羧甲基纖維素鈉對4℃保存藏豬精液指標的影響

尼 瑪，晉美多吉，賴 可，陳曉英，譚占坤，任子利

（1.西藏自治區農牧科學院畜牧獸醫研究所，西藏 拉薩 850009；2.西藏自治區達孜縣農牧局，達孜 850100；3.西藏自治區日喀則市動物疫病預防控制中心，日喀則 857000；4.西藏農牧學院動物科學學院，林芝 860000）

仔豬生產

羧甲基纖維素鈉對4℃保存藏豬精液指標的影響

尼 瑪1，晉美多吉2，賴 可3，陳曉英1，譚占坤4，任子利4

（1.西藏自治區農牧科學院畜牧獸醫研究所，西藏 拉薩 850009；2.西藏自治區達孜縣農牧局，達孜 850100；3.西藏自治區日喀則市動物疫病預防控制中心，日喀則 857000；4.西藏農牧學院動物科學學院，林芝 860000）

試驗旨在研究羧甲基纖維素鈉（CMC）對藏豬精液4℃保存效果的影響，采用電刺激法采集健康藏豬精液，在改進的豬精液低溫稀釋液為基礎液中，添加不同濃度的CMC（0、6、12、18和24 μmol/L），將藏豬種公豬新鮮精液稀釋后于4℃環境保存至第5天，以藏豬精子活力、精子畸形率和精子頂體完整率為評價精液品質指標，探討CMC對藏豬精液4℃保存效果的影響。結果顯示：12 μmol/L CMC添加組藏豬精子活力、精子畸形率、精子頂體完整率均極顯著好于其他試驗組（P＜0.01）?？傊?，在改進的豬精液稀釋液中添加CMC 12 μmol/L可明顯改善4℃環境保存藏豬精液品質，該試驗研究為今后藏豬精液低溫保存的生產應用奠定了基礎。

羧甲基纖維素鈉（CMC）；藏豬；4℃環境；精液品質

4℃低溫保存，精子代謝活動水平低，脂質過氧化程度低，保存時間比常溫更長，同時可應用普通冰箱保存，經濟方便。任子利等[1]研究了維生素C對藏豬精液4℃保存及其精子全基因組DNA甲基化的影響，陳曉英等[2-4]先后研究了紅景天多糖、維生素E及不同稀釋液對藏豬精液4℃保存效果的影響，為藏豬精液低溫保存的進一步研究奠定基礎。

羧甲基纖維素鈉（Carmellose Sodium,CMC）又稱羧甲基纖維素鈉鹽。具有黏合、增稠、增強、乳化、保水、懸浮等作用[5]。在食品應用中不僅是良好的乳化穩定劑、增稠劑，而且具有優異的凍結、溶化穩定性，并能延長貯藏時間。在稀釋液中添加一定量的CMC可減緩精子沉降速度，延長沉淀時間，為使用前減少了搖勻次數，進而提高精液保存質量。張家慶等[6]研究表明在稀釋液中添加CMC 16 μmol/L，可明顯提高低溫液態保存后豬的精液品質。本試驗旨在探討CMC對生活在高海拔環境的藏豬精液4℃保存的效果，以提高藏豬種公豬精液在4℃保存后的質量。以期為藏豬精液4℃保存提供更多的精液保護劑選擇方案。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與材料

1.1.1 試驗動物與試驗地點 試驗藏豬為3～5歲健康種公豬6頭。試驗時間為2017年5月，試驗地點為西藏拉薩市達孜縣某藏豬養殖專業合作社、西藏自治區農牧科學院畜牧獸醫研究所和西藏農牧學院動物科學學院。

1.1.2 主要設備與試劑 動物電刺激采精儀（MDW-1，成都華智開物科技有限公司），倒置熒光顯微鏡（IX73，奧林巴斯），電熱恒溫水槽（DKB-450A，上海森信），變頻冰箱（BCD-649WDVC，海爾），-80℃冰箱（MDF-U33V，合肥榮事達三洋電器股份有限公司）。

