胃腸間質(zhì)瘤基因突變與臨床病理特征、免疫組化表達分析

葛運貞

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2017.16.035

[摘要] 目的 分析胃腸間質(zhì)瘤基因突變與臨床病理特征、免疫組化表達情況。方法 利用免疫組化方式，分析方便選取該院于2011年12月—2016年12月收治的200例GISTs者以及100例非GISTs者基因表達和突變情況。 結(jié)果 CD117，DOG1，IGF1R的陽性表達率為：96.0%，93.0%以及6.0%。100例非GISTs腫瘤樣本CD117以及DOG1的陽性表達率為17.0%和10.0%（P<0.05）。130例存在c-KIT基因突變。GISTs者外顯子表達，CD117和DOG1表達情況和c-KIT以及PDGFRA基因突變無相關(guān)性，IGF1R于野生型GISTs中陽性率比突變型GISTs高（P<0.01）。不同種類的腫瘤位置之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 聯(lián)合檢測CD117以及DOG1能夠提升GISTs的準(zhǔn)確程度。IGF1R可能為野生型GISTs特異性的免疫組化指標(biāo)以及潛在性治療靶點。IGF1R可能為野生型GISTs特異性的免疫組化指標(biāo)以及潛在性治療靶點。對預(yù)測GISTs者使用酪氨酸激酶抑制藥物的治療效果和預(yù)后有著相當(dāng)重要的指導(dǎo)價值。

[關(guān)鍵詞] 胃腸間質(zhì)瘤；基因突變；病理特征；免疫組化；表達情況

[中圖分類號] R735 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）06（a）-0035-03

Analysis of Gene Mutation of Gastrointestinal Stromal Tumors and Clinical Pathological Features and Immunohistochemical Expression

GE Yun-zhen

Department of Pathology， Linyi Economic and Technological Development Zone People's Hospital， Linyi， Shandong Province， 276023 China

[Abstract] Objective To analyze the gene mutation of gastrointestinal stromal tumors and clinical pathological features and immunohistochemical expression. Methods The gene expression and mutation situation 200 cases of GISTs patients and 100 cases of non- GISTs patients from December 2011 to Dcember 2016 were analyzed by the immunohistochemical method. Results The positive expression rates of CD117，DOG1，IGF1R was respectively 96.0%，93.0%， 6.0%， and the positive expression rate of CD117 and DOG1 in 100 non- GISTs patients was 17.0% and 10.0%（P<0.05）， and 130 cases were with gene mutation， and the CD117 and DOG1expressiona and c-KIT and PDGFRA gene mutation had no correlation， and the positive rate of IGF1R in mild type GISTs was higher than that of mutation type GISTs（P<0.01）， and the difference between different tumors was obvious（P<0.05）. Conclusion The combined test of CD117 and DOG1 can improve the accuracy of GISTs， IGF1R may be the immunohistochemical index of mild type GISTs specificity and potential treatment target， which is of important guidance value of preventing the treatment effect of oxyphenylaminopropionic acid suppressing drug and prognosis.

[Key words] Gastrointestinal stromal tumor； Gene mutation； Pathological features； Immunohistochemical； Expression

胃腸道間質(zhì)瘤為一種特殊型、獨立細(xì)胞，屬其起源并非神經(jīng)元或間質(zhì)，其可能為一種特殊種類及細(xì)胞[1]。在此同時具備干細(xì)胞特征，就臨床功能來看，主要為胃腸道平滑肌起搏細(xì)胞，與整個消化道蠕動存在相關(guān)性[2]。為了全面認(rèn)識胃腸間質(zhì)瘤，并在日常工作中全面掌握其診斷方式，結(jié)合實際情況，該文方便選擇2011年12月—2016年12月該院收治的200例胃腸間質(zhì)瘤患者為研究對象，全面分析其基因突變與臨床病理特征、免疫組化表達情況，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇該院收治的200例胃腸間質(zhì)瘤患者為研究對象。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化染色 使用Abcam公司生產(chǎn)的CD117，DOG1，IGF1R抗體，進行免疫組化染色。

1.2.2 核酸提取 對GISTs者蠟塊進行處理。每個蠟塊取8 μm組織，選擇5條，完成脫蠟之后，使用DNA試劑盒，結(jié)合說明書步驟，完成沉淀、吸附以及洗脫等具體步驟，提取出DNA樣本，實施純度檢測。在260 nm/280 nm位置測量吸光值，具體為1.8以上。

1.2.3 基因突變檢查 該實驗使用美國西格諾公司生產(chǎn)的DNA質(zhì)譜陣列基因分析設(shè)備，對患者基因突變情況進行檢測。這種方式以基質(zhì)借助輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜技術(shù)得以實現(xiàn)。

1.3 統(tǒng)計方法

該實驗使用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析和處理數(shù)據(jù)，對計量資料使用t檢驗，計數(shù)資料使用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 GISTs者的CD117，DOG1，IGF1R表達詳情

CD117和DOG1的染色主要為細(xì)胞質(zhì)，少數(shù)定位在細(xì)胞膜。IGF1R主要在細(xì)胞膜。以上3種均為彌漫性分布。兩組的CD117，DOG1，IGF1R表達詳情見表1。

