ZnT-8A對成人隱匿性免疫性糖尿病診斷價值的初步研究

趙鴻斌 李彥青 孫曉慧

·論著·

ZnT-8A對成人隱匿性免疫性糖尿病診斷價值的初步研究

趙鴻斌 李彥青 孫曉慧

目的探討鋅轉(zhuǎn)運蛋白8抗體(ZnT-8A)在成人隱匿性免疫性糖尿病(LADA)診斷及風險評估中的應用價值。方法回顧性分析2011年1月至2016年10月住院的220例糖尿病患者的臨床資料，1型糖尿病(T1DM)患者100例，LADA患者20例；2型糖尿病(T2DM)患者120例。應用化學發(fā)光免疫法對谷氨酸脫羧酶抗體(GADA)、蛋白酪氨酸酶抗體(IA-2A)、胰島細胞抗體(ICA)、胰島素抗體(IAA)及鋅轉(zhuǎn)運蛋白8抗體(ZnT-8A)五種抗體進行檢測，計算陽性率并對結(jié)果進行分析。結(jié)果LADA組ZnT-8A、GADA、ICA、IAA、IA-2A抗體檢測陽性率分別為60.0%(12/20)，40.0%(8/20)，20.0%(4/20)，15.0%(3/20)，25.0%(5/20)均高于T2DM組及T1DM組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，T1DM組和T2DM組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；LADA組ZnT-8A、GADA、ICA、IAA、IA-2A五種抗體的檢測結(jié)果顯示，ZnT-8A陽性率明顯高于其他抗體組，由高到低依次為ZnT-8A>GADA>CA>IA-2A>IAA，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但五種抗體聯(lián)合檢測陽性率明顯高于單獨ZnT-8A組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論ZnT-8A對LADA的診斷具有重要的指導意義，并且ZnT-8A聯(lián)合胰島自身抗體(GADA、IA-2A、ICA、IAA)檢測能夠進一步提高LADA患者的檢出率。

成人隱匿性免疫性糖尿病；鋅轉(zhuǎn)運蛋白8抗體；谷氨酸脫羧酶抗體；胰島細胞抗體；胰島素抗體；蛋白酪氨酸酶抗體

糖尿病是一組以高血糖為典型特征的代謝性疾病，多由胰島素分泌缺陷或生理活性受損所致。隨著生活方式的改變，世界范圍內(nèi)的糖尿病發(fā)病率不斷上升并呈流行態(tài)勢，糖尿病已成為當前臨床上的主要內(nèi)分泌代謝疾病[1]，1型糖尿病(T1DM)特指因胰島β細胞破壞而導致胰島素分泌絕對缺乏，并具有酮癥傾向的糖尿病，患者需要終身依賴胰島素維持生命。根據(jù)病因可將患者分為自身免疫性和特發(fā)性T1DM，自身免疫性T1DM的胰島自身抗體多為陽性，較為常見。成人隱匿性自身免疫性糖尿病(LADA),在病因?qū)W上亦屬于自身免疫性T1DM范疇。LADA屬于免疫介導型T1DM的亞型，其患病率約占初診2型糖尿病(T2DM)患者的10%～15%(患病率是T1DM的2倍)[2]，其中胰島β細胞功能衰退速度是T2DM患者的3倍。但由于患者起病年齡及臨床表現(xiàn)貌似T2DM，易被誤診。我國T1DM患者的血糖控制非常不理想，病死率遠高于T2DM患者，因此成人隱匿性免疫性糖尿病的早期診斷、病情評估，可以為患者提供更合理的臨床救治方案，具有重要的參考價值[3]。 鋅轉(zhuǎn)運蛋白8抗體(ZnT-8A)是一種胰島β細胞分泌的顆粒膜蛋白，通過影響鋅離子濃度而在胰島素合成和分泌中發(fā)揮重要作用，2007年被確定為T1DM的新的自身抗體[4]。本研究為進一步探討成人隱匿性免疫性糖尿病(LADA)與T2DM的臨床特點及差異性，選取我院收治的T1DM患者100例，LADA患者20例， T2DM患者120例，通過對鋅轉(zhuǎn)運蛋白8抗體(ZnT-8A)及谷氨酸脫羧酶抗體(GADA)、胰島細胞抗體(ICA)、胰島素抗體(IAA)、蛋白酪氨酸酶抗體(IA-2A)等抗體的檢測[5]，為臨床更加清晰的認識到ZnT-8A對LADA的診斷價值，并對LADA的早期診斷提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年1月至2016年10月我院收住院患者220例，分為T1DM組、LADA組及T2DM組3組； T1DM患者100例、LADA患者20例及T2DM患者120例，均符合T1DM、T2DM及LADA的診斷標準，其中T1DM組男55例，女45例;年齡4～24歲，平均年齡(13.35±4.27)歲；LADA組男11例，女9例;年齡34～59歲，平均年齡(43.34±5.23)歲；T2DM組男64例，女56例;年齡35～62歲，平均年齡(47.05±4.93)歲。

