HBsAg和抗—HCV酶聯(lián)免疫檢測(cè)與血液病毒核酸篩查技術(shù)的關(guān)系

郭曉明

【摘要】 目的 分析乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和丙型肝炎病毒抗體（抗-HCV）酶聯(lián)免疫檢測(cè)與血液病毒核酸篩查技術(shù)的關(guān)系。方法 選擇13085個(gè)血樣標(biāo)本， 經(jīng)HBsAg與抗-HCV酶聯(lián)免疫檢測(cè)， 對(duì)確認(rèn)陽性及陰性的血樣標(biāo)本進(jìn)行血液病毒核酸方面的篩查， 分析HBsAg與抗-HCV酶聯(lián)免疫檢測(cè)與血液病毒核酸篩查技術(shù)之間的關(guān)系。結(jié)果 經(jīng)HBsAg酶聯(lián)檢測(cè)顯示， 13085個(gè)血樣標(biāo)本中陽性219個(gè)，

約占1.67%， 分別經(jīng)過國產(chǎn)或進(jìn)口試劑檢測(cè)分析， 其一致率為99.55%；經(jīng)抗-HCV酶聯(lián)免疫檢測(cè)顯示， 13085個(gè)血液樣本中陽性者108個(gè)， 約占0.83%， 分別經(jīng)過國產(chǎn)或進(jìn)口試劑檢測(cè)分析， 其一致率為95.37%；再次確認(rèn)HBsAg結(jié)果顯示219個(gè)中陽性者198個(gè)， 陰性者21個(gè)， 分別經(jīng)過國產(chǎn)或進(jìn)口試劑檢測(cè)分析， 其一致率為90.41%；經(jīng)抗-HCV再次檢測(cè)確認(rèn)108個(gè)中陽性者57個(gè)、陰性者44個(gè)、可疑結(jié)果7個(gè)， 分別經(jīng)過國產(chǎn)或進(jìn)口檢測(cè)試劑分析， 其一致率為59.26%。將血液標(biāo)本經(jīng)核酸篩查技術(shù)測(cè)定乙型肝炎病毒核酸（HBV DNA）顯示結(jié)果陽性者195個(gè)， 陰性17個(gè)， 而丙型肝炎病毒核酸（HCV RNA）測(cè)定結(jié)果顯示陽性者72個(gè)， 陰性者36個(gè)；合并計(jì)算這兩種因素， 經(jīng)酶聯(lián)免疫法測(cè)定及再次確認(rèn)測(cè)定靈敏度為97.26%， 其特異性計(jì)算為94.44%。結(jié)論 經(jīng)過HBsAg及抗-HCV酶聯(lián)免疫檢測(cè)， 其檢測(cè)結(jié)果顯示靈敏度及特異度均良好， 但因試劑盒有所不同而出現(xiàn)誤檢的情況， 但血液核酸篩查技術(shù)能夠有效避免誤檢情況出現(xiàn)， 促進(jìn)檢出率提高。

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎表面抗原；丙型肝炎病毒抗體；酶聯(lián)免疫檢測(cè)；血液病毒核酸篩查技術(shù)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.23.033

病毒性肝炎傳播的主要途徑之一是血液傳播， 因此臨床上開展輸血治療時(shí)應(yīng)重點(diǎn)保證血液質(zhì)量， 避免因血液質(zhì)量不過關(guān)導(dǎo)致血液傳播性疾病擴(kuò)散。我國對(duì)血液初步篩查、檢測(cè)僅僅二十年左右， 主要通過酶聯(lián)免疫檢測(cè)法對(duì)HBsAg及抗-HCV進(jìn)行測(cè)定。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示， 其病毒性肝炎感染情況呈現(xiàn)一定程度的下降趨勢(shì)。但需要注意的是， 因檢測(cè)試劑盒存在質(zhì)量不同的情況， 導(dǎo)致肝炎病毒檢出率存在一定的差距， 由此造成誤檢漏檢情況依然不可避免的存在， 進(jìn)而造成疾病感染等嚴(yán)重情況[1]。近幾年來， 病毒核酸檢測(cè)技術(shù)逐漸應(yīng)用于臨床， 因這種技術(shù)能夠在不考慮病毒測(cè)定空窗期的前提下檢測(cè)出肝炎病毒本身， 有效提高病毒肝炎檢出率， 因此逐漸被臨床醫(yī)務(wù)人員接受。本次研究選擇2013年4月～

