NaCl脅迫對鹽角草不同階段生長和水分生理的影響

包靈++黃俊華++楊文英++王鋒

摘要：采用室內盆栽方法研究了不同濃度NaCl處理對鹽角草不同階段（7、21、42 d）生長和水分生理的影響。結果表明：任一階段中，隨著鹽濃度的升高，鹽角草鮮重、束縛水含量呈先上升后下降趨勢；水勢、含水量（占鮮重）呈下降趨勢；自由水/束縛水呈先下降后上升趨勢。株高在處理7 d時隨鹽濃度升高而升高，21 d隨鹽濃度升高先上升后下降，42 d隨鹽濃度升高而下降。外滲物的量在1周內隨鹽濃度升高呈先下降后上升趨勢，之后隨鹽濃度的升高而升高。自然飽和虧在短時間內（7 d）隨鹽濃度升高而下降，21 d時則隨鹽濃度升高先下降后升高，42 d隨鹽濃度升高呈現先上升后降低趨勢。綜上所述，鹽角草的生長是需鹽的，200～400 mmol/L NaCl濃度對其生長是順境，無鹽或高鹽（>400 mmol/L）環境對其生長是逆境。

關鍵詞：NaCl脅迫；鹽角草；不同階段；水分生理

中圖分類號：S332.6文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2017）06-0048-06

AbstractThe effects of different NaCl treatments on the growth and water physiology of Salicornia europaea at different stages （the 7th， 21th， 42th day） were studied by a pot experiment in lab. The results showed that at any stage， with the increase of NaCl concentration， the fresh weight and bound water content of S. europaea firstly increased and then decreased； the water potential and water content （FW） presented decrease trends； the free water/bound water decreased at first and then increased. With the increase of NaCl concentration， the plant height increased at the 7th day， rose firstly and then reduced at the 21th day， while declined gradually at the 42th day. The amount of extravasation reduced firstly and then went up in the first week with the increase of NaCl concentration， after then it showed a rising trend. The natural water-saturated deficit（NWSD）decreased in short time（7th day）when the concentration of NaCl increased， decreased firstly and then rose at the 21th day， and increased firstly and then decreased at the 42th day. In conclusion， the growth of S. europaea had a requirement of salt， 200～400 mmol/L NaCl was good for its growth， and no salt or high salt （>400 mmol/L） environment was adverse to its growth.

KeywordsNaCl stress； Salicornia europaea； Different stages； Water physiology

鹽堿土壤是制約農業生產的重要因素之一。我國鹽堿土面積約為3 700×104 hm2 ，相當于現有耕地面積的1/4。要提高我國人民現有的生活水平，除提高糧食單產外，唯一出路就是開發利用大面積鹽堿地和沙漠荒地[1]。鹽生植物是一種天然的抗逆物種，能夠在鹽漬土壤上正常完成整個生活史，具有較強的抗鹽、抗旱能力，有重要的研究價值。且隨著分子遺傳學的快速發展，鹽生植物成為一種重要的耐鹽種質資源——耐鹽基因庫[2]。顯然，大力開展鹽生植物研究，不但具有重要的理論意義，且更具實用價值。

鹽角草（Salicornia europaea）為藜科鹽角草屬的一年生真鹽生植物，被認為是世界上最耐鹽的陸生植物之一[3]。張梅茹等[4]研究發現200 mmol/L左右的鹽濃度是鹽角草生長的最適濃度，在該濃度下，鹽角草體內SOD、POD、CAT及MDA含量達到最小值。尹海龍等[5]以NaCl模擬不同鹽度環境，用盆栽試驗研究了氮處理對鹽角草生長發育的影響，結果表明同一施氮水平下，隨著鹽度的增加，同化枝的滲透調節能力增大。臧潔等[6]采用RACE技術從鹽角草中擴增獲得Cu/Zn-SOD基因，通過耐鹽性分析表明鹽角草Cu/Zn-SOD基因可能在鹽脅迫逆境中起耐受性作用。