1.2 方法 (1)詢問受試患者病史，專人測量患者身高、體重，計算體重指數(shù)(BMI)。(2)采集3組患者空腹新鮮血標本5 ml，于室溫下放置30 min，以3 000 r/min的速度離心10 min后留取血清，-20℃凍存?zhèn)溆茫粦没瘜W發(fā)光免疫法對收集到的所有血清標本進行GADA、ICA、IAA、IA-2A、ZnT-8A抗體檢測[6]，采用深圳新產(chǎn)業(yè)生物有限公司生產(chǎn)的試劑盒，嚴格按照試劑說明書進行操作，儀器選用半自動LUMINO發(fā)光儀，血清GADA>30 U/ml即為陽性，血清ICA>100 U/ml即為陽性，血清IAA>30 U/ml即為陽性，血清1A-2A>30 U/ml即為陽性，血清ZnT-8A>50 U/ml即為陽性；(3)計算3組患者GADA、ICA、IAA、IA-2A及ZnT-8A檢測的陽性率，并進行統(tǒng)計。

2 結(jié)果

2.1 3組患者一般資料比較 LADA組與T2DM組比較，2組年齡、性別比及BMI差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；T1DM組與LADA組及T2DM組比較，年齡、性別比及BMI均有明顯不同，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組患者一般資料比較

注：與T1DM組比較，*P<0.05

2.2 ZnT-8A、GADA、ICA、IAA、IA-2A抗體檢測情況 LADA組ZnT-8A、GADA、ICA、IAA、IA-2A抗體檢測陽性率均高于T2DM組及T1DM組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；T2DM組ZnT-8A、GADA、ICA、IAA、IA-2A抗體檢測陽性率結(jié)果與T1DM組抗體檢測陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 ZnT-8A、GADA、ICA、IAA、IA-2A抗體檢測情況 例(%)

注：與T1DM比較，*P<0.05；與LADA組比較，#P<0.05

2.3 五種抗體在T1DM組、LADA組和T2DM組中陽性率比較 ZnT-8A檢測陽性率明顯高于其他抗體，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，檢測陽性率由高到低依次為ZnT-8A>GADA>IAA>IA-2A>ICA；LADA組ZnT-8A檢測陽性率為60.0%(12/20)明顯高于T1DM組的13.0%(13/100)和T2DM組的9.1%(11/120)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；T1DM組ZnT-8A檢測陽性率與T2DM組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見圖1。

圖1 五種抗體在T1DM組、LADA組和T2DM組中陽性率比較

2.4 五種抗體聯(lián)合檢測結(jié)果 LADA組陽性率[95.0%(19/20)]明顯高于T1DM組[25.0%(25/100)]和T2DM組[18.3%(22/120)]，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；T1DM組與T2DM組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表3,圖2。

表3 ZnT-8A、GADA、ICA、IAA、IA-2A五種抗體聯(lián)合檢測結(jié)果 例(%)

注：與T1DM組比較，*P<0.05；與LADA組比較，#P<0.05

圖2 五種抗體聯(lián)合檢測在T1DM組、LADA組和T2DM組中陽性率比較

3 討論

目前，中國糖尿病患者已近1億，高危人群大約有1.5億，且發(fā)病率日前呈現(xiàn)明顯的上升和年輕化趨勢，其中T1DM患者亦不斷增加，且生存狀況不容樂觀。T1DM特指因胰島細胞破壞而導致胰島素絕對缺乏。具有酮癥傾向的糖尿病，患者需要終身依賴胰島素維持生命。根據(jù)病因可將患者分為自身免疫性和特發(fā)性T1DM，前者的胰島自身抗體多為陽性，較為常見。LADA在病因上亦屬于自身免疫性T1DM[7]。但由于患者起病年齡及臨床表現(xiàn)貌似T2DM，易被誤診。

