不同滅菌方法對蟹味菇培養料中氨基酸含量的影響

楊紅澎 班立桐 黃亮

摘要[目的]篩選適合蟹味菇培養料的滅菌方法。[方法]分析3種滅菌方式（常壓滅菌、普通高壓滅菌、階梯式高壓菌滅）對蟹味菇培養料中氨基酸含量的影響。[結果]階梯式高壓滅菌培養料中氨基酸總含量最高（27.87%），而常壓滅菌的氨基酸總含量最低（2141%）。3種滅菌方式處理后的培養料中谷氨酸含量最高，天門冬氨酸和亮氨酸含量次高。[結論]階梯式高壓滅菌在工廠化規模化食用菌栽培中是一種比較好的滅菌方法。

關鍵詞蟹味菇；培養料；滅菌方法；氨基酸

中圖分類號S646文獻標識碼A文章編號0517-6611（2017）23-0025-02

Effects of Different Sterilization Methods on the Content of Amino Acids in the Culture Material of Hypsizygus marmoreus

YANG Hongpeng， BAN Litong*， HUANG Liang et al

（College of Agronomy & Resources and Environment，Tianjin Agricultural University， Tianjin 300384）

Abstract[Objective]To screen the sterilization method which is suitable for the culture material of Hypsizygus marmoreus. [Method] The effects of different sterilization methods（atmospheric pressure sterilization，ordinary high pressure sterilization，stepped high pressure sterilization）on amino acids in the culture material of Hypsizygus marmoreus were analyzed. [Result] The total content of amino acids in stepped high pressure sterilization was the highest（27.87%）， and the amino acid content was the lowest at atmospheric sterilization（21.41%）. In the three treatments， glutamic acid content was the highest in the culture material，aspartic acid and leucine content were higher.[Conclusion]Stepped high pressure sterilization is better than others in industrialized and largescale edible fungus cultivation.

Key wordsHypsizygus marmoreus；Culture material；Sterilization methods；Amino acid

基金項目天津市科技特派員項目（16 JCTPJC48800）；天津市蔬菜產業技術體系創新團隊項目（ITTVRS2017015）。

作者簡介楊紅澎（1974—），男，山西壺關人，副教授，博士，從事植物及食用菌次生代謝產物的分離鑒定研究。*通訊作者，教授，從事食用菌栽培研究。

收稿日期2017-07-24

食用菌栽培過程中，培養料滅菌是一重要環節。目前常用的食用菌培養料滅菌方法有普通高壓滅菌、常壓滅菌和階梯式高壓滅菌3種。工廠化栽培滅菌一般都是采用蒸汽高壓滅菌，即將培養料放入滅菌柜內，通過蒸汽加熱升溫，并在設定的溫度下保溫一定的時間，實現滅菌的目的[1]。不同的廠家，培養料滅菌也略有不同。

蟹味菇[Hypsizygus marmoreus（Peck）H.E.Bigelow]又名玉覃、鴻喜菇、海鮮菇、假松茸等，在分類學上，隸屬于擔子菌亞門（Basinomycotina）、層菌綱（Hymenomycetes）、傘菌目（Agaricales）、白蘑科（Tricholomataceae）、玉覃屬（Hypsizygus）[2]。蟹味菇屬于低溫型食用菌，自然條件下，在秋季與冬季多群生于山毛櫸等殼斗科闊葉樹種的朽木、風倒木與活立木中，因而隸屬于木質腐生菌類，有較強地分解木質素、纖維素、半纖維素的能力[2]。

蟹味菇具有豐富的營養價值，因其獨特的口感，享有“菇中第一脆”的美譽，其子實體的提取物能夠增強免疫力、降血壓，還能夠延緩衰老，是一種食用兼藥用的珍稀名貴物種。工廠化生產的有淺灰色和純白色2種品系，因其口感爽口深受國內外市場的歡迎。目前蟹味菇已經在全國多處地區推廣栽培，規模逐漸擴大，基本實現了機械化、半機械化規模生產[2-4]。

前期研究中發現階梯式滅菌方法對培養料中的葉酸、煙酸、維生素C、維生素B1破壞影響最小[1]，而不同的滅菌方式對培養料中氨基酸損失影響的量化分析少見報道。該研究考查了常壓滅菌、普通高壓滅菌、階梯式高壓滅菌對蟹味菇培養料中氨基酸含量的影響。

1材料與方法

1.1材料

培養料組成：雜木屑30%、棉籽殼25%、玉米芯23%、麥麩20%、石灰粉1%、石膏粉1%。

1.2主要儀器

AEZ00電子天平（瑞士METTLER公司）；L-8800型全自動氨基酸分析儀（日本日立公司）；真空干燥箱（中國上海博迅）；HVE-50高壓滅菌器（日本株式社和平山制作所）。

