一例蛋鴨黃病毒病診治

劉波劉娜孔令靜張棟宦者威陳月鋒谷桂平楊俊青

（1，山東匯眾獸醫技術服務有限公司 250022；2，山東省動物疫病預防與控制中心 250022）

一例蛋鴨黃病毒病診治

劉波1劉娜1孔令靜1張棟2宦者威1陳月鋒1谷桂平1楊俊青1

（1，山東匯眾獸醫技術服務有限公司 250022；2，山東省動物疫病預防與控制中心 250022）

為摸清臨邑某蛋鴨場出現產蛋下降和死亡的原因，對病死鴨進行剖檢，采取病變臟器組織，應用RT-PCR方法對4種病原進行實驗室檢測。檢測結果顯示：所采樣品中，A型流感病毒、新城疫病毒、鴨瘟病毒均為陰性，黃病毒為陽性。結合臨床癥狀、剖檢病變及檢測結果表明，引起此次鴨場發病的主要病原是黃病毒。

蛋鴨；產蛋下降；黃病毒；PT-PCR

自2010年春季以來，浙江、山東、江蘇、安徽等省份鴨飼養場爆發了一種以蛋鴨、種鴨產蛋急劇下降、采食減少或廢絕為特征的傳染病，產蛋率從90%降到10%以下[1]。我國研究人員對其病原進行分離、形態學觀察、理化特性測定、RT-PCR檢測及序列分析明確該病原為黃病毒科的一個新成員[2]。該病原屬于黃病毒科黃病毒屬蚊媒病毒的恩塔亞病毒群，與坦布蘇病毒親緣關系最近，暫定為該病毒的一個分離株，故該病又稱為鴨坦布蘇病毒病。本病流行范圍廣，發病急且發病率高，但死亡率較低，臨床應用多種藥物均不能有效控制，給養鴨業造成重大經濟損失。下面就某蛋鴨場為例進行綜合診斷及探討，為獸醫工作者診斷此病提供一定的依據。

1 發病情況及臨床癥狀

2016年12月，臨邑某蛋鴨場養殖蛋鴨39000只，日齡130d，該鴨群出現不同程度的發病，產蛋量下降約3成。病鴨精神沉郁，采食量及飲水量均減少，零星死亡。部分患鴨不愿走路，反應遲鈍，排綠色水樣稀糞。個別嚴重的病鴨出現神經癥狀，站立不穩，癱瘓。

2 剖檢變化

對病死鴨剖檢發現，病變主要為卵泡變性、出血、壞死（圖1)，肺出血，肝臟腫大，表面有大量出血點 （圖2)，脾臟腫大、出血、壞死 （圖3)，小腸環狀腫脹 （圖4)，輸卵管無明顯眼觀病變，其他臟器無明顯的眼觀病變。

圖1 卵泡出血、變性、壞死圖

圖2 肺臟出血、卵泡出血、變性

3 實驗室檢測

3.1 材料與方法

3.1.1 試劑及儀器

A型流感病毒通用型熒光RT-PCR檢測試劑盒和新城疫病毒熒光RT-PCR檢測試劑盒購自凱杰生物工程有限公司；鴨瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒購自生科尚儀有限公司；禽黃病毒核酸檢測試劑盒購自武漢科前生物股份有限公司；Thermo高速冷凍離心機、生物安全柜、全自動核酸提取儀、熒光PCR儀、PCR儀、電泳儀、凝膠成像系統、移液器。

3.1.2 檢測方法及步驟

無菌采集病死鴨的卵泡、脾臟、肺臟和氣管等器官[3]。將臟器剪碎后，研磨并勻漿，反復凍融4次，置于4℃，8000r/min離心5min，取上清液0.3ml于離心管中，將離心管架插入全自動核酸提取儀中，提取核酸，做模板備用。病毒核酸的擴增按試劑盒說明進行操作。將A型流感病毒、新城疫病毒檢測管置于熒光PCR儀中，進行反轉錄和擴增；將鴨瘟病毒檢測管置于熒光PCR儀中，進行擴增；將黃病毒檢測管按說明書進行反轉錄和擴增，電泳，最后進行凝膠成像系統觀察。

圖3 脾臟腫大 (A:腫大B:正常)

圖4 小腸腫脹 （箭頭所指處）

3.2 結果與分析

3.2.1 A型流感病毒、新城疫病毒RT-PCR和鴨瘟病毒PCR檢測結果分析

A型流感病毒、新城疫病毒、鴨瘟病毒陽性對照Ct值分別為9.54、14.81、18.55，均呈S型特異性曲線，陰性對照Ct值均為0，樣品Ct值均為0，如圖5、圖6所示，A型禽流感病毒、新城疫病毒、鴨瘟病毒檢測結果均呈陰性，表明樣品未感染上述3種病毒。

圖5 A型流感病毒和新城疫病毒熒光RT-PCR

圖6 鴨瘟病毒熒光PCR

圖7 黃病毒RT-PCR結果

3.2.2 黃病毒RT-PCR檢測結果分析

如圖7所示，樣品擴增后在488bp處出現一條與陽性對照大小一致的電泳條帶，這表明該樣品感染了黃病毒。

3.2.3 結果

結合臨床癥狀、剖檢變化以及實驗室病毒RT-PCR檢測結果，可以明確該蛋鴨場的發病原因是由鴨黃病毒所引起的。

4 討論

（1)造成蛋鴨產蛋異常除了飼養管理和環境因素等誘因外，疾病感染是一個十分重要的影響因素[4]。有關引起種鴨和蛋鴨出現產蛋異常的病原報道日漸增多[5]，但該蛋鴨群A型流感病毒、新城疫病毒和鴨瘟病毒檢測均呈陰性，而黃病毒檢測結果為陽性。

（2)本病目前尚無有效治療方法和免疫預防制劑，對于發病鴨群可使用清熱解毒、增強機體免疫力的的中草藥 （板藍根、穿心蓮、黃芪多糖等)，同時添加抗菌藥物控制繼發感染。徐可樹等報道，氧氟沙星配合干擾素對黃病毒增殖具有抑制作用[6]。

（3)在鴨群管理方面，改善鴨舍的飼養環境、降低飼養密度，保證鴨舍溫度、濕度和合理通風，為其健康創造有利條件。加強生物安全措施，定期消毒，尤其是各種生產用具和運輸車輛以及種蛋的消毒。做好鴨場的衛生管理，墊料的消毒及處理、病死鴨的無害化處理等工作[7]。

[1]李玉峰,馬秀麗,于可響,等.一種從鴨新分離的黃病毒研究初報[J].畜牧獸醫學報,2011,42(6):885-891.

[2]唐維國,施少華,傅光華,等.一例蛋鴨黃病毒病的診療[J].中國家禽,2012,34(2)：52-53.

[3]曹貞貞,張存,黃瑜,等.鴨出血性卵巢炎的初步研究[J].中國獸醫雜志,2010,46(12):3-6.

[4]萬春和,施少華,程龍飛,等.一種引起種(蛋)鴨產蛋驟降新病毒的分離與初步鑒定[J].福建農業學報,2010,25(6):663-666.

[5]黃瑜,李文楊,程龍飛,等.種（蛋）鴨產蛋異常研究[J].福建畜牧獸醫,2001,23(3):8.

[6]徐可樹,鄒麗.氧氟沙星疊氮胸苷單獨及與干擾素合用對黃病毒增殖的影響[J].中華實驗和臨床病毒學雜志,2000,14(9):300.

[7]李玉峰.鴨黃病毒感染研究進展[J].中國家禽,2011,33(17):30-32.