糖尿病在臨床癥狀出現(xiàn)前數(shù)月或數(shù)年即可出現(xiàn)自身抗體陽性。糖尿病自身抗體是糖尿病發(fā)病過程中胰島自身免疫損傷而產(chǎn)生的，主要包括GADA、IA-2A、ICA、IAA及ZnT-8A，在T1DM及T2DM患者中均可檢測出一定陽性率的胰島自身抗體[8]。LADA患者臨床表現(xiàn)與T2DM患者極為相似[9]，但LADA是胰島自身反應性T細胞介導導致胰島β細胞遭受損害的自身免疫性疾病，其本質(zhì)是自身免疫性T1DM。患者體內(nèi)存在胰島素自身免疫抗體，可通過檢測自身抗體ZnT-8A、GADA、IA-2A、ICA及IAA與T2DM相鑒別[10,11]。目前，LADA的診斷依據(jù)主要是：起病年齡≥30歲、至少1種胰島素自身抗體陽性、診斷后至少6個月不需要胰島素的治療。

糖尿病自身抗體是糖尿病發(fā)病過程中胰島自身免疫損傷而產(chǎn)生的抗體。GADA是胰島β細胞遭受免疫破壞的一個特異性標志，也是最早出現(xiàn)的一種抗體，持續(xù)時間較長，其陽性提示內(nèi)源性胰島素的缺乏或喪失，是胰島素功能減退速度的主要預測因子；IA-2A與胰島結(jié)合分泌相關(guān)，是胰島免疫早期成分，能反應胰島β細胞損壞而導致的早期發(fā)病[12]；ICA是針對胰島β細胞胞漿成分的抗體，是唯一一個針對破壞胰島β細胞成分的特異性抗體，也是最早用來預測T1DM的免疫球蛋白，其陽性提示胰島β細胞功能衰竭，ICA的陽性率與病程長短有關(guān)，隨著病程的延長陽性率降低；IAA是一種能夠與胰島細胞內(nèi)多種抗原結(jié)合的混合抗體，是胰島細胞自身免疫的重要指標，在甲狀腺和健康人群中均有一定的陽性率，因而不是糖尿病的特異性抗體，單純IAA陽性，僅表明有進展為糖尿病自身免疫的傾向。

ZnT-8A是一種胰島β細胞分泌顆粒膜蛋白，ZnT8蛋白屬于鋅轉(zhuǎn)運體家族成員僅在胰島β細胞高表達，通過影響鋅離子濃度而在胰島素合成和分泌中發(fā)揮重要作用，對胰島功能具有明顯影響。因此，ZnT-8A的出現(xiàn)成為了異常體液免疫應答攻擊胰島β細胞的標志。2007年ZnT-8A被確定為T1DM新的自身抗體，但臨床上對于ZnT-8A在T1DM診斷中的意義尚不是十分清楚，有文獻報道，認為不同的糖尿病自身抗體在LADA及T2DM中的陽性檢測率差異較大[13-15]。

本結(jié)果顯示LADA組ZnT-8A、GADA、ICA、IAA、IA-2A抗體檢測陽性率均明顯高于T2DM組及T1DM組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；LADA組五種抗體檢測結(jié)果顯示，ZnT-8A檢測陽性率明顯高于其他組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，檢測陽性率由高到低依次為ZnT-8A>GADA> CA>IA-2A>IAA；LADA組ZnT-8A檢測陽性率明顯高于T1DM組和T2DM組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；以上結(jié)果提示，ZnT-8A對LADA患者的檢出率明顯高于其他胰島自身抗體，并且對于LADA的診斷亦具有十分重要的價值。ZnT-8A聯(lián)合胰島自身抗體檢測結(jié)果顯示，LADA組檢測陽性率明顯高于其他2組患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，充分證實ZnT-8A聯(lián)合胰島自身抗體檢測能夠提高LADA的檢出率。

綜上所述，ZnT-8A的檢測能夠更好的輔助診斷LADA，為臨床上早期診斷、病情評估及治療LADA提供了可靠依據(jù)，并且ZnT-8A聯(lián)合胰島自身抗體檢測能夠提高LADA的檢出率，對LADA的診斷具有重要指導意義。

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