生脈飲研究現狀及其制劑開發中的問題分析

林美斯,，陳哲杰，羅 林，游 宇*，傅超美，章津銘,2，林彥君，謝恬

·綜述進展·

生脈飲研究現狀及其制劑開發中的問題分析

林美斯1,，陳哲杰1，羅 林1，游 宇1*，傅超美1，章津銘1,2，林彥君1，謝恬3

生脈飲源于《醫學啟源》，為中醫益心復脈之經方，乃中醫危重急癥的常用藥。本文收集整理了近20年來有關生脈制劑的文獻報道，對其物質基礎、藥理作用進行系統梳理，分析生脈制劑中不同劑型處方組成、配比差異及提取工藝對其功效的影響，以探究生脈飲及其成藥制劑各關鍵環節的核心問題所在，為深化生脈飲基礎研究，加快其“現代化”進程提供參考。

生脈飲；研究現狀；中藥現代化；核心問題

生脈飲又名生脈散，出自《醫學啟源》，具有益氣復脈、養陰生津之功。金代醫家張元素云：“麥冬氣寒，味微苦甘，治肺中伏火，脈氣欲絕，加五味子、人參二味，為生脈散，補肺中元氣不足，須用之[1]”。全方三味藥，一補一滋一斂，配伍精妙，清代醫家吳昆《醫方考》謂之“一補、一清、一斂，養氣之道備也，名曰生脈[2]”；生脈飲臨床常用于氣陰兩虧，心悸氣短，脈微自汗。《醫方集解》云“人有將死脈絕者服此能復生之其功甚大[3]”。生脈飲臨床應用歷史悠久,為古今醫家所青睞，目前已被開發為生脈系列制劑，可謂中醫藥“古為今用”之典范。

目前已開發的生脈制劑主要有生脈飲、生脈膠囊、生脈顆粒、生脈注射液、生脈片五種劑型，其中生脈飲于1985年首次收載于《中國藥典》一部。據《生脈制劑醫院購藥監測暨年度市場分析報告》，在全國15個?。陛犑蟹秶鷥?，對30個城市的226家大型醫院生脈制劑的用藥情況進行了調研與監測。結果表明，生脈制劑的使用呈逐年上升趨勢；在《生脈中藥制劑流通市場研究報告》中，對全國31個?。ㄖ陛犑?、自治區）265個地級市，監測18000家藥品零售機構，統計得生脈制劑銷售額占全國醫藥零售市場銷售總額的30%左右[4]?？梢娚}制劑需求量之大，有著廣闊的市場前景。本文對近年來生脈飲的藥效物質基礎、藥理作用、制劑開發、質量控制等研究成果進行梳理(生脈飲現代研究主要框架圖見圖1)，探討生脈制劑中不同劑型處方組成、配比差異及提取工藝對其功效是否產生影響，以期促進生脈飲及其制劑的基礎研究與現代開發工作的深入開展。

1 生脈飲物質基礎研究

生脈飲現代研究已初步探明其主要物質基礎，其主要有效成分為皂苷類、多糖類、黃酮類、木脂素類、氨基酸、微量元素等物質。

其中人參中含有多種化學成分，如皂苷類，糖類，揮發性成分，多肽類，黃酮類，木質素，有機酸以及其酯等，其中人參皂苷、人參多糖屬于主要化學成分。人參皂苷可分為三類，一類為PPD（原人參二醇）類，主要有人參皂苷Ra1、Ra2、Ra3、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rg3、Rh2等；二類為PPT（原人參三醇）類，主要有人參皂苷Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1、Rh3、Rf1等；三類為OA（齊墩果酸）類，主要有Ro等[5～7]。

麥冬中主要化學成分為多糖、甾體皂苷、高異黃酮類、氨基酸、β-谷甾醇、豆甾醇、環二肽類化合物、酰胺類化合物、多羥基脂肪酸和酚酸類化合物等，其中麥冬多糖、甾體皂苷是麥冬的主要有效成分[8，9]。

五味子中含有木脂素、三萜、倍半萜、揮發油、多糖、黃酮、有機酸及氨基酸等，其中主要化學成分為木脂素類化合物，約占8%[10～12]。

2 生脈飲藥理作用研究

隨著科學技術的發展，目前對生脈飲的藥理作用已經有了較為深入的研究。相關研究表明生脈飲對心血管系統、不同病源引起的休克、免疫功能、生長發育和學習記憶能力均有不同程度的影響。