食品級羧甲基纖維素鈉（上海申光使用化學品有限公司）、考馬斯亮藍（國藥集團化學試劑有限公司）、Diff-Quik Stain染液（北京普博斯）、亞衛精液稀釋粉（丹麥）、速眠新Ⅱ（吉林省敦化市圣達動物藥品有限公司）。

新鮮藏豬精液由西藏拉薩市達孜縣某藏豬養殖專業合作社提供。

1.2 試驗方法與內容

1.2.1 改進的低溫稀釋液配制 參照孫時軍等[7]的試驗結果，使用亞衛牌精液稀釋劑作為基礎稀釋劑，在稀釋后的精液中加入1%乙二醇作為低溫保護劑。

1.2.2 精液采集及處理 采用速眠新Ⅱ（0.1 mL/kg）肌內注射麻醉健康藏豬種公豬，用動物電刺激采精儀于3 V、50 mA條件下電刺激法采集健康藏豬精液。

將每頭藏豬種公豬精液（精子活力0.8以上）均做4倍稀釋，用6層以上紗布包裹后放入培養箱中，17℃平衡2 h后，放入冰箱4℃保存。

1.2.3 精子質量評價 精子活力和精子畸形率兩項精液常規性狀參照世界衛生組織標準（WHO）[8]的方法測定，具體方法如下。1）精子活力：精液過濾后立即在顯微鏡下觀察精子活力，采用百分制法，直線前進精子數占總精子數的百分比為精子活力。2）精子畸形率：采用龍膽紫酒精溶液染色法，將精子涂片染色，在400倍顯微鏡下觀察，計算不同視野500個精子中畸形精子占比例即為畸形率。3）精子頂體完整率參照文獻[9]考馬斯亮藍R250染色法進行評價。

1.3 試驗設計

試驗用6頭藏豬種公豬隔2 d采精1次，共采精7次。每次每頭藏豬種公豬精液分5組，每組3個重復。在改進的豬精液低溫稀釋液為基礎液中，按0 μmol/L、6 μmol/L、12 μmol/L、18 μmol/L和24 μmol/L添加CMC，將每頭藏豬種公豬精液均做4倍稀釋后于4℃保存到第5天時以藏豬精子活力、精子畸形率、精子頂體完整率和質膜完整率為評價指標，探討CMC對4℃保存藏豬精液品質的影響。每頭藏豬種公豬精液均做3個重復。

1.4 數據處理

所得試驗數據用Excel進行前期處理，再用SPSS 11.5軟件進行One-Way ANOVA方差分析，并進行多重比較，試驗結果用平均數±標準差表示，檢驗誤差為5%和1%。

2 結果與分析

由表1可以看出，每頭藏豬種公豬精液4℃保存到第5天時，12 μmol/L CMC添加組的精子活力極顯著優于其他組（P＜0.01）；精子畸形率12 μmol/L CMC添加組極顯著小于其他組（P＜0.01）；精子頂體完整率12 μmol/L CMC添加組極顯著高于其他組（P＜0.01）。

表1 CMC對4℃保存藏豬精液品質的影響（n=42）

3 討論

隨著現代化藏豬養殖生產技術的提高，為有效控制疫病傳播、降低飼養公豬的費用、提高豬群品質、解決藏豬精液的妥善保存問題，人工授精技術服務于藏豬產業發展已迫在眉睫。在藏豬精液稀釋液中添加有效保護劑于4℃低溫保存時間比常溫更長，同時可應用普通冰箱保存，經濟方便。CMC是一種良好的乳化穩定劑和增稠劑在食品中廣泛應用，且能有效延緩貯藏時間[6]。本研究參考張家慶等[6]研究結果，試將CMC添加到高海拔地區特有的藏豬種公豬精液稀釋液中，探討對藏豬精液4℃保存至第5天時精子質量的影響發現，精液稀釋液中添加CMC 12 μmol/L時，精子活力、精子頂體完整率最高，精子畸形率最低，添加量略低于張家慶等[6]研究結果，可能與高海拔環境氧分壓低、精子體外運動能力略差有關。

