鹿血復(fù)方口服液制備工藝優(yōu)選及總黃酮和氨基酸成分測定

薄士儒，李帛儒，王全凱

（1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，吉林吉林132101；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，吉林長春130000）

鹿血復(fù)方口服液制備工藝優(yōu)選及總黃酮和氨基酸成分測定

薄士儒1*，李帛儒1，王全凱2

（1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，吉林吉林132101；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，吉林長春130000）

目的：對鹿血復(fù)方口服液進(jìn)行制備工藝優(yōu)選及成分測定。方法：正交試驗(yàn)法，對醇沉濃度，靜置時(shí)間，加蜂蜜量進(jìn)行制備工藝優(yōu)選，并對其總黃酮和氨基酸成分進(jìn)行測定。結(jié)果：醇沉濃度達(dá)到60%，靜置4小時(shí)，加入蜂蜜40克，可以得到較好的色澤，澄明度以及口感。總黃酮和氨基酸含量達(dá)到0.94%和1.66%。結(jié)論：口服液性質(zhì)穩(wěn)定，測定方法可行、可靠。

鹿血口服液；工藝優(yōu)選；成分測定

由于目前市售鹿血酒和鹿血粉膠囊其功能特性不明確,只能為少數(shù)人所利用，很少有成熟的技術(shù)將鹿血加工成廣大消費(fèi)者直接食用的綠色保健食品。本研究對實(shí)驗(yàn)室制備得到的鹿血復(fù)方口服液進(jìn)行制備工藝優(yōu)選及有效成分測定，從而為開發(fā)預(yù)防和治療老年癡呆病癥的新型保健產(chǎn)品奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

725型可見光分光光度計(jì)（上海精密儀器儀表有限公司），鹿血復(fù)方口服液（實(shí)驗(yàn)室自制），其他試劑均為分析純、色譜純（北京北化精細(xì)化學(xué)品有限公司）。

2 方法

2.1 制備工藝優(yōu)選

采用正交試驗(yàn)的方法，以色澤、澄明度、口感為評價(jià)指標(biāo)，對醇沉濃度，靜置時(shí)間，加蜂蜜量進(jìn)行篩選。制備工藝因素水平見表1。對其色澤，澄明度以及口感進(jìn)行綜合評分，各項(xiàng)分為10個(gè)檔次，每個(gè)檔次為一個(gè)（+），滿分為10個(gè)（+）。色澤按顏色由深到淺(+)遞減，澄明度由澄清至渾濁（+）遞減，口感以由甜至淡（+）遞減折算后酌情加減分?jǐn)?shù)。

表1 制備工藝因素水平表

2.2 鹿血口服液中總氨基酸和總黃酮的測定

2.2.1 鹿血口服液中總氨基酸測定將配置好的對照品溶液1毫升、2毫升、3毫升、4毫升、5毫升于50毫升容量瓶中，加水稀釋至刻度，然后精密吸取上述溶液1毫升于25毫升容量瓶中，分別加入0.5毫升磷酸緩沖溶液，0.5毫升2%茚三酮乙醇溶液，搖勻后置沸水浴中煮沸15分鐘，取出，以冷水冷卻至室溫，加水稀釋至刻度，搖勻，顯色，在570納米處測定吸光度。以精氨酸（毫克）為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

取鹿血口服液5毫升，加水定容至25毫升，搖勻，參照標(biāo)準(zhǔn)曲線測定方法計(jì)算氨基酸含量。另取一份不加2%茚三酮乙醇溶液的為空白對照。

2.2.2 鹿血口服液中總黃酮的測定分別精密量取對照品溶液0.00毫升、1.00毫升、2.00毫升、3.00毫升、4.00毫升、5.00毫升于25毫升容量瓶中，分別加水5.0毫升、4.0毫升、3.0毫升、2.0毫升、1.0毫升、0.00毫升，再各加入5%亞硝酸鈉溶液1毫升，搖勻，靜置6分鐘，各加10%硝酸鋁溶液1毫升，搖勻，放置6分鐘，加1毫升NaOH，加水至刻度，搖勻，放置15分鐘，在509納米處測定吸光度，以蘆丁為對照品濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

取鹿血口服液15毫升，加水定容到100毫升容量瓶中，搖勻。參照標(biāo)準(zhǔn)曲線測定方法計(jì)算總黃酮含量。另取一份不加亞硝酸鈉和硝酸鋁作為空白對照[1]。

表2 制備工藝正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 鹿血口服液總氨基酸和總黃酮含量

3 結(jié)果與分析

3.1 制備工藝結(jié)果及分析

由表2可以看出，影響試驗(yàn)結(jié)果的因素主次順序?yàn)锳>C >B，即醇沉濃度對試驗(yàn)結(jié)果影響較大，其次為加入蜂蜜量，醇沉?xí)r間對試驗(yàn)結(jié)果影響較小。由正交試驗(yàn)所得較好的工藝為A2、C3、B2。

3.2 總氨基酸和總黃酮測定結(jié)果

3.2.1 氨基酸標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程y=2.7268x-0.1929，r=0.9998。

3.2.2 總黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程y=9.9963x+0.0014，r=0.9998。

3.2.3 鹿血口服液總氨基酸和總黃酮含量（見表3）

表3結(jié)果表明，其氨基酸含量高于民間工藝鹿血酒（氨基酸含量為0.133%）[2]。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)將復(fù)方鹿血口服液的口感作為本品的一項(xiàng)客觀指標(biāo)，增強(qiáng)其風(fēng)味，在有營養(yǎng)作用的同時(shí)，也注意其視覺和感覺，以增強(qiáng)其可服用性。同時(shí)，明確對總黃酮和氨基酸成分的測定結(jié)果，為大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)奠定理論基礎(chǔ)。

[1]劉和剛,蘇明武,汪建平.養(yǎng)血口服液提取工藝的研究[J].湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2001,4(12)：7-8.

[2]李麗燕,吳越,張梅,等.新疆馬鹿茸血口服液的研制[J].石河子大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）,2005,2(04)：117-119.

TS201.2

A

10.14025/j.cnki.jlny.2017.14.017

薄士儒，碩士，助教，研究方向：藥用動植物資源的品質(zhì)評價(jià)與產(chǎn)品開發(fā)。