2.1 保護心肌

生脈飲具有抗氧化的能力，通過抑制細胞凋亡，保護心肌從而發揮對心肌細胞的超微結構的調節，達到對心肌細胞的保護作用，具有很好的益心作用。中醫藥對病癥的治療是通過信號分子水平組分結合的平衡信號系統[13]。基于對整體，組織、細胞核分子水平活性成分的藥理機制研究，現代研究已初步表明，生脈飲益心（保護心?。C制為（1）對羥自由基的清除作用和打開線粒體的KATP（線粒體ATP鉀通道）通道對缺血后心肌功能障礙的保護作用[14]；（2）通過多條途徑抑制糖尿病心肌病大鼠的心肌纖維化，顯著延緩糖尿病心肌病的發生進程，其進程可能與其能改善脂質代謝有關[15,16]；（3）血清藥理學研究發現生脈飲對高糖環境下損傷的H9c2心肌細胞具有抗凋亡的作用，此作用可能與阻斷線粒體凋亡通路有關[17]。

2.2 抗休克

生脈飲具有抗休克作用，研究表明其具有顯著的增強糖皮質激素功能，并能改善血清CRP（C反應蛋白）、PCT（降鈣素原）及TNF-α（腫瘤壞死因子）水平[18]。研究提示其作用機制或為（1）升高血漿糖皮質激素含量，提高糖皮質激素受體結合容量和受體特異結合位點，并增加糖皮質激素受體解離常數[19]；（2）提高靜脈血氧飽和度SCvO2、降低乳酸濃度和增加氧攝取率[20]。

生脈飲中上調糖皮質激素受體的主要有效藥物可能是人參，有學者[21]選用人參莖葉皂苷對失血性休克大鼠糖皮質激素受體(GR)進行研究，發現人參莖葉皂苷可減輕失血性休克大鼠GR結合活性的下降幅度，作用機制可能與其促進GR mRNA表達有關。

2.3 提高免疫力

生脈飲對細胞免疫和體液免疫有一定的改善作用，其能明顯提高血清中IgG的含量，增加內皮系統吞噬功能，升高外周白細胞，提高CD4+的表達水平與CD4+/CD8+（輔助性T細胞/細胞毒性T細胞）比值，提高干擾素-γ（IFN-γ）的表達，抑制Th1免疫應答向Th2免疫應答的漂移[22,23]。

此外，現代研究也證實了生脈飲具有改善微循環、改善血液流變性、促進生長發育和學習記憶等作用。如高治平發現生脈飲及人參、五味子均能對NaNO2（亞硝酸鈉）和乙醇所致記憶障礙的保護作用，可能與其促進合成代謝有關[24]。

3 生脈制劑的開發研究及質量控制現狀

目前常用的生脈制劑有生脈飲[25]、生脈膠囊[25]、生脈顆粒[26]、生脈注射液[27]、生脈片[28]，對其處方和制備工藝進行對比分析，發現不同生脈制劑存在處方組成、配比差異及提取工藝不同等問題。

3.1 處方組成及配比差異

在五種劑型中，生脈飲、生脈顆粒、生脈注射液處方基本相同，生脈膠囊、生脈片在君藥的使用上有所改變，且五種劑型的用藥配比差異較大（處方組成及配比見表1）。

人參、紅參、黨參在其功效主治各有側重，藥效成分亦有差異。人參經過炮制成為紅參后，其藥理藥效各方面都有顯著提高，紅參在增強動物活動、抗利尿作用、增強心臟收縮幅度、增強耐缺氧能力等方面均優于人參；人參和黨參在補氣、急救固脫、補血、扶正祛邪方面有相同功效，但在某些藥理方面人參和黨參確有極大的不同，如人參適用于消渴癥，黨參卻是糖尿病的禁忌藥物；人參亦有抗利尿、抗衰老、預防和治療動脈硬化等作用，黨參對以上作用都未見報道。加之，麥冬作為方中臣藥滋陰潤燥，與君藥相協，氣陰相補，其用量不同對方劑配伍后產生的藥效亦會有影響。君藥的改變是否影響其療效；不同劑型的藥物組成及配伍比例有差異，是否影響其功能與主治，需要進行一系列的基礎研究。