目前關于鹽角草耐鹽生理的研究多集中在離子吸收運輸[7-9]、抗氧化代謝[10]以及基因表達[11]等方面，對于鹽脅迫下鹽角草體內水分生理變化的研究卻少見報道。本試驗采用室內盆栽方法，以鹽角草為材料，研究NaCl脅迫對鹽角草不同階段生長和水勢、膜透性、束縛水含量等水分生理指標的影響，以期進一步揭示其耐鹽機制，為培育耐鹽作物品種和提高植物抗鹽性提供一定的參考。

1材料與方法

1.1材料的培養和處理

挑選大小一致、飽滿的鹽角草種子（采于吐魯番市艾丁湖），于2016年4月初播種于裝有蛭石的干凈塑料盆中，每盆播30粒種子，于室溫下培養。萌發后用1/2濃度的Hoagland營養液澆灌，幼苗長至4 cm左右時疏苗，每盆保留20株左右。生長3個月后用含有NaCl的1/2 Hoagland營養液進行處理，NaCl濃度分別為0（CK）、200、400、600、800 mmol/L。每天以固定濃度的NaCl溶液澆灌，澆灌量為持水量的兩倍，約800 mL。在處理的第7、21、42 d取樣，進行各項生理指標的測定，每處理重復3次。

1.2株高、鮮重及膜透性的測定

各處理鹽角草均隨機選取10株，測定株高，然后用去離子水反復沖洗干凈，用吸水紙吸干，稱鮮重。細胞膜透性的測定采用電導儀法[12]。

1.3水勢、含水量、束縛水含量的測定

用小液流法[12]測定不同NaCl濃度下植物的水勢：

其中，i：解離系數（CaCl2=2.60）；C：溶液濃度（mol/L）；R：氣體常數[（0.008 314 L·MPa）/（mol·K）]；T（K）：絕對溫度[273+t（℃）]。

組織含水量的測定采用高俊鳳[13]的方法。稱2 g鮮樣浸入水中，6 h后取出，吸干表面水分，稱飽和鮮重。根據公式計算組織含水量、自然飽和虧：

組織含水量（占鮮重）=（FW-DW）/FW×100%，DW：樣品干重；

自然飽和虧 =（1-RWC）×100%，RWC為組織相對含水量。

參照史樹德等[14]的方法測定束縛水的含量并計算自由水/束縛水：

束縛水含量（%）= 總含水量（%）-自由水含量（%）。

1.4數據處理

試驗數據利用Microsoft Excel 2003進行做圖，采用SPSS 20.0軟件進行單因素方差分析，圖中誤差線上的小寫字母均表示不同濃度NaCl 處理在P<0.05時的顯著性差異。

2結果與分析

2.1不同處理對鹽角草株高、鮮重的影響

由圖1可見，處理7 d，鹽角草的株高隨鹽濃度升高略呈上升趨勢，與對照相比，600、800 mmol/L的高鹽濃度也能促進其生長，各處理間差異不顯著。處理21 d，株高呈現先升高后下降的趨勢，在低鹽濃度下（≤400 mmol/L）促進其生長，超過一定濃度（>400 mmol/L）顯著抑制生長。處理42 d，株高隨鹽濃度上升呈下降趨勢，無鹽條件下達到最大值，為21.45 cm，800 mmol/L鹽濃度下值最小，為16 cm，比對照降低了25%。

如圖2所示，隨著鹽濃度的增大，鹽角草不同階段的鮮重均呈現先上升后下降的趨勢，且最大值均出現在200 mmol/L鹽濃度下。在短時間內600、800 mmol/L高鹽濃度同樣促進鮮重的增大，超過21 d后則會顯著抑制其生長。處理42 d，這兩個濃度下鹽角草呈現萎蔫狀態，800 mmol/L鹽濃度下鮮重達到三個階段里的最低值，為2.22 g。

