大腸癌組織中膜聯蛋白A1的表達及其病理意義

王保慶,張世強,陳衛花,陳冬波,薛青萍

(徐州醫學院第二附屬醫院腫瘤內科,江蘇徐州 221006)

膜聯蛋白A1(Annexin A1)是鈣磷脂結合蛋白Anx超家族的成員之一，在信號傳導、DNA復制、細胞周期調控、細胞轉化、細胞凋亡、鈣離子通道的形成等眾多的生理過程中發揮重要作用[1-3]。眾多的研究己經證實了Annexin A1與多種腫瘤的發生關系密切，其表達在多個系統的腫瘤中明顯異常，直接或間接參與腫瘤的發生[4-7]。在體外實驗中，Annexin A1對腫瘤細胞系亦有不同的影響，Annexin A1抑制喉癌Hep-2細胞的生長而促進結直腸癌細胞的生長和轉移[8-9]，本研究通過免疫組織化學檢測大腸癌組織、癌旁組織及腺瘤性息肉組織(管狀絨毛狀腺瘤)中Annexin A1的表達，探討其在大腸癌發生、發展過程中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2009～2013年本院病理科存檔大腸癌組織蠟塊的患者48例，其中男26例，女22例，年齡29～72歲，中位年齡56歲；癌旁組織(均與大腸癌標本是同一患者，但其中12例大腸癌標本無癌旁組織)36例，其中男24例，女12例；腺瘤性息肉組織15例，其中，男8例，女7例。所有病例術前均未進行放射治療和化學治療。標本分為大腸癌組、癌旁組織組及腺瘤性息肉組織組。

1.2方法

1.2.1主要試劑 Annexin鼠抗人單克隆抗體購自美國Abcam公司，免疫組織化學EnVisionTM染色試劑盒購自上海基因公司。

1.2.2實驗方法 免疫組織化學技術采用EnVision二步法。免疫組織化學過程：組織切片經脫蠟、水化后，用檸檬酸緩沖液(pH=6.0)微波熱修復抗原5 min，30 g/L A2O2封閉內源性的過氧化物酶，山羊血清封閉非特異性反應。PBS替代一抗作陰性對照。參照文獻對染色結果進行判斷。以大于或等于5%細胞質染色為陽性。

1.3統計學處理 采用SPSS13.0統計軟件進行數據分析，應用χ2檢驗分析Annexin A1表達與大腸癌臨床病理因素的相互關系，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1Annexin A1在大腸癌組織、癌旁組織及腺瘤性息肉組織的表達 Annexin A1免疫組織化學陽性產物主要定位于細胞膜和細胞質，部分患者可見胞核著色(圖1)。48例患者大腸癌組織中，Annexin A1陽性表達31例(64.6%)；36例患者癌旁組織中，Annexin A1陽性表達14例(38.8%)；15例患者腺瘤性息肉組織中，Annexin A1陽性表達6例(40.0%)；大腸癌組織中，Annexin A1的陽性表達率高于癌旁組織、腺瘤性息肉組織(P<0.05)。而Annexin A1陽性表達的癌旁組織、腺瘤性息肉組織均呈輕至重度不典型增生，且兩組間差異無統計學意義(P>0.05)。

圖1 Annexin A1蛋白在大腸癌組織中的表達(免疫組織化學×400)

2.2Annexin A1的表達與大腸癌臨床病理特征之間的關系 Annexin A1的表達與大腸癌的病理類型、腫瘤最大徑、有無淋巴結轉移和周圍組織侵犯有關，其中高分化腺癌、腫瘤最大徑小于5 cm、淋巴結未轉移及未侵犯周圍組織器官的患者Annexin A1的陽性表達率均明顯低于中或低分化腺癌、腫瘤最大徑大于或等于5 cm、有淋巴結轉移及伴周圍組織器官侵犯的患者(P<0.05)；Annexin A1的表達與大腸癌患者的性別差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 Annexin A1的表達與大腸癌臨床病理特征之間的關系(n)

3 討 論

大腸癌是常見的消化道惡性腫瘤，具有高復發和高轉移的特點。其5年總體生存率在60%左右，近年來發病率逐步上升，嚴重危害人民生活健康。目前對于大腸癌的發病及其轉移尚無有效的防治手段，其發病機制和防治依然是這一領域中的研究熱點。

Annexin家族是一類鈣依賴的磷脂結合蛋白，細胞中含量較高，參與細胞多種重要生理功能。Annexin A1是Anx家族的成員之一，是多種受體和酶的底物，如EGF受體、蛋白激酶C、酪氨酸蛋白激酶等[2]。Annexin A1參與了包括細胞信號傳導、炎性反應、DNA修復和細胞凋亡等多種細胞生理病理過程[10]。腫瘤的發生和發展是一個多因素作用、多基因參與、經過多階段形成的、極其復雜的生物學現象，信號傳導異常是腫瘤形成過程中的頻發事件，而Annexin A1在胞內信號傳導中發揮重要作用，故其在腫瘤形成及發展中的作用日益受到人們的關注。

本研究利用免疫組織化學對癌旁組織、腺瘤性息肉組織及大腸癌組織中Annexin A1的表達水平進行檢測，探討其在大腸癌發生、發展機制中的可能作用。研究結果顯示，大腸癌組織中Annexin A1的陽性表達率明顯高于癌旁組織、腺瘤性息肉組織；Annexin A1陽性表達的良性病變的黏膜上皮呈不同程度的不典型增生。高分化腺癌、腫瘤最大徑小于5 cm、無淋巴結轉移及未侵犯周圍組織器官患者的Annexin A1陽性表達率均明顯低于中或低分化腺癌、腫瘤最大徑大于或等于5 cm、有淋巴結轉移及伴周圍組織器官侵犯患者。上述結果提示，大腸癌變過程中Annexin A1表達水平明顯上調，且其表達水平與大腸癌的發展、轉移及侵襲能力密切相關，陽性表達者進展快，易發生轉移，侵襲能力強，說明Annexin A1表達水平可能是反映大腸癌發生、發展及臨床生物學行為的重要標志物。同時檢測大腸良性病變組織中Annexin A1的表達水平可能對預防和早期發現大腸癌有重要臨床價值，但仍有待積累更多的病例進行更深入的研究。

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