3.2 提取工藝差異

表2 劑型更改過程各制劑提取工藝的差異

生脈注射液 部分回流＋部分蒸餾＋醇沉 乙醇＋水回流4～5次，煎煮3次，醇沉2次生脈片 蒸餾 水 未注明 2次紅參乙醇回流2h/次；五味子煎煮40min/次

五種生脈制劑中提取溶媒各異（見表2），故各制劑的有效成分應有不同，而其功能主治都為益氣復脈，養陰生津，由此可認為提取工藝對制劑功能主治不存在影響。但有相關文獻報道，秦濟眾[29]對生脈散分別采用乙醇回流＋水提醇沉法和中藥傳統的水煎煮法提取有效成分，對實驗動物心肌損害模型分別觀察生脈液對心肌超微結構的變化，實驗表明生脈液能顯著保護缺氧缺血心肌細胞，并且以水煎煮，生脈灌注液對心肌缺氧的防治更為明顯。因此生脈系列制劑作為治療心血管類疾病的制劑其工藝仍待考究，而生脈片比生脈飲、生脈膠囊、生脈顆粒、生脈注射液所含有效成分應該更全面，但在功效表述中卻未體現出來。

中藥成藥制劑的功能主治表述均基于傳統配伍應用、煎煮方法、給藥方式等中藥復方制備、使用特點，而現在中藥制劑研究充分吸收了現代科學技術，大量使用新提取方法與新提取溶媒，從而產生了大量現代中成藥。中藥復方制劑提取工藝的差異對中藥物質基礎影響巨大，我們應深入研究提取工藝、臨床藥效和功能主治的關系，將傳統中醫藥理論與現代科學技術有機結合，尋找科學中藥復方提取方法以規范現代中藥制劑生產工藝[30]。

3.3 現有質控手段難以控制其安全與有效性

中成藥處方所含單味藥材易受品種、產地、加工方法等因素影響，使得成方制劑質量控制成為中成藥研究的重點與難點[31，32]。生脈制劑檢驗項目通常以浸膏得率、人參皂苷Rg1、五味子醇甲等單個或幾個成分的含量為評價指標（現有生脈制劑主要質量控制方法見表3），具有較大局限性。中藥復方具有多成分、多靶點、多層次、多渠道的整體作用特點，片面的“唯成分論”難以科學、全面地對其進行質量評價與控制，難以保障臨床用藥的安全性與有效性。

表3 生脈制劑主要質量控制方法

生脈注射液薄層鑒別[27]、RP-HPLC法同時測7個人參皂苷類成分[39]、RP-HPLC法同時測人參皂苷Rb1與五味子醇甲[40]、HPLC法同時測人參皂苷Rg1、Re、Rb1和五味子醇甲[41]、HPLC法測五味子醇甲[42]、LC-MS/MS法同時測人參皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd和五味子醇甲[43]生脈片 化學鑒別[28]、薄層鑒別[28]、HPLC法測五味子醇甲[44]

中藥成分復雜，成分間相互影響，整體藥效不是單一成分藥效的簡單加合，目前中藥質量控制存在“指標成分選不準、含量范圍定不準、量效關聯不強”等問題。中藥質量控制的關鍵是質控指標的選擇，因此對藥效物質基礎研究的全面性和準確性具有很高的要求。中藥質量控制初期，中藥質量控制體系是孤立地建立單一指標成分的定性、定量標準，但中藥藥效發揮是由多個成分共同作用的結果，任何單一成分都無法全面表征中藥的質量，多指標成分檢測分析已成為中藥質量控制熱點。中藥指紋圖譜作為一種有效檢測多指標成分的技術手段，其科學的理論依據獲得國際一致認同。HPLC 法是目前中藥質量控制的主要手段，如在生脈制劑的質量控制中王占良[45]等采用HPLC-DAD /MS聯用技術對生脈飲中17個人參皂苷類成分進行分析；馮雪松[46]等采用HPLC法同時測定了人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd、五味子醇甲、五味子乙素6種活性成分的含量。生物指紋圖譜通過從受體角度和中藥生物效應入手，將中藥藥效成分的確定和作用機制相關聯，排除中藥中大量無效成分的干擾，鎖定大部分有效成分，據此發現且確定可被人體吸收并發揮藥效作用的“指標成分”，建立中藥生物效應鑒定法來實現對中藥質量的控制的方法有望成為中藥質量標準化控制的重要途徑。近年來，在生脈飲藥效物質基礎研究基礎上，研究者以代謝組學可以從整體出發研究中藥制劑對對應病證的作用的思路，采用HPLC-DAD/MS等分析技術對其進行多指標定量、代謝等評價研究，學者基于代謝組學理論，以GC-MS和UPLC-MS為技術平臺，建立了生脈飲注射液對大鼠心臟代謝指紋圖譜。代謝指紋圖譜是對所有代謝物進行高通量的代謝分析, 不僅可以研究藥物本身的代謝變化，而且可以研究機體本身及藥物引起的機體內源性代謝物的變化，更直接地反映了體內時空狀態的變化，闡明藥物及疾病多種作用靶點或受體的共同作用。因此，代謝組學應用于中藥多組分“組效關系”研究具有明顯的優勢，采用代謝指紋圖譜法進行質量控制才能最終闡明藥物在體內的作用過程。

