鄰苯二甲酸酯用不同溶劑提取效果的比較及HPLC檢測條件的選擇

田 姝，陳 明，王田田

鄰苯二甲酸酯用不同溶劑提取效果的比較及HPLC檢測條件的選擇

田 姝，陳 明，王田田

（江蘇紡織產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院,江蘇南京 210000）

本文通過研究建立了測定紡織品中的鄰苯二甲酸酯的高效液相色譜法，并比較了不同的溶劑對紡織品中的鄰苯二甲酸酯萃取效果，綜合各溶劑的毒性、回收率進(jìn)行了評價，針對紡織品確定了最環(huán)保有效的萃取溶劑，并用實(shí)際樣品進(jìn)行了相關(guān)的試驗驗證。

超聲萃取，鄰苯二甲酸酯，紡織品，高效液相色譜

鄰苯二甲酸酯是一種重要的環(huán)境激素類物質(zhì)，通過聚合鏈的物理鍵與聚合鏈的二級分子產(chǎn)生相互作用，所以在很多含PVC的紡織品中容易游離出來釋放到環(huán)境中，并通過消化道，呼吸器官和皮膚進(jìn)入人體，在體內(nèi)經(jīng)過一系列的化學(xué)反應(yīng)，發(fā)揮一種類似雌激素的作用，干擾人體內(nèi)分泌，產(chǎn)生病變，危害人體健康，特別是對兒童安全和健康危害極大。隨著世界各國對鄰苯二甲酸酯在紡織類用品特別是兒童用品中的關(guān)注，相繼出臺標(biāo)準(zhǔn)，法規(guī)來限制鄰苯二甲酸酯含量確保人類安全，鄰苯二甲酸酯的檢測方法研究也將越來越成熟，所以針對各國標(biāo)準(zhǔn)所使用不同的萃取溶劑來提取鄰苯二甲酸酯的現(xiàn)狀，有必要確定一種有效且環(huán)保的萃取溶劑。對于GB/T20388-2006 紡織品 鄰苯二甲酸酯的測定中的氣相色譜檢測方法，很容易出現(xiàn)拖尾峰，檢驗的重復(fù)性和靈敏性都比較差，所以開發(fā)一種高效液相色譜法對其檢測進(jìn)行補(bǔ)充是非常有必要的。

1 實(shí)驗部分

1.1 試劑與儀器

1.1.1 儀器：

高效液相色譜儀：Agilent1200； KQ500E數(shù)控超聲波震蕩器。

1.1.2 試劑與樣品：

樣品為陽性樣品，PAEs標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）, 鄰苯二甲酸丁芐酯（BBP），鄰苯二甲酸二（2-乙基己）酯（DEHP），鄰苯二甲酸二正辛酯（DNOP）, 鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP），鄰苯二甲酸二異癸酯（DIDP），鄰苯二甲酸二異丁酯（DIBP），鄰苯二甲酸二戊酯（DPP），鄰苯二甲酸二C6～8支鏈烷基酯（DIHP），鄰苯二甲酸二甲氧基乙酯（DMEP）均由Dr.Ehernstorfer公司提供，甲醇，叔丁基甲醚,二氯甲烷，乙酸乙酯，正己烷，三氯甲烷，四氫呋喃，丙酮，乙醇乙腈均為美國天地公司提供，本文試驗試劑除特別說明外，均為色譜純。

1.1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)品，用乙腈溶解并定容，配成適合濃度的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。各取合適體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)準(zhǔn)溶液儲備液，配制混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，并用乙腈逐級稀釋成所需的濃度。

1.2 實(shí)驗方法

1.2.1 流動相的選擇

選用常見的甲醇/水和乙腈/水作為流動相進(jìn)行梯度洗脫。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：乙腈/水作為流動相時，色譜分離效果好，除DIDP，DIHP，DINP為火焰峰外，其余各色譜峰分離很好，峰形尖銳；甲醇/水作為流動相，色譜峰分離效果較差部分峰由拖尾現(xiàn)象并且隨時間延長，基線隨之飄高，嚴(yán)重影響檢測結(jié)果。故選擇乙腈/水作為流動相。

1.2.2 色譜柱的選擇

紡織品實(shí)驗室一般都用C18的液相色譜柱進(jìn)行檢測。故首選C18柱進(jìn)行色譜分離。（選用HPLC常用C18柱。）本文選用AgilentXDB-C18（5.0um,4.6mm*250mm）,如圖1除三種火焰峰以外，峰形尖銳,,分離效果好。并且三種火焰峰分離效果同樣良好。

1.2.3 吸收波長的選擇

鄰苯二甲酸酯在190nm-400nm的紫外光譜吸收在200-240nm處有較強(qiáng)吸收，故選取吸收峰最高波長220nm為檢測波長。

1.2.4 HPLC圖形結(jié)果與GC/MS圖形結(jié)果比較

圖2 DIHP的GC/MS色譜圖

圖3 DIDP的GC/MS色譜圖

圖4 DINP的GC/MS色譜圖

圖5 進(jìn)完P(guān)AEs后的空白溶劑的GC/MS色譜圖

用GC/MS進(jìn)行檢測時，DIDP，DIHP，DINP為火焰峰并且靈敏度較低，受雜質(zhì)和柱流失干擾嚴(yán)重，易誤判未檢出或數(shù)值偏高，DIDP，DIHP火焰峰部分重疊難分離并且GC/MS進(jìn)樣后殘留嚴(yán)重。

