消毒劑在不同條件下的殺菌效果探究

張藝虹林，毛宗勇，葉兆美，陳方琴

（1.四川鐵騎力士集團(tuán)馮光德實驗室，四川 綿陽 621000；2.三臺縣景福畜牧獸醫(yī)站，四川 綿陽 621100；3.國家生豬產(chǎn)業(yè)體系綿陽試驗站，四川 綿陽 621023）

消毒劑在不同條件下的殺菌效果探究

張藝虹林1，毛宗勇2，葉兆美1，陳方琴3

（1.四川鐵騎力士集團(tuán)馮光德實驗室，四川 綿陽 621000；2.三臺縣景福畜牧獸醫(yī)站，四川 綿陽 621100；3.國家生豬產(chǎn)業(yè)體系綿陽試驗站，四川 綿陽 621023）

試驗選取含碘（A）、醛類（B）、季銨鹽類（C）3 種養(yǎng)殖場常用消毒劑，以大腸桿菌為試驗用菌種，對消毒劑在不同存放方式、水質(zhì)（硬度、pH）條件下的殺菌效果進(jìn)行了初步研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，含碘消毒劑消毒效果受存放方式影響較大，在高溫和不密閉條件下穩(wěn)定性差，消毒效果較差；水的硬度對季銨鹽類消毒劑影響不大；水的 pH 對季銨鹽類消毒劑有一定影響。

消毒劑；存放方式；水質(zhì)；消毒效果

在現(xiàn)代化規(guī)模養(yǎng)豬中細(xì)菌性傳染病的危害十分嚴(yán)重，而細(xì)菌性疾病的暴發(fā)與飼養(yǎng)管理和環(huán)境的關(guān)系十分密切。消毒劑的使用與飼養(yǎng)環(huán)境息息相關(guān)，但是在目前的生產(chǎn)實踐中，很多消毒劑使用規(guī)范并未經(jīng)過試驗證明其有效性，造成一些消毒舉措無效或效果不理想。因而本試驗對生產(chǎn)常用的含碘類、季銨鹽類、醛類等幾種消毒劑進(jìn)行試驗，觀察其在不同條件下的殺菌效果，以期為消毒劑在養(yǎng)殖場的正確使用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗時間與地點

試驗于 2015 年 12 月至 2016 年 12 月在四川省綿陽市永興鐵騎力士集團(tuán)馮光德實驗室進(jìn)行。

1.2 試驗樣品

試驗所用消毒劑為實驗室檢測合格的不同廠家的含碘、醛類、季銨鹽類消毒劑。

1.3 試驗器材

超凈工作臺、電子天平、牛津杯、培養(yǎng)箱等。

1.4 主要試劑

營養(yǎng)肉湯、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基等。

1.5 試驗方法

1.5.1 樣品處理 將消毒劑固體或濃縮液體用無菌水按試驗所需比例稀釋配制成溶液。

1.5.2 制備培養(yǎng)基 營養(yǎng)肉湯：稱取 18 g 營養(yǎng)肉湯粉劑溶于 1 000 mL 蒸餾水中，高壓滅菌后 4 ℃保存?zhèn)溆谩I養(yǎng)瓊脂平板：稱取 38 g營養(yǎng)瓊脂粉劑溶于1 000 mL 蒸餾水中，高壓滅菌后冷卻至 50～60 ℃時在超凈工作臺中倒入滅菌平皿中，每個平皿中倒 6～ 8mL，冷卻備用。

1.5.3 制備標(biāo)準(zhǔn)菌液 將大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株劃線接種于營養(yǎng)瓊脂平板，37 ℃培養(yǎng) 16～18 h，分別取單個菌落于營養(yǎng)肉湯，37 ℃培養(yǎng) 16～18 h，3 000 r/min 離心 10min，觀察底部沉淀初步計量，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5.4 設(shè)計條件變量

（1）存放方式。

將碘類消毒劑（A1）、醛類消毒劑（B1）、季銨鹽類消毒劑（C1）分別 400 倍、500 倍、600 倍稀釋，制備3 組，存放于 10 mL 無菌 EP 管中；1 組室溫（25 ℃）不密閉，2 組室溫（25 ℃）密閉，3 組 37 ℃密閉。放置16～18 h，將每組樣品分別用牛津杯接于涂布了 100 μL 大腸桿菌菌液的營養(yǎng)瓊脂平板上，37 ℃培養(yǎng) 16～18 h。

（2）水的硬度。

根據(jù) GB/T 7477—1987《水質(zhì)鈣和鎂總量的測定EDTA 滴定法》測定滅菌自來水和滅菌去離子水硬度。

將 3 種季銨鹽類消毒劑 （C1、C2、C3）500 倍稀釋，制備 2 組，1 組使用滅菌自來水稀釋，2 組使用滅菌去離子水稀釋，存放于 10mL 無菌 EP 管中；將每組樣品分別用牛津杯接于涂布了 100 μL 大腸桿菌菌液的營養(yǎng)瓊脂平板上，37 ℃培養(yǎng) 16～18 h。

（3）水的 pH。

用精密 pH 試紙和筆式 pH 測定儀測定 3 份不同地區(qū)滅菌蒸餾水水樣 pH。

將季銨鹽類消毒劑（C1、C4）分別作 500、1 000倍稀釋，制備 3 組，分別使用 2 份滅菌蒸餾水稀釋，存放于 10mL 無菌 EP 管中；將每組樣品分別用牛津杯接于涂布了 100 μL 大腸桿菌菌液的營養(yǎng)瓊脂平板上，37 ℃培養(yǎng) 16～18 h。