2016年9月本站檢驗(yàn)科收到的血樣標(biāo)本13085個(gè)， 先后經(jīng)過HBsAg及抗-HCV酶聯(lián)免疫二次檢測(cè)， 再通過血液病毒核酸技術(shù)對(duì)肝炎病毒進(jìn)行篩查及確認(rèn)結(jié)果， 取得一定成果， 旨在為臨床檢測(cè)提供一定可靠性的研究數(shù)據(jù)， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 本次研究選擇2013年4月～2016年9月本站檢驗(yàn)科收到的血樣標(biāo)本13085個(gè)， 其中男8548例， 女4537例，

年齡3～66歲， 平均年齡（30.05±12.87）歲；涉及消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)等不同臟器疾病。

1. 2 檢測(cè)儀器 ①檢測(cè)試劑盒分為國產(chǎn)與進(jìn)口兩種， 國產(chǎn)試劑盒由上海科華生物科技有限公司生產(chǎn)， 進(jìn)口試劑盒由美國Ortho公司生產(chǎn)；②檢測(cè)主要儀器為FAME全自動(dòng)酶免分析儀、離心機(jī)、冷藏柜以及生物安全柜、核酸提取儀器等。

1. 3 檢測(cè)方法

1. 3. 1 HBsAg以及抗-HCV酶聯(lián)免疫檢測(cè) 同一個(gè)血液樣本經(jīng)分離后得到血清， 分別經(jīng)過國產(chǎn)及進(jìn)口試劑盒進(jìn)行酶聯(lián)免疫檢測(cè)， 檢測(cè)試驗(yàn)均嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行， 并經(jīng)過兩次檢測(cè)。將至少一次檢測(cè)為陽性的血液標(biāo)本進(jìn)行二次確認(rèn)檢測(cè)[2-4]。

1. 3. 2 血液病毒核酸篩查檢測(cè) 根據(jù)核酸檢測(cè)（NAT）對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行篩查， 并通過國產(chǎn)與進(jìn)口檢測(cè)試劑盒對(duì)血液樣本進(jìn)行感染病毒核酸的檢測(cè)。

1. 4 觀察指標(biāo) 比較國產(chǎn)及進(jìn)口試劑對(duì)不同指標(biāo)兩次檢測(cè)的一致性、兩次經(jīng)肝炎病毒核酸血液篩查以及其靈敏度及特異度。

2 結(jié)果

經(jīng)HBsAg酶聯(lián)免疫檢測(cè)顯示， 13085個(gè)血樣標(biāo)本中陽性219個(gè)， 約占1.67%， 分別經(jīng)過國產(chǎn)或進(jìn)口檢測(cè)試劑分析， 其一致率為99.55%；經(jīng)抗-HCV酶聯(lián)免疫檢測(cè)顯示， 13085個(gè)血液樣本中陽性者108個(gè)， 約占0.83%， 分別經(jīng)過國產(chǎn)或進(jìn)口檢測(cè)試劑分析， 其一致率為95.37%；再次確認(rèn)HBsAg結(jié)果顯示， 219個(gè)陽性者198個(gè)， 陰性者21個(gè)， 分別經(jīng)過國產(chǎn)或進(jìn)口檢測(cè)試劑分析， 其一致率為90.41%；經(jīng)抗-HCV酶聯(lián)免疫再次檢測(cè)， 確認(rèn)108個(gè)陽性者57個(gè)、陰性者44個(gè)、可疑結(jié)果7個(gè)， 分別經(jīng)過國產(chǎn)或進(jìn)口檢測(cè)試劑分析， 其一致率為59.26%；將血液標(biāo)本經(jīng)核酸篩查技術(shù)測(cè)定HBV DNA顯示結(jié)果陽性者195個(gè)， 陰性17個(gè)， 而HCV RNA測(cè)定結(jié)果顯示陽性者72個(gè)， 陰性者36個(gè)；合并計(jì)算這兩種因素， 經(jīng)酶聯(lián)免疫法測(cè)定及再次確認(rèn)測(cè)定靈敏度為97.26%， 其特異性計(jì)算結(jié)果為94.44%。