2.2不同處理對鹽角草膜透性、水勢的影響

當植物受到逆境傷害時，質膜會先受到破壞，其選擇透性功能會減弱或喪失，透性增大，從而使細胞內的電解質外滲[15]。由圖3看出，處理7 d，隨著鹽濃度的升高，外滲物的量呈現先下降后上升趨勢，說明鹽角草在短時間內，在200～600 mmol/L鹽濃度下，細胞膜受害程度較輕，在無鹽條件和800 mmol/L鹽濃度下質膜均受到一定程度的損壞。處理21、42 d，外滲物的量隨鹽濃度增高呈現顯著上升趨勢，外滲物的量均在800 mmol/L NaCl濃度下達到最高值，分別比對照上升4.49倍和1.93倍。說明鹽角草在超過21 d的高鹽濃度脅迫下，細胞膜已受到嚴重傷害。

水勢是植物根系吸收水分、水分從植物體向外擴散的關鍵因素，是衡量植物抗逆生理的一個重要指標[16]。鹽角草體內水勢在不同階段內均隨鹽濃度的升高而呈現下降趨勢（圖4），各個濃度下的水勢在處理7 d時差異不顯著，處理21、42 d，800 mmol/L NaCl濃度下的水勢與對照相比差異顯著，不同鹽濃度下水勢均大幅度下降。水總是由水勢高處流向低處，植物體內的水勢越高，吸水能力越差。因此，與對照相比，施加不同濃度的鹽分會更有利于鹽角草組織吸水，將鹽分稀釋到不致害水平。

2.3不同處理對鹽角草含水量、自然飽和虧的影響

三個階段內鹽角草的組織含水量均隨鹽濃度的上升呈下降趨勢（圖5），處理7 d、處理21 d，不同濃度處理下的含水量沒有顯著差異。處理42 d，在低鹽濃度下（≤400 mmol/L）小幅下降，當鹽濃度為600、800 mmol/L時大幅度下降，分別比對照降低10%、8%，但含水量仍達到80%以上。說明鹽角草作為一種典型的真鹽生植物，在長達一個多月的高鹽濃度脅迫下，體內的肉質化組織含水量仍然很高，從而將鹽分進行稀釋，降低細胞的水勢，提高吸水能力。

自然飽和虧與相對含水量呈反比關系，反映了植物體內水分虧缺的程度，值越大，表明水分虧缺越嚴重[17]。由圖6可見，處理7 d，自然飽和虧隨鹽濃度的上升呈下降趨勢，說明短時間內，無鹽條件下，鹽角草體內水分虧缺較嚴重。處理21 d，400 mmol/L與200 mmol/L處理相比有所下降，之后隨著鹽濃度的升高，自然飽和虧也呈上升趨勢，說明經過一段時間的鹽脅迫后，600、800 mmol/L高鹽濃度下鹽角草體內水分不充足，處于缺水狀態。最后一個階段中，自然飽和虧隨鹽濃度升高呈現先下降后上升的趨勢，在200 mmol/L鹽濃度下達到最低值，表明長時間鹽脅迫下低鹽濃度范圍內鹽角草體內的水分比較充足，鹽脅迫對其造成的影響較小。由此可見，在無鹽條件或是高鹽脅迫下，均會造成鹽角草體內不同程度的水分虧缺，使整株植物表現出細弱、萎蔫和綠色加深的癥狀。

2.4不同處理對鹽角草束縛水含量及自由水/束縛水比值的影響

植物組織中的水分依據其存在狀態可分為自由水和束縛水兩類。當束縛水含量較多時，植物代謝緩慢，生長速度也變慢，但抗性較強；自由水含量較多時，情況相反[18]。從圖7來看，隨著鹽濃度的上升，不同階段內鹽角草體內的束縛水含量均呈現先上升后下降的趨勢。無鹽條件下，束縛水含量均達到最小值，鹽濃度為600 mmol/L時，含量最高，之后便呈下降趨勢。說明鹽角草在一定鹽濃度（≤600 mmol/L）范圍內，體內束縛水含量較高，有利于增強其應對鹽脅迫的能力。

當自由水/束縛水的比值較大時，植物組織代謝旺盛，生長速度快，但抗性較弱。圖8表明，三個階段內自由水/束縛水的比值均隨鹽濃度的升高呈先下降后上升的趨勢，均在不加鹽的情況下達到最大值，之后便呈下降趨勢，鹽濃度超過600 mmol/L后，又呈上升趨勢。表明鹽角草在無鹽或高鹽（>600 mmol/L）環境下，生長活動比較旺盛，抗性較低。