CMC的乳化穩定和增稠作用減緩了精子沉降速度、延長了沉淀時間，提高了藏豬精液4℃環境保存質量。其具體保護機理有待進一步研究。

4 結論

在改進的豬精液稀釋液中添加CMC 12 μmol/L可明顯改善4℃環境保存藏豬精液品質，本試驗研究為今后藏豬精液低溫保存的生產增加一種精液保護劑選擇方案。

[1]任子利，趙彥玲，王建洲，等.維生素C對藏豬精液4℃保存及其精子全基因組DNA甲基化的影響 [J].畜牧獸醫學報，2016，47（5）：1057-1061.

[2]陳曉英，馬金英，宋天增，等.紅景天多糖對藏豬精液4℃保存效果的研究[J].養豬，2016（6）：33-36.

[3]陳曉英，馬金英，宋天增，等.維生素E對4℃保存藏豬精液品質和抗氧化保護作用的影響[J].養豬，2016（6）：37-40.

[4]陳曉英，馬金英，宋天增，等.不同稀釋液對藏豬精液4℃保存效果的影響[J].畜牧與飼料科學，2016，37（10）：22-24.

[5]羧甲基纖維素鈉 [EB/OL].http://baike.baidu.com/link?url= T3GvzaGxwCFOKcmVEZXPOtB4TGmi3TGN-d0pOTtvlTKiwCSfJdlIRZdNeOir2c6-_dyBR_1RuzknP-IxhXOhdOYEs－DEFDqmmzuRhUWI61OPwqVtsaimCii_Hdkk0hM4QJccL5BrNcPI-76QPdS6yT4RzqeY9kaa5Gi8PxAmW0Vm.

[6]張家慶，陳東峰，王獻偉，等.羧甲基纖維素鈉對豬精液常溫保存效果的影響[J].家畜生態學報，2017，38（2）：33-38.

[7]孫時軍，朱華鴻，陳曉峰，等.低溫保護劑對4℃保存豬精液活率的影響[J].上海畜牧獸醫通訊，2012（4）：28-29.

[8]WHO.Laboratory test handbook about the interaction between semen and cervical mucus[M].PressⅢ.Beijing:Scientific Editor,1994:9-13.

[9]胡傳活，許春榮，陸媚，等.黃芪多糖對豬精液低溫保存的影響[J].中國獸醫學報，2015，35（1）：150-154.

（編輯：郭玉翠）

為何減肥食品大多不奏效

【美國斯里爾利斯特網站1月12日報道】題：大部分減肥食品不奏效的驚人原因

大部分減肥食品之所以注定不奏效至少有一個明顯原因，那就是它們不會給人帶來樂趣。

但這個解釋并未描繪出減肥究竟有多難的完整情形。例如，為什么有人有毅力堅持嚴格的飲食而減掉一半體重，而其他人堅持同樣的飲食計劃反而增重了？

和生活中的大多數事情一樣，這個問題的答案是復雜的。這就是為什么減肥專家開始把肥胖看作一組疾病，而非單一的問題，就像醫生看待癌癥一樣。

馬薩諸塞綜合醫院肥胖、新陳代謝和營養研究所主任李·卡普蘭博士對英國《泰晤士報》記者說，他估計可能有多達59種不同類型的肥胖。59種！因此，對一種類型的肥胖有效的療法可能對另一種類型的肥胖就無效，而且即便找到一種對多種類型的肥胖都有效的可能性也相當低。