3 討論

病毒性肝炎是臨床常見的血液傳播性疾病， 傳播多見于治療過程中輸血以及注射用醫(yī)療器械等， 因此嚴(yán)格按照相關(guān)無菌操作等醫(yī)療程序執(zhí)行具有極其重要的臨床意義[5]。在獻(xiàn)血、輸血過程中均需重點(diǎn)注意血清學(xué)以及肝炎病毒的篩查工作[6]。經(jīng)過臨床大量數(shù)據(jù)調(diào)查顯示， 對(duì)獻(xiàn)血志愿者進(jìn)行血清學(xué)以及病毒核酸的檢測(cè)能夠有效降低相關(guān)肝炎的血液感染率， 提高病毒檢出率[7]。而且近幾年來， 國家已經(jīng)在血液傳播病毒疾病檢測(cè)中添加核酸病毒檢測(cè)項(xiàng)目。隨著以核酸檢測(cè)為代表的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)越來越成熟， 相關(guān)疾病檢出率越來越高， 從一定程度上節(jié)約了醫(yī)療成本[8， 9]。但需要注意的是， 此種檢測(cè)技術(shù)對(duì)相關(guān)檢測(cè)人員的要求及檢測(cè)時(shí)間要求也較高， 對(duì)大樣本檢測(cè)并不適用， 因此血清學(xué)檢測(cè)仍然是實(shí)驗(yàn)室診斷血液病毒感染疾病的主要依據(jù)[10]。本次研究中選擇2013年4月～2016年9月本站檢驗(yàn)科收到的血樣標(biāo)本13085個(gè)， 經(jīng)HBsAg與抗-HCV酶聯(lián)免疫測(cè)試， 對(duì)確認(rèn)陽性及陰性的血樣標(biāo)本進(jìn)行血液病毒核酸方面的篩查， 其一致性及檢出率均良好， 支持上述觀點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)

[1] 趙俊鵬.血液病毒核酸檢測(cè)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)比較研究.河北聯(lián)合大學(xué)， 2014.

[2] 孫波.輸血前血液篩查中新型HBV基因突變及抗原分析的研究.山東大學(xué)， 2013.

[3] 王卓妍.實(shí)施核酸檢測(cè)后獻(xiàn)血者HBV篩查策略的探討.中國人民解放軍軍師軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院， 2015.

[4] 周麗君， 周俊鵬， 譚湘濤， 等.病毒核酸檢測(cè)對(duì)降低輸血傳播疾病殘余風(fēng)險(xiǎn)的分析研究.新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)， 2014， 37（2）： 214-217.

[5] 鐘萬芬， 唐小勇. HBsAg和抗-HCV酶聯(lián)免疫檢測(cè)與血液病毒核酸篩查技術(shù)之間的相關(guān)性分析.肝臟， 2015， 20（11）：876-878.

[6] 趙俊鵬， 田喜鳳， 賈幼珍， 等. 血液病毒核酸檢測(cè)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)比較研究. 中國病原生物學(xué)雜志， 2011（10）：732-735.

[7] 于志軍， 鄧雪蓮， 高慧卉， 等. 血清學(xué)檢測(cè)與核酸檢測(cè)在獻(xiàn)血者血液篩查中的相關(guān)性研究. 實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)， 2014， 21（5）： 532-534.

[8] 謝敬文， 藍(lán)文莉， 黎淑貞， 等. 番禺地區(qū)無償獻(xiàn)血者酶免陰性樣本的核酸檢測(cè)結(jié)果分析. 臨床輸血與檢驗(yàn)， 2014， 16（4）： 355-357.

[9] 杜勇， 楊亮， 蔣煒， 等. 核酸擴(kuò)增與酶聯(lián)免疫法聯(lián)合在血液篩查中的初步應(yīng)用. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志， 2012（3）：533-535.

[10] 何勇. 無償獻(xiàn)血者 HBsAg、抗-HCV、抗-HIV 和梅毒抗體檢測(cè)情況分析. 浙江醫(yī)學(xué)， 2013（2）：139-140.

[收稿日期：2017-02-07]endprint