VEGF、VEGFR-1和MMP-9對良惡性胸腔積液的診斷價值

趙斌斌 李云霞 扁長萍 朱運奎

VEGF、VEGFR-1和MMP-9對良惡性胸腔積液的診斷價值

趙斌斌 李云霞 扁長萍 朱運奎

目的 探討血管內皮生長因子(VEGF)、受體VEGFR-1和基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)表達在良、惡性胸腔積液鑒別診斷中的價值。方法 采用ELISA 法，檢測35例惡性胸腔積液、33 例良性胸腔積液患者胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9 表達水平，并進行相關性比較分析。結果 惡性胸腔積液組中VEGF、VEGFR-1表達均明顯高于良性胸腔積液，MMP-9表達明顯低于良性胸腔積液，差異均有統計學意義(P<0.05)。惡性胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表達水平呈正相關。VEGF，VEGFR-1和MMP-9與惡性胸腔積液的病理類型無相關性。結論 胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表達可以作為良性和惡性胸腔積液鑒別診斷的標志物。

胸腔積液;惡性/良性;血管內皮生長因子;血管內皮生長因子受體-1；基質金屬蛋白酶-9

The Diagnostic Value of VEGF,VEGFR-1 and MMP-9 in Malignant/benign

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:690～692)

胸腔積液常見病因有結核性胸膜炎和惡性胸腔積液[1]。目前由于診斷技術的不足仍有部分胸腔積液患者病因不能確診。血管內皮生長因子(VEGF)與其受體VEGFR結合，促進腫瘤血管增殖，對胸腔積液的形成起著重要的作用[2]。基質金屬蛋白酶(MMPs)能夠通過降解細胞基質及基膜，增加血管壁通透性，參與惡性胸腔積液的形成[3]。目前已經證實肺癌患者VEGF及MMP-9水平顯著升高[4]。在臨床工作中，胸腔積液較組織標本取材容易，創傷小，研究價值較大。故本研究的目的是檢測胸腔積液VEGF，VEGFR-1和MMP-9的水平，以探討其在良惡性胸腔積液鑒別診斷中的作用。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選擇平涼市人民醫院2011年12月至2014年12月住院初診胸腔積液患者共68例，未經任何治療。

1.2 分組

患者入院超聲定位后胸腔穿刺送胸腔積液行常規檢驗。首先根據Light等提出的標準區分為滲出液組及漏出液組。滲出液中胸腔積液蛋白質/血清蛋白質比值大于0.5；胸液乳酸脫氫酶/血清乳酸脫氫酶比值大于0.6；胸液乳酸脫氫酶>血清乳酸脫氫酶正常上限的2/3。再對滲出液組的患者依據組織病理、細胞免疫學、影像學等資料分為為結核性胸膜炎組、惡性胸腔積液組及肺炎旁積液組。結核性胸腔積液診斷依據結核相關檢查或診斷性抗結核治療有效而確診。惡性胸腔積液診斷依據胸腔積液脫落細胞或者病灶組織的病理學檢查確診。

1.3 標本的采集與保存

患者入院治療前結合超聲定位穿刺抽液進行常規、生化、免疫學及脫落細胞學檢查。另取10 ml高速離心取上清液2 ml置管保存。

1.4 VEGF，VEGFR-1和MMP-9的測定

4 ℃解凍胸腔積液標本后，ELISA試劑盒(R&D公司生產)對胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9蛋白測定。

1.5 統計學方法

采用SPSS 16.0軟件對數據資料進行統計學處理，計量資料組間差異采用成組t檢驗,比較采用配對t檢驗，相關性分析使用線性回歸，P<0.05時差異有統計學意義。

2 結果

2.1 胸腔積液患者基本情況及病因比較

胸腔積液病因：惡性胸腔積液的病因中非小細胞肺癌21例、小細胞肺癌3例、間質瘤1例、其他(乳腺淋巴瘤、腎臟癌、消化器官腫瘤等)10例；良性胸腔積液的病因中結核性胸膜炎25例、其他(肺炎、心衰等)8例。依據標準入選患者共68例，根據分組標準分為惡性胸腔積液組和良性胸腔胸腔組。惡性胸腔積液組35例，其中男性患者19例，女性患者16例，平均年齡(63.26±14)歲，吸煙史(31.35±14.60)年。良性胸腔積液組33例，其中男性患者11例，女性患者12例，平均年齡(57.48±21)歲，吸煙史(28.64±35.20)年。惡性胸腔積液組和良性胸腔積液組在年齡、性別及吸煙史因素比較，P>0.05，無統計學意義。