3討論與結論

生長狀況是植物應對鹽脅迫的綜合體現，也最能直接反映出其抗鹽性。李悅等[19]研究表明，翅堿蓬（Suaeda heteroptera Kitagawa）在低鹽處理時，生長受到促進，而高鹽（400 mmol/L）處理植株則死亡。蔣永超等[10]研究發現鹽角草鮮重最大值出現在50 mmol/L NaCl處，300 mmol/L NaCl處達到最小。本研究中，三個不同時期鹽角草鮮重均在鹽濃度為200 mmol/L時達到最大值，800 mmol/L NaCl時值最小，耐鹽程度幾乎為蔣永超等研究的鹽角草的三倍。這可能是因為種源地不同帶來的差異，本研究的鹽角草種子采自新疆中東部艾丁湖地區。艾丁湖地處我國最酷熱干旱的吐魯番盆地，年均降水量不足30 mm，蒸發量為降水量的數百倍，生態環境獨特，基于這一極端環境，該地區的鹽角草能夠耐受更高濃度的鹽分脅迫。

當受到鹽脅迫時，植物可以通過積累滲透調節物質，降低水勢，使自身維持細胞膜的穩定，保證其生命代謝的有序進行。張梅茹等[4]研究表明隨著NaCl處理濃度的增大鹽角草的電導率呈現先下降后上升的趨勢，在500、800 mmol/L NaCl處理時急劇上升。本試驗研究結果與前人一致，鹽角草外滲物的量在三個生長階段均在800 mmol/L NaCl濃度下達到最高值，分別比對照上升了30%、4.49倍和1.93倍，說明鹽角草在超過21 d的高鹽濃度脅迫下，細胞膜已受到嚴重傷害。李源等[20]對紫花苜蓿（Medicago sativa）在鹽脅迫下的生理反應研究表明，耐鹽性強的種質M7通過葉水勢的大幅度降低來增強其吸水能力以維持正常生長所需要的膨壓。劉春華等[21]對禾本科牧草5個耐鹽生理指標的研究表明，葉片水勢降低越多，其吸水能力就越強，越能克服鹽處理后造成的滲透脅迫。本試驗鹽角草呈現出同樣的變化趨勢，即隨著鹽濃度的升高，其水勢大幅度降低，處理42 d不同鹽濃度分別較對照下降了61%、112%、120%、180%，但體內含水量仍達到87%、86%、80%、82%，表明長時間鹽脅迫下鹽角草可以通過大幅度降低水勢來吸收外界水分，以此增強抗鹽能力。

當植物體內水分供應不足時，自然飽和虧可反映出植物的需水狀況。張榮梅[22]的研究結果表明，隨著NaCl濃度的增大，5個種源的黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr.）葉片水分飽和虧呈增加趨勢，但增加幅度并不一致，不同種源間變化差異較大。本試驗中鹽角草在不同生長階段內隨鹽濃度的升高，自然飽和虧表現出各自不同的變化趨勢，但綜合三個生長時期來看，鹽角草在三周左右的時間自然飽和虧達到最大值，隨后呈下降趨勢。鹽濃度在200～400 mmol/L時，三個階段內自然飽和虧均呈現較低值，說明該濃度范圍內鹽角草體內水分狀況良好，其生長代謝比其它濃度下更趨于正常，耐鹽性也較強。

綜上所述，無論從鮮重、膜透性這些生長指標還是從水勢、含水量、自然飽和虧這類水分生理指標來看，鹽生植物鹽角草的旺盛生長都是需鹽的，且在200～400 mmol/L NaCl濃度下各項生理指標表現出較好水平，無鹽條件下鹽角草植株細弱，顏色濃綠，分枝較少；高鹽條件下則整株萎蔫，在無鹽或高鹽濃度脅迫下長勢均不好。本試驗表明，鹽角草是通過降低水勢、自然飽和虧和自由水/束縛水比值，同時提高束縛水含量來耐受鹽分脅迫的。鹽角草的生長狀況及其水分生理情況均表明其有較強的耐鹽性。

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