牛磺酸對兔酒精性肝病的預防作用

韓明子

（延邊州動物疫病預防控制中心）

摘 要：本實驗分4組，分別為白酒灌胃建立兔酒精性肝損傷模型組，對照組0.9%生理鹽水，牛磺酸實驗組分高低兩組。飼養2周后，提前1日斷飼，第2天用生物機能分析系統做動脈導管測平均動脈壓。測完血壓后，采血3m1，立即以3000r/min離心15min，取上層血清，按照試劑盒方法測定TG。結果表明與模型組相比，高低兩種濃度的（5%和2%）牛磺酸均可以顯著降低酒精性肝損傷兔的血清甘油三酯（P<0.05）；高劑量組牛磺酸還能降低酒精性肝損傷兔血壓（P<0.05）；肝臟病理切片量化分析顯示，高低兩種劑量牛磺酸均可顯著降低酒精對肝臟的損傷（P<0.05），且高低劑量組的保護效果無顯著性差異（P>0.05）。

關鍵詞：牛磺酸；酒精性肝病；甘油三酯；量化分析

牛磺酸（taurine）是廣泛存在于人和動物體內的一種游離的氨基酸，它的生物學作用日益引起人們的重視[1]。肝臟是合成牛磺酸的主要場所，大量臨床和基礎研究表明，牛磺酸對多種肝損傷具有保護作用[2、3]，而它對酒精性肝損傷保護效果的研究并不多見，本次實驗主要探討牛磺酸對兔酒精性肝損傷的保護效果，從而為預防及治療酒精性肝損傷提供一些有益的參考。

酒精對人體的損害，尤其是對肝臟的毒性作用日益引起人們的重視。在西方國家，8O%肝硬變的原因是酒精中毒。酒精對病毒性肝炎、肝癌等的發生、發展及預后都有著重要的影響。我國現有酒民3億多，酒精性肝病的發病率在20%左右[1]。目前對酒精性肝損傷的研究工作偏重于篩選臨床治療藥物。如何通過飲食代替藥物來有效預防和治療酒精性肝病成為科研工作者研究的熱點。

牛磺酸又稱α-氨基乙磺酸，最早由牛黃中分離出來，故得名，是一種特殊的氨基酸，是人體必不可少的一種營養元素，有著平衡健康的奇妙功效。除了眼睛之外，牛磺酸還對其它器官有重要功效。例如，經過研究證實，人體心臟中牛磺酸含量最高。牛磺酸是通過保護心肌而增強心臟功能的。當心肌細胞中鈣離子流入量過高時，就會引發冠心病。牛磺酸可以調整心肌細胞中鈣離子的量，維持其平衡，實現強心。牛磺酸與心臟的關系已成為全世界重點研究的課題之一。此外，牛磺酸對肺、肝臟、胃腸等都有保護作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與藥品

選取雄性白兔8只，隨機分為4組：對照組2只，模型組2只，牛磺酸高劑量組（5%）2只，牛磺酸低劑量組（2%）2只。牛磺酸（食品級）由北京健力藥業提供，50度簡裝白酒（本地產散裝白酒）

1.2 造模及給藥途徑

正常對照組：每天早晨7時以0.9%生理鹽水灌胃。模型組：每天早晨7時以50度簡裝白酒灌胃。5%牛磺酸（高劑量）組：早晨按模型組白酒計量灌胃，并于下7時，以5%牛磺酸灌胃。2%牛磺酸（低劑量）組：早晨7時按模型組白酒計量灌胃，并于下午7時，以2%牛磺酸灌胃。各組兔均自由攝食、飲水，灌胃量各組均為10ml/kg bw，實驗周期為2周。