1.5.5 結(jié)果判定 觀察記錄牛津杯底部周圍菌落生長情況，測量抑菌圈直徑。

2 結(jié)果

2.1 存放方式

根據(jù)生產(chǎn)及實驗室常用濃度，作 400～600 倍濃度梯度稀釋，測量出抑菌圈直徑，結(jié)果見表 1。由表 1 可知，在不同存放條件下，含碘消毒劑抑菌圈多為不可見，醛類消毒劑和季銨鹽類消毒劑可見明顯抑菌圈。

表1 不同存放條件抑菌圈直徑

2.2 水的硬度

根據(jù) GB/T 7477—1987《水質(zhì)鈣和鎂總量的測定EDTA 滴定法》，測得水樣 1（滅菌自來水）硬度為284mmol/L，水樣 2（滅菌去離子水）硬度為 0mmol/L。

由表 2可見，用不同硬度的水樣配制的 3種季銨鹽類消毒劑（C1、C2、C3），抑菌圈直徑差別不大。

表2 用不同硬度水樣稀釋的季銨鹽類消毒劑抑菌圈直徑 mm

2.3 水的 pH

用精密 pH 試紙和筆式 pH 測定儀測得 3 份不同地區(qū)滅菌蒸餾水水樣 pH 分別為 6.7、6.2、5.4。

由表 3可知，兩種季銨鹽類消毒劑在偏酸性環(huán)境下抑菌圈直徑變化趨勢不明顯。

表3 配制 24 h內(nèi)常溫密閉保存用不同 pH 水樣稀釋的季銨鹽類消毒劑抑菌圈直徑

3 結(jié)論與分析

3.1 存放方式

根據(jù)結(jié)果，在不同存放條件下，含碘消毒劑效果不穩(wěn)定，醛類消毒劑和季銨鹽類消毒劑受環(huán)境影響較小，其中季銨鹽類整體效果更佳。

碘制劑易揮發(fā)，在高溫和不密閉條件下穩(wěn)定性差，殺菌效果不佳，不適宜用于踏腳盆等長時間暴露在室外環(huán)境的消毒方式；醛類和季銨鹽類混合型消毒劑受溫度和揮發(fā)等影響較小。

3.2 水的硬度

兩份水樣來自同一地區(qū)，一份直接滅菌，一份做去離子處理后滅菌，選取的消毒劑為不易受其他環(huán)境條件影響的季銨鹽類消毒劑。試驗結(jié)果顯示，水的硬度對季銨鹽類消毒劑影響不明顯。

3.3 水的 pH

3份水樣來自不同地區(qū)，均作蒸餾及滅菌處理，經(jīng)測定水的 pH 均偏酸性，故選取 pH 為 6.8～8.0 的季銨鹽類消毒劑。

根據(jù)資料及文獻(xiàn)，季銨鹽類的最適 pH 為 10 左右。根據(jù)試驗結(jié)果與以往同條件數(shù)據(jù)比較，在偏酸性環(huán)境下，其殺菌效果有所降低。

4 問題與展望

多數(shù)消毒劑（如碘制劑、季銨鹽類）對有機(jī)物敏感，肉湯及營養(yǎng)瓊脂中的牛肉膏等成分可能對試驗結(jié)果有影響。

模擬環(huán)境變量時，非變量條件不易控制，容易造成結(jié)果誤差，后續(xù)試驗還需改進(jìn)模擬方法。

牛津杯法存在偶然性，本試驗數(shù)據(jù)均由多次重復(fù)試驗總結(jié)得出，但仍應(yīng)考慮更加精確的計量方式。

以上均為實驗室數(shù)據(jù)，后續(xù)還需結(jié)合生產(chǎn)場實際情況開展生產(chǎn)試驗，進(jìn)一步完善結(jié)論。

（編輯：富春妮）

日本人壽命全球最高

【德國《每日鏡報》網(wǎng)站 5 月 17 日報道】題：日本人活得最長

世界衛(wèi)生組織周三在日內(nèi)瓦公布的一項調(diào)查顯示，日本人壽命全球最高，平均預(yù)期壽命 83.7歲。這已是日本連續(xù)多年在這一調(diào)查中排名最高。隨后是瑞士人（83.4 歲）和新加坡人（83.1 歲）。

根據(jù)這項調(diào)查，德國人平均預(yù)期壽命 81歲，其中女性壽命 83.4 歲，男性 78.7 歲。而法國、冰島、盧森堡、瑞典、西班牙、澳大利亞和韓國人口的平均預(yù)期壽命均超過82歲。

世衛(wèi)組織的數(shù)據(jù)指出，美國人的平均預(yù)期壽命為 79.3 歲。中國的平均預(yù)期壽命為 76.1 歲。而在內(nèi)戰(zhàn)中的敘利亞，平均預(yù)期壽命僅為 64.5 歲。不過，平均預(yù)期壽命最低的人口來自于撒哈拉以南的非洲。在中非共和國、乍得、科特迪瓦、萊索托和尼日利亞，人們的平均預(yù)期壽命不足 55 歲。而塞拉利昂的平均預(yù)期壽命僅為 50.1 歲。

世衛(wèi)組織稱，營養(yǎng)不良、瘧疾和艾滋病等疾病以及武裝沖突是導(dǎo)致非洲很多國家人口壽命縮短的主要原因。

（轉(zhuǎn)自 參考消息[N]，2017-05-19）

S851.3

A

1002-1957(2017)03-0069-02

2017-04-20

張藝虹林（1993-），女，四川綿陽人，獸醫(yī)師，研究方向為動物醫(yī)學(xué).E-mail:mzzyhl@126.com