1.3方法

1.3.1培養料的滅菌。

分別稱取200 g培養料倒入三角瓶中封口，采用3種滅菌方法：常壓滅菌方法100 ℃下滅菌8～15 h及高壓滅菌方法①121 ℃下滅菌1.5～2.0 h；②100 ℃下用50～60 min，間隙式抽真空，將釜內的壓力抽成-0.05～-0.06 MPa，用12～15 min升溫，使釜內達121 ℃，在壓力011 MPa下保溫90 min關閉蒸汽，滅菌結束取出，備用。

1.3.2氨基酸測試方法及條件。

樣品用6 mol/L HCl于110 ℃水解24 h，提取蛋白水解氨基酸，用水溶液提取游離氨基酸，合并提取液，在氨基酸分析儀上測定氨基酸含量。

顯色劑為茚三酮；泵1壓力6.90～7.90 kPa，流速4.0 mL/min；泵2壓力0.89～1.00 kPa，流速3.5 mL/min；分離柱柱溫57 ℃；反應柱柱溫134 ℃ 。

2結果與分析

2.1常壓滅菌后培養料氨基酸測定結果

經檢測，在常壓滅菌培養料中含有17種氨基酸（表1），氨基酸總含量為2141%。其中谷氨酸含量最高（5.00%），其次含量高于1%的為天門冬氨酸（1.90%）、甘氨酸（1.39%）、丙氨酸（160%）、纈氨酸（1.49%）、異亮氨酸（100%）、亮氨酸（2.03%）、苯丙氨酸（1.16%）、精氨酸（1.25%）、脯氨酸（129%）。

2.2普通高壓滅菌后培養料氨基酸測定結果

經檢測，在普通高壓滅菌培養料中含有17種氨基酸（表2），氨基酸總含量為25.23%，其中谷氨酸含量最高（5.96%），其次含量高于1%的為天門冬氨酸（2.55%）、甘氨酸（1.61%）、丙氨酸（180%）、纈氨酸（1.67%）、異亮氨酸（1.08%）、亮氨酸（2.13%）、苯丙氨酸（1.27%）、精氨酸（1.66%）、脯氨酸（1.46%）。

2.3階梯式高壓滅菌后培養料氨基酸測定結果

經檢測，在階梯式高壓滅菌培養料中含有17種氨基酸（表3），氨基酸總含量為27.87%，其中谷氨酸含量最高（6.60%），其次含量高于1%的為天門冬氨酸（2.76%）、蘇氨酸（1.03%）、甘氨酸（1.75%）、丙氨酸（2.00%）、纈氨酸（1.86%）、異亮氨酸（1.22%）、亮氨酸（2.50%）、苯丙氨酸（1.48%）、精氨酸（181%）、脯氨酸（1.52%）。

3討論與結論

近年來，食用菌栽培已逐漸呈現出工廠化和規模化的趨勢，由于條件和資金投入的不同，各個工廠化企業使用的培養料、滅菌工藝、栽培條件有很大差別。該試驗從培養料中營養物質的角度分析了不同滅菌方式對蟹味菇培養料中氨基酸含量的影響，結果表明，3種方式處理后的培養料中谷氨酸含量最高，天門冬氨酸和亮氨酸含量次之。階梯式高壓滅菌培養料中氨基酸的總含量最高（27.87%），而常壓滅菌培養料中的氨基酸含量最低（21.41%）。說明滅菌方式對氨基酸有一定的破壞作用：階梯式高壓滅菌影響最小，其次是普通高壓滅菌，常壓滅菌的影響最大。

現已有研究表明，谷氨酸、天門冬氨酸和亮氨酸等多種氨基酸可作為碳氮營養參與真菌機體生長代謝[5]。在液體培養基中一些氨基酸和小肽能有效地誘導不同的捕食線蟲真菌產生大量的捕食器官，增強真菌對線蟲的捕殺能力[6]，培養基中氨基酸含量的高低對蟹味菇等食用菌的生長有重要的調控作用，不同滅菌方式對培養基的影響將直接影響到食用菌的生長調控。該研究表明階梯式高壓滅菌在工廠化規模化食用菌栽培中是一種比較好的滅菌方法。

參考文獻

[1] 楊紅澎，楊麗維，黃亮，等.階梯式高壓滅菌與常規滅菌方法對食用菌培養料微量營養素的影響[J].北方園藝，2016（10）：141-143.

[2] 孫培龍，魏紅福，楊開，等.真姬菇研究進展[J].食品科技，2009（9）：54-56.

[3] 王琦，章勤學.蟹味菇的營養價值及生物活性成分研究[J].食品研究與開發，2010，31（1）：173-174.

[4] 上官舟建，林汝楷，張運茂.真姬菇生物學特性的研究[J].食用菌學報，2004，11（4）：1-7.

[5] 蘇浩.氨基酸誘導寡孢節叢孢形成捕食器官的條件和機制初步研究[D].昆明：云南大學，2015.

[6] KHAN A，WILLIAMS K L，SOON J，et al.Proteomic analysis of the knobproducing nematodetrapping fungus Monacrosporium lysipagum[J].Mycological research，2008，112：1447-1452.