1.3 測定指標和方法

1.3.1 平均動脈壓（MAP）：實驗2周末，前1日斷飼，第2天用生物機能分析系統做動脈導管測平均動脈壓。

1.3.2甘油三酯的測定：測完血壓后，采血3m1，立即以3000r/min離心15min，取上層血清，按照試劑盒方法測定TG。

1.3.3 肝臟冰凍切片量化分析：處死兔后，迅速剖取肝左葉，取部分肝臟組織快速冰凍切片，用蘇丹Ⅲ染色后，用北航病理圖像分析系統進行免疫組化定量分析。其中，在隨機選取的三個視野里，將發生病理改變的（脂肪變性）肝臟細胞作為陽性目標，在鏡下均為紅染。將陽性目標在所選視野（即統計場）中面積所占的比例定義為面密度（density of visualfield），將三個面密度取均值最后用于統計分析。

1.4 統計學處理

所有數據均以“均數±標準差”表示，采用SAS軟件包對各組變量值做方差分析的q檢驗。

2 結果與討論

2.1 牛磺酸對兔血清TG和MAP的影響結果 （見表1）

由表1可見，在實驗末，模型組和其余三組的TG存在顯著性差異（P<0.0 5）。對照組、模型組以及高劑量5%牛磺酸組的MAP也存在顯著性差異。這說明牛磺酸高低劑量組均可顯著降低TG，尤其是牛磺酸高劑量組（5%）效果最佳。

2.2 冰凍切片量化分析結果（見表2）

由表2可見，模型組和其余三組面密度（陽性目標總面積/統計場總面積）具有顯著性差異（P<0.05）。而高低劑量組之間不存在顯著性差異 （P<0.05）。與模型組兔相比，治療組兔肝臟的損傷程度顯著降低，高低劑量治療組之間沒有發現顯著性差異。

2.3 國內外大量研究表明，酒精能對機體多種器官和系統產生不利的影響。其中肝臟是主要的受累器官。為此，本研究在參照相關方法的基礎上加以改良，通過白酒灌胃成功地復制出酒精性脂肪肝動物模型[4]。該造模過程與人類飲酒極其相似，故尤其適用于酒精性脂肪肝的預防與治療的基礎研究。

2.4 本實驗研究表明，模型組兔血壓高于正常組，且存在顯著性差異（P<0.05）。這說明酒精能引起兔血壓升高，而牛磺酸高劑量組兔血壓明顯下降，且與模型組存在顯著性差異（P<0.05）。此結果表明牛磺酸高劑量組能起到降壓作用。牛磺酸抗高血壓作用的機制目前尚未完全闡明，有作者發現在牛磺酸降壓作用的同時，血中腎上腺素、去甲腎上腺素水平下降，并與血中牛磺酸濃度上升有顯著的相關關系。

2.5 長期大量飲酒對肝臟功能有損害，除可引起酒精性肝炎和肝硬化外，還容易發生酒精性脂肪肝。此種脂肪肝主要是屬于甘油三酯堆積的類型，此外，還可引起血清中甘油三酯升高。血清甘油三酯（TG）升高是動脈粥樣硬化發生的危險因素，在臨床上常作為冠心病的信息指標，模型組兔血清甘油三酯（TG）高于正常組和牛磺酸高、低劑量組，且存在顯著性差異（P<0.05），而正常組和牛磺酸高、低劑量組之間差異無顯著性，這說明牛磺酸高、低劑量組均可顯著降低TG，尤其是牛磺酸高劑量組（5%牛磺酸）效果最佳 。

2.6 牛磺酸廣泛分布在動物組織內，海洋動物中含量尤為豐富，而且具有特異性低、范圍廣、無毒性等特點，對于它對脂肪肝的保護效果的研究，將為通過飲食來預防和治療酒精性肝損傷提供更廣泛的應用前景。

參考文獻

[1]Flint AC，Liu X，Kriegstein AR.Nonsynaptic glycine recepter activation during early neocortical development[J].Neuron，1998，43-53.

[2]陳岳祥，李石，張興榮.牛磺酸抑制實驗性肝纖維化大鼠細胞外基質沉積[J].中華肝臟病雜志，1999，165-168.

[3]GandhiVM，Cherian KM，Mulku MJ，eta1.Hypolipidemic action of taurine in rat[J].Indian J Exp Bial，1992，413-417.

[4]丁霞.酒精性肝損傷動物模型研究近況[J].北京中醫藥大學學報，1998，39-41.