4 展望

4.1 生脈飲全方藥理作用機理有待完善

生脈飲作為中藥復方制劑，藥味多、藥效物質基礎復雜是其主要制劑特征，目前對其處方所含單味藥的藥理作用研究較為深入，而對其復方合煎研究尚少。生脈飲藥材合煎時會發生復雜的理化反應，從而藥效物質基礎影響，進而影響藥物作用機理，已有研究表明生脈飲復方合煎液中人參皂苷Rg3、Rh1、Rh2的含量高出單味人參煎劑含量的4.83%、52.40%、113.64%[47]。王廣基院士曾比較過五味子單體、五味子水提物和生脈飲通過口服給藥的藥代動力學差異，研究證明生脈飲合煎會增加五味子的溶解，延緩其消除，提高生物利用度[48]。故對生脈飲的藥理作用研究不應只從單味藥著手，應著眼全方，通過研究復方合煎后其藥效物質基礎與藥效作用機制才能更好的體現中醫“辨證施治”、“整體觀念”的診療特點。

4.2 中藥質量控制的新模式可應用在生脈制劑質量控制中

目前基于指標成分測定和指紋圖譜研究的質量控制模式，難以直接反映中藥的譜效關系和量效關系。肖小河教授[49]提出中藥標準“大質量觀”的研究思想和模式，認為中藥質控模式不能局限于“成分論”，感官評價、生物評價、化學評價均是中藥質量控制與評價必不可少的模式和手段；中藥質量一體化，用量也是影響中藥藥效的重要標準，量從質變，以質定量。劉昌孝院士[50]提出中藥質量標志物的概念，將生物活性值或效價、生物活性標志物、生物效應表達譜作為直接或間接反映中藥產品臨床功效或藥理作用的生物活性指標，是將與中藥內在質量關聯的多種指標綜合并量化加權形成的質量評價指標。因此以藥材基源為基礎、物質基礎研究為支撐，找取生物標志物的質控方法，可成為未來中藥質量控制的新模式。生脈系列制劑作為經典古方現代開發應用的代表之一，將中藥標準“大質量觀”“中藥質量標志物”等全新質量控制理念引入其研究與開發中，將有益于傳統經典古方的科學開發與利用。

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(責任編輯：何瑤)

Research on the present situation of Shengmaiyin and the development of Shengmai preparations

/LIN Mei-si1, CHENZhe-jie1, LUO Lin1, YOU Yu1, FU Chao-mei1, ZHANG Jin-ming1,2, LIN Yan-jun1, XIE Tian3//(1. School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of EducationNational Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan;2. Institute of Chinese Medical Sciences, State Key Laboratory of Quality Research in Chinese Medicine, University of Macau,Macao 999078, China;3. Hangzhou Normal University Biomedicine and Health Research Center, Hangzhou 310012, China)

Shengmai Decoction, fi rstly recorded in "Medicine Origin", is a classical traditional Chinese medicine prescription having the effect of bene fi ting heart and restoring pulse, which is frequently used in clinical practice for critical illness. In this review, the literatures about Shengmai preparations in the last 20 years were collected and sorted out . The material basis and pharmacological effects of Shengmai preparations were systematically analyzed. And analysis were also conducted to explore the different prescription compositions, ratio of dosage forms and extraction processes on the effect of Shengmai preparations.Therefore, the core problems in the critical preparation processes of Shengmaiyin and its medicinal preparations were found out,and the paper provides references for further study of Shenmaiyin and the acceleration of its "modernization" process.

Shengmaiyin; research status; modernization of traditional Chinese medicine; core issues

R 283.6

A

1674-926X(2017)02-019-05

國家自然科學基金項目（81373987）；國家自然科學基金項目（81403123）

1.成都中醫藥大學藥學院 中藥材標準化教育部重點實驗室 中藥資源系統研究與開發利用省部共建國家重點實驗室培育基地 成都 611137；2.澳門大學 中華醫藥研究院 澳門大學中藥質量研究國家重點實驗室 澳門 999078；3.杭州師范大學生物醫藥與健康研究中心 杭州 310012

林美斯（1991-），女，在讀碩士，研究方向為中藥新制劑和新劑型Tel:17761231934 Email:1067584380@qq.com

游宇（1986-），女，講師，在讀博士，研究方向為中藥新制劑和新劑型Tel:13980590846 Email:415416295@qq.com

2017-02-14