2.2 良、惡性胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表達的比較

惡性胸腔積液組胸腔積液中VEGF、VEGFR-1表達均明顯高于良性胸腔積液(P<0.05)，惡性胸腔積液組胸腔積液中MMP-9表達均明顯低于良性胸腔積液(P<0.05)，見表1。

表1 良、惡性胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表達

2.3 良、惡性胸腔積液中VEGF、VEGFR-1與MMP-9相關性分析

相關性分析顯示,惡性胸腔積液中VEGF和VEGFR-1，VEGFR-1和MMP-9，VEGF和MMP-9蛋白表達呈正相關(γ=0.51,γ=0.46,γ=0.58，P<0.05)。良性胸腔積液中VEGF、VEGFR-1和MMP-9蛋白間表達均無相關性(P>0.05)。

2.4 惡性胸腔積液組中不同腫瘤類型VEGF、VEGFR-1和MMP-9表達

VEGF、VEGFR-1與MMP-9蛋白在不同腫瘤類型中表達，差異無統計學意義，P>0.05，見表2。

表2 惡性胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表達的比較

3 討論

腫瘤發生浸潤和轉移的必要條件是血管形成，VEGF可以和血管內皮細胞表面的2種膜受體VEGFR-1和VEGFR-2結合，組成血管生成的信號轉導系統[5-6]，是目前發現的最重要的促血管生長因子。血管通透性增加，血漿蛋白外滲是胸腔積液形成的主要機制之一。VEGF與受體結合激活酪氨酸激酶活性，誘發受體酪氨酸殘基自身磷酸化，引起下游信號轉導，增加毛細血管的通透性，提供胸腔積液形成的微環境[7]。以往許多研究一樣，我們的實驗中VEGF在惡性胸腔積液中表達明顯升高，可以作為診斷惡性胸腔積液的一個腫瘤指標[8-9]。VEGFR-1是惡性胸腔積患者的獨立的預后因子[10]，但其在鑒別良惡性胸腔積液的價值仍不明確。我們的研究惡性胸腔積液中VEGFR-1的表達明顯高于良性胸腔積液，提示胸腔積液中VEGFR-1的水平可以作為鑒別良、惡性胸腔積液的有用的分子標記物。

MMP-9除了降解細胞外基質外，還可增大細胞間質空隙，提供腫瘤血管形成空間，促進腫瘤血管形成。我們實驗中MMP-9在良性胸腔積液中的表達明顯增高，與Alfonso的結果不同[11]，原因可能與國內良性胸腔積液中結核性胸膜炎發病率較高，而Alfonso實驗中的良性胸腔積液中以肺炎旁積液等為主有關。最后，我們通過相關性分析發現，VEGF和VEGFR-1，VEGF和MMP-9，VEGFR-1和MMP-9表達呈正相關，提示其在胸腔積液形成過程中有協同作用。

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[4] 李 杰.MMP-9和VEGF的表達對非小細胞肺癌預后價值的評估〔J〕.中國現代醫生,2012,50(16):58-60.

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(編輯：甘 艷)

Pleural Effusion

ZHAOBinbin,LIYunxia,BIANChangping,etal.

PingliangPeople’sHospital,Pingliang,744000

Objective To investigate the value of vascular endothelial growth factor(VEGF)，its soluble receptor VEGFR-1 and matrix metalloproteinase-9(MMP-9)in differentiating benign from malignant pleural effusion.Methods Using ELISA，the levels of VEGF，VEGFR-1and MMP-9 in pleural effusion in 35 patients with malignant pleural effusion and 33 with benign pleural effusion were detected and compared.Results The VEGF,VEGFR-1 levels in malignant pleural fluid were markedly higher than those in benign pleural effusion，the MMP-9 levels in malignant pleural fluid were markedly lower than those in benign pleural effusion with a significant difference among VEGF，VEGFR-1 and MMP-9(P<0.05).In the pleural fluids,the values VEGF,VEGFR-1 and MMP-9 were significantly related to each other(P<0.05).There was no significant association among VEGF，VEGFR-1 and MMP-9 in patients with pathological type.Conclusion The measurement of VEGF,VEGFR-1 and MMP-9 levels in the pleural effusion could be useful.

Pleura effusion;Malignant/benign;Vascular endothelial growth factor(VEGF);Vascular endothelial grow factor receptor-1(VEGFR-1);Matrix metalloproteinase-9(MMP-9)

744000 甘肅省平涼市人民醫院(趙斌斌，李云霞，扁長萍)；730000 解放軍蘭州軍區總醫院(朱運奎)

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.04.051

R734.2

A

1001-5930(2017)04-0690-03

2016-06-08

2016-11-04)