蟲在傳統顯微鏡下觀察較為明顯，因此檢出率稍高于五聯檢法[6]。

綜上所述，五聯檢法在陰道分泌物檢測中具有直接、簡單、快速的特點，便于臨床婦科普查，值得臨床推廣應用。

參考文獻

[1] 姜昌麗,李翠娟,李雪梅,等.陰道分泌物五聯檢法與顯微鏡檢測法的對比分析[J].檢驗醫學與臨床,2017,14(6)：823-824.

[2] 施新顏,盧紅梅,沈涌海,等.陰道感染疾病1463例實驗室檢測分析[J].全科醫學臨床與教育,2015,13(03)：312-313.

[3] 徐 健,謝元宏,周 廣,等.5186例陰道分泌物五聯檢檢測結果的回顧性分析[J].四川解剖學雜志,2014,22(1)：18-20.

[4] 潘秀芳,黎 濱,卓 芬.婦科陰道分泌物不同涂片檢驗方法比較分析[J].中國實驗診斷學,2015,19(08)：1371-1373.

[5] 楊 杰,張連勝,郭瑞靜.陰道分泌物顯微鏡鏡檢法與陰道炎五聯檢測法的方法學比較分析[J].中國醫學創新,2013,10(02)：113-114.

[6] 阮 君,陸靜芬.臨床陰道分泌物檢測方法的比較[J].中國傷殘醫學,2014,22(01)：14-16.