1.2.5色譜參數(shù)

色譜:AgilentXDB-C18，5.0um,4.6mm*250mm；色譜柱溫度：60℃；

流動相：水-乙腈；DAD,波長220nm,

流速：1.0ml/min

進(jìn)樣量：10ul

梯度洗脫如下表：

時間/min 0.00 7.00 19.00 25.00 35.00 40.00 60.00水/% 60.0 53.0 35.0 29.0 14.0 9.0 5.0乙腈/% 40.0 47.0 65.0 71.0 86.0 91.0 95.0

進(jìn)樣色譜圖見下圖

圖2 DIHP的GC/MS色譜圖

2 結(jié)果與討論

2.1 提取溶劑的選擇

2.1.1 樣品前處理

取代表性樣品，剪成約5mm×5mm的碎片，混勻,稱取1g試樣（精確至0.01g），置于玻璃玻璃提取瓶中，加入合適試劑30ml，室溫下超聲1h。靜置冷卻至室溫，取2ml經(jīng)0.45 um聚四氟乙烯濾膜后進(jìn)HPLC分析。

2.1.2 不同溶劑提取

不同溶劑對目標(biāo)化合物的溶解能力不同，導(dǎo)致超聲萃取結(jié)果液不同。本文選擇了乙腈，甲醇等10種常見溶劑作為提取溶劑，對兩份陽性樣品進(jìn)行超聲萃取，表1，2給出了不同溶劑的萃取效果。叔丁基甲醚，二氯甲烷，乙酸乙酯，三氯甲烷，正己烷/丙酮混合物（1：1）這幾種的萃取結(jié)果相近，綜合溶劑峰，毒性，提取種雜質(zhì)干擾等影響考慮，選擇二氯甲烷為提取溶劑。

表1.樣品1 不同提取溶劑萃取效果

表2.樣品2 不同提取溶劑萃取效果

2.2 線性關(guān)系和方法檢出限

精確吸取各組分的鄰苯二甲酸酯的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制成標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，保留時間，線性方程，相關(guān)系數(shù)，檢出限按空白樣品的3倍信噪比進(jìn)行計算，如表3

表3 保留時間，線性方程，相關(guān)系數(shù)及檢出限

2.3 精密度和回收率

在標(biāo)準(zhǔn)棉貼襯里分別加入10，20,40mg/L的PAEs的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照本方法進(jìn)行檢測，每個濃度做10次平行實(shí)驗，計算回收率和精密度。表3結(jié)果表明，回收率為 87.8﹪-109.7﹪，RSD為2.5-7.3，結(jié)果表明本方法穩(wěn)定，準(zhǔn)確，符合相關(guān)檢測要求。

表3 保留時間，線性方程，相關(guān)系數(shù)及檢出限

3 結(jié)論

比較了不同萃取溶劑對紡織品中鄰苯二甲酸酯的提取效果，并找到了合適的高效液相色譜方法測定其含量，對現(xiàn)階段標(biāo)準(zhǔn)中的GC/MS的檢測方法中出現(xiàn)的殘留嚴(yán)重，柱流失和雜質(zhì)干擾影響檢測結(jié)果的缺點(diǎn)做了重要的補(bǔ)充w。

[1]GB/T20388-2006.紡織品:鄰苯二甲酸酯的測定.

[2]居靜霞，尹桂波.國內(nèi)外紡織品中鄰苯二甲酸酯類增塑劑的測定與限量對比分析，江蘇絲綢[J].2012(2):40-43.

[3]黃 珂，趙東豪，黎智廣，等.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定水中鄰苯二甲酸酯，海洋環(huán)境科學(xué)[J].2011,30(4):590-593.

[4]葉曦雯，王卉卉，牛增元，錢 翌. 高效液相色譜法對水性涂料中11中鄰苯二甲酸酯的同時測定分析測試學(xué)報，2009,28(5):550-554.

[5]食品包裝材料中的鄰苯二甲酸酯增塑劑殘留的檢測.檢驗檢疫科學(xué),2008,6(18):45-47.

[6]劉慧杰，鄰苯二甲酸酯類化合物的毒理學(xué)效應(yīng)及對人群健康的危害.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2004,26(19):1778-1781.

[7]食品包裝材料中鄰苯二甲酸酯類增塑劑遷移量的測定.塑料科技,2014,42(7):110-113.

[8]美國消費(fèi)品安全委員會官方測試方法. CPSCCH-C1001-09.3.

[9]歐盟標(biāo)準(zhǔn)EN14372-2004.

Different solvent extraction of phthalic acid ester effect comparison and HPLC for the selection of the test conditions

TIAN Shu, CHEN Ming,WANG Tian-tian
(Jianshu textiles quality services inspection test institute,Jiangsu Nanjing 210000,China)

This article through studies established for determination of phthalates in textiles of high performance liquid chromatography (hplc) method, and compares the different solvent for phthalates extraction effect of textile, comprehensive toxicity, recovery rate of each solvent was evaluated, identified the most environmentally effective extraction solvent for textiles, the related test and actual samples.

ultrasonic extraction；phthalic acid ester；textiles,hplc

TS190.92

A

投稿日期：2017-04-10

田姝（1982—），女，助理工程師。主要從事紡織品安全檢驗及研究工作。