表1 兩組患者的CD117，DOG1，IGF1R陽性表達詳情

2.2 CD117，DOG1，IGF1R和胃腸間質(zhì)瘤的病理特征關(guān)系

CD117的表達和腫瘤位置以及組織學(xué)種類相關(guān)；DOG1表達和腫瘤規(guī)格以及危險程度相關(guān)。

在腸道來源的GISTs患者中，CD117陽性率顯著比其他位置高。且在上皮型以及梭形病理類型中呈現(xiàn)為高表達趨勢。IGF1R和組織學(xué)類型，危險程度，核分裂象等均無關(guān)。

2.3 腫瘤生長方式以及規(guī)格

腔內(nèi)型 28例，突向消化道腔內(nèi)，肌壁間 102例，同時向黏膜以及漿膜面隆起，表面光滑/潰瘍，漿膜下和其他位置70 例，腫瘤表現(xiàn)為結(jié)節(jié)樣增長，直徑規(guī)格為0.2～31.3 cm.

2.4 基因變異分析情況

2.4.1 c-KIT基因突變情況 200例患者中，130例在存在c-KIT基因突變。僅有1例患者的CD117免疫組化呈現(xiàn)為陰性。 外顯子11突變108例，外顯子9突變64例， 外顯子13突變10例，外顯子17突變17例。

2.4.2 PDGFRA基因突變 PDGFRA基因突變?nèi)藬?shù)為44例。外顯子18 D842V突變者10例，外顯子12 V561D突變者34例。

2.5 c-KIT以及PDGFRA基因突變病理關(guān)系情況

PDGFRA以及c-KIT基因突變和年齡，性別，腫瘤情況，組織學(xué)類型，核分裂像以及危險程度之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。不同種類的腫瘤位置之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。胃部和小腸在病變者大都為c-KIT突變，結(jié)腸和其他部位以PDGFRA基因突變?yōu)橹鳌?/p>

2.6 c-KIT以及PDGFRA基因突變和CD117，DOG1，IGF1R關(guān)聯(lián)性

CD117和DOG1表達情況和c-KIT以及PDGFRA基因突變不存在相關(guān)性，IGF1R于野生型GISTs中陽性率比突變型GISTs高（P<0.01）。見表2。

表2 c-KIT以及PDGFRA基因突變和CD117，DOG1，IGF1R關(guān)聯(lián)性

注：*P<0.05。

3 討論

CD117為c-KIT基因的蛋白表達物之一[2-4]。大約有83%～95%的GISTs中呈現(xiàn)為表達趨勢。其為診斷GISTs的特異性指標(biāo)之一。值得說明的是，大約有5%的GISTs患者CD117表達為陰性，另外，CD117在多種腫瘤細(xì)胞中可呈現(xiàn)出表達趨勢，進而提升了診斷難度。該組的CD117陽性表達率為96.0%，和國內(nèi)報道相似[5]，國內(nèi)報道的CD117為97.52%。

既往報道證實[6]，和CD117相比，DOG1陽性表達量稍高，該組案例則顯示，DOG1在GISTs表達陽性率為93.0%，比CD117低。在100例非GISTs腫瘤樣本中，CD117以及DOG1的陽性表達率分別為17.0%（34/200）和10.0%（20/200）。兩組數(shù)據(jù)的CD117和DOG1陽性表達情況差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。以上結(jié)果證實，CD117和DOG1能夠提升疾病診斷率，兩者聯(lián)合檢測，可取得相對顯著效果。

深度研究證實[7]，CD117的表達和腫瘤位置以及組織學(xué)種類相關(guān)；DOG1表達和腫瘤規(guī)格以及危險程度相關(guān)[8]。在梭形以及上皮型呈現(xiàn)出高表達趨勢。由此可見，兩者聯(lián)合檢查對于差異化病理特征判斷有著一定現(xiàn)實意義。上述基因表達和c-KIT以及PDGFRA基因突變情況不存在相關(guān)性，證實其不能作為預(yù)測疾病基因突變的指標(biāo)。在GISTs患者中，c-KIT以及PDGFRA基因突變能夠指導(dǎo)TKIs小分子靶向治療[11]。

該研究中還證實，不同種類的腫瘤位置之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。胃部和小腸在病變者大都為c-KIT突變，結(jié)腸和其他部位以PDGFRA基因突變?yōu)橹鳌Ｒ阎腡KIs對于差異化基因突變位點的GISTs存在差異性。

綜上所述，聯(lián)合檢測CD117以及DOG1能夠提升GISTs的準(zhǔn)確程度，這一點在CD117內(nèi)表達中被尤為體現(xiàn)。上述兩者和患者的臨床病理特點存在相關(guān)性。腫瘤表現(xiàn)為結(jié)節(jié)樣增長，IGF1R可能為野生型GISTs特異性的免疫組化指標(biāo)以及潛在性治療靶點。結(jié)合腫瘤發(fā)生位置和基因突變檢測全面結(jié)合，對于預(yù)測GISTs病患使用酪氨酸激酶抑制藥物的治療效果和預(yù)后有著相當(dāng)重要的指導(dǎo)價值。

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（收稿日期：2017-03-09）