與癌癥進行類比是思考肥胖問題的一個有用方式。你不會切除肺癌患者的乳房，除非你是個不具備基本解剖知識卻不知何故獲準從醫學院畢業的外科醫生。

此外，還有30多個基因可能與肥胖有關，但研究人員仍難搞清到底哪些遺傳和環境因素與肥胖最有關聯。我們仍知之甚少的是，這些基因究竟如何相互作用并與環境發生關聯從而致人肥胖。而如果無法搞清原因，治療肥胖就會變得更加困難。

了解家族史有一定幫助，但它當然不會決定你的命運。波士頓醫療中心營養和體重管理部門負責人卡羅琳·阿波維安博士說：“父母或家庭成員肥胖的人并不注定會超重，但知道你的基因可能對高糖和高飽和脂肪食物尤其敏感將有助于了解個性化需求。那些帶有容易使自己增重的基因的人會在充斥著廉價和不健康食品的環境中增重。”

雖然減肥的一般原則—健康飲食、經常鍛煉、睡眠充足—都是對的，但吃多少和“健康飲食”具體意味著什么，是因人而異的。遺憾的是，治療通常是一個試錯過程，直到人們發現究竟是什么對他們減肥有效。

例如，卡普蘭博士對《紐約時報》記者說，他對肥胖患者試用40種療法，包括不同的飲食、有氧運動、加強睡眠和幾十種藥物。

此外，即使有些人一開始體重減輕了，但能保持下去才是關鍵。大部分體重減輕的人會反彈，這令對肥胖采取綜合療法變得更加困難。

找到可持續的減肥方案并不容易，但在合適的方案、成套技巧和心態的幫助下，這是有可能做到的，只是可能需要比預期更長的時間才能找到對你奏效的方法。

（轉自參考消息[N]，2017-01-18）

Effect of Cysteamine on Tibetan Boar Semen Preserved at 4℃ and Antioxidative

Ni Ma1,Jinmei Duoji2,LAI Ke3,CHEN Xiaoying1,TAN Zhankun4,REN Zili4
(1.Institute of Animal Science,Tibet Academy of Agricultural and Animal Husbandry Sciences,Lhasa 850009, China;2.Animal Husbandry Bureau,Tibet Dagzê County,Dagzê 850100,China;3.Animal Disease Control and Prevention Center,Tibet Shigatse City,Shigatse 857000,China;4.Faculty of Animal Science,Tibet Agricultural and Animal Husbandry College,Nyingchi 860000,China)

This study was conducted to investigate the effects of Carmellose Sodium on Tibetan boar semen preserved at 4℃ and antioxidative.The semen was collected from Tibetan boar by electrical stimulation.Add Carmellose Sodium 0 μmol/L,6 μmol/L,12 μmol/L,18 μmol/L,24 μmol/L,in the improvement of pig semen low temperature dilution liquid.Save to fifth days at 4℃ after dilution of fresh semen.Body integrity and membrane integrity rate of the top Tibetan pig sperm activity,sperm abnormal rate and semen quality evaluation index,to investigate the effect of Carmellose Sodium on the quality of semen quality at 4℃.The results show that,the sperm motility,sperm deformity rate,sperm motility rate and plasma membrane integrity rate of the Carmellose Sodium 12 μmol/L addition group were significantly better than other test groups（P＜0.05）.In short, adding Carmellose Sodium 12 μmol/L to the improved pig semen diluent can significantly improve the semen quality and antioxidant protection at 4℃.The experimental study laid a foundation for the production and application of cryopreservation of boar semen in the future.

Carmellose Sodium;Tibetan pig;environmental science at 4℃;semen quality

S828

A

1002-1957(2017)04-0022-03

2017-06-17

西藏自治區自然科學基金（2016ZR-15-37）

尼 瑪（1972-），女，西藏拉薩人，助理研究員，碩士，主要從事高原畜禽安全生產工作.E-mail：nimacw@126.com

任子利（1969-），男，河南衛輝人，副教授，博士，主要從事動物繁殖教學與研究工作.E-mail：zlren0925@163.com