Fas相關死亡結構域蛋白在乳腺癌中表達的臨床病理研究

吳嘉

[摘要]目的 探討Fas相關死亡結構域蛋白在乳腺癌中表達的臨床病理特點。方法 選擇2013年2月～2017年2月我院收治的行乳腺腫瘤手術治療患者的人體石蠟包埋組織標本148例，其中乳腺良性病變26例（A組），無淋巴結轉移乳腺癌58例（B組），淋巴結轉移乳腺癌64例（C組）。所有標本均實施免疫組化檢查，分析Fas相關死亡結構域蛋白表達。結果 Fas相關死亡結構域蛋白表達于乳腺癌癌細胞胞漿內和乳腺良性病變上皮細胞內。B組中Fas相關死亡結構域蛋白表達較弱，染色范圍較小，染色深度均較低；A組、C組中Fas相關死亡結構域蛋白表達較弱，染色深度強。A、B、C三組Fas相關死亡結構域蛋白陽性表達率分別為88.5%（23/26）、46.6%（27/58）、65.6%（42/64），A組高于B組、C組，差異有統計學意義（P<0.05）。在乳腺癌患者中，淋巴結轉移、確診年齡與Fas相關死亡結構域蛋白表達有關（P<0.05），但臨床分期、組織學類型與Fas相關死亡結構域蛋白表達無關（P>0.05）。結論 Fas相關死亡結構域蛋白與乳腺癌淋巴結轉移、確診年齡有著密切的關系，但與臨床分期、組織學類型無關，需引起高度關注。

[關鍵詞]Fas相關死亡結構域蛋白；乳腺癌；淋巴結轉移；臨床病理

[中圖分類號] R365 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）10（a）-0004-03

[Abstract]Objective To explore the clinicopathological features of Fas-related death domain proteins expression in breast cancer.Methods From February 2013 to February 2017，148 cases of paraffin-embedded tissue specimens from patients undergone tumor surgeries were selected.There were benign breast lesions in 26 cases （group A），breast cancer without lymph node metastasis in 58 cases （group B），and breast cancer with lymph node metastasis in 64 cases （group C）.All specimens were performed with immunohistochemical examinations in order to analyze the proteins expression of Fas-related death domain.Results It was detected that Fas-related death domain proteins were expressed in the intracytoplasm of breast cancer cells and epithelial cells of benign breast lesions.In group B，the expression of Fas-related death domain proteins was weak and dyeing range and depth were small compared with those in groups of A and C，which were in slight expression and deep dyeing.The positivity expression rates of Fas-related death domain proteins in groups of A，B，and C were 88.5% （23/26），46.6% （27/58），and 65.6% （42/64） respectively.The positivity expression rate in group A was higher than that in groups of B and C with statistical differences （P<0.05）.For breast cancer patients，lymph node metastasis and age with a definite diagnosis were associated with Fas-related death domain protein expression （P<0.05）.However，the clinical stage and histological type were not related to the expression of Fas-related death domain protein （P>0.05）.Conclusion The expression of Fas-related death domain proteins is closely related to the lymph node metastasis and age with a definite diagnosis of breast cancer，but it has nothing to do with the clinical stage and histological type，to which should be paid high attention.

[Key words]Fas-related death domain protein；Breast cancer；Lymph node metastasis；Clinical pathologyendprint

乳腺癌患病率較高，會給患者身心健康和生命安全帶來嚴重影響[1]。當前，臨床上多采用手術方法進行治療，但部分患者最終預后不良[2]。而且，對于大部分初診時無遠處轉移的乳腺癌患者來說，影響其預后的關鍵是淋巴結轉移[3]，而導致乳腺癌患者出現淋巴結轉移的因素較多，包括細胞黏附異常、上皮間質轉化、基質金屬蛋白酶異常表達等。近年來，有研究發現，在多種惡性腫瘤發生與發展過程中，Fas相關死亡結構域蛋白發揮著重要的作用，且與乳腺癌轉移和預后密切相關[4]。基于此，本研究深入探討了Fas相關死亡結構域蛋白在乳腺癌中表達的臨床病理特點，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2013年2月～2017年2月我院收治的行手術治療的乳腺腫瘤患者的人體石蠟包埋組織標本148例，包括乳腺良性病變26例（A組），無淋巴結轉移乳腺癌58例（B組），有淋巴結轉移乳腺癌64例（C組）。A組患者年齡30～72歲，平均（48.6±10.2）歲；其中乳腺增生性病變14例，纖維腺瘤12例。B組患者年齡32～78歲，平均（49.8±10.5）歲；浸潤性導管癌48例，浸潤性小葉癌10例。C組患者年齡38～74歲，平均（52.0±9.8）歲；浸潤性導管癌52例，浸潤性小葉癌12例。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑 Fas相關死亡結構域蛋白抗體購自Abcam公司；Polymer Kit-0015 DAB顯色試劑盒購自福建邁新生物技術公司；格蘭仕微波爐。

1.2.2免疫組化檢查 常規石蠟切片，以3%過氧化氫進行20 min孵育，PBS沖洗，做微波抗原修復，隨后PBS洗3次；滴加封閉血清，做20 min孵育處理，隨后滴加Fas相關死亡結構域蛋白抗體，工作濃度為1∶100，4℃條件下，孵育過夜，PBS洗3次；DAB溶液顯色，以清水沖洗，蘇木精復染脫水封片，置于光鏡下觀察。陰性對照組采用PBS液替代Fas相關死亡結構域蛋白抗體。由兩名經驗豐富的病理科醫師共同閱片。計算總體免疫染色得分，計算方法為陽性細胞陽性百分比計分和陽性細胞染色深度計分的乘積，陰性為0分，陽性為1～4分。其中，陽性細胞陽性百分比評分標準：陽性率為0～<5%記0分；5%～25%記1分；>25%～50%記2分，>50%～75%記3分，>75%記4分。陽性細胞染色深度評分標準：無染色或邊緣變色記0分；陽性細胞呈淺黃色記1分；黃色記2分，棕褐色記3分。總體免疫染色得分≤4分為低表達，6、8、9、12分均為高表達[5]。

1.3統計學方法

采用SPSS 22.0統計學軟件進行數據分析，計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1 Fas相關死亡結構域蛋白表達

乳腺癌癌細胞胞漿內和乳腺良性病變上皮細胞內均存在Fas相關死亡結構域蛋白表達。B組中Fas相關死亡結構域蛋白表達較弱，染色范圍較小，染色深度較淺；A組、C組中Fas相關死亡結構域蛋白表達較弱，染色深度強，A組、B組、C組Fas相關死亡結構域蛋白陽性表達率分別為88.5%（23/26）、46.6%（27/58）、65.6%（42/64）。A組高于B組、C組，差異有統計學意義（χ2=13.09、4.81，P=0.000、0.028）。

2.2乳腺癌中Fas相關死亡結構域蛋白與病理指標的關系

在122例乳腺癌患者中，淋巴結轉移、確診年齡與Fas相關死亡結構域蛋白表達有關（P<0.05），但臨床分期、組織學類型與Fas相關死亡結構域蛋白表達無關（P>0.05）（表1）。

3討論

乳腺癌是常見的女性惡性腫瘤。當前，隨著醫學技術的快速發展，越來越多的乳腺癌被及時發現，而且，早期診斷和早期治療降低了病死率[6]。但是，乳腺癌轉移仍是導致患者死亡的一個重要因素[7-9]。所以，臨床上采取積極措施，探索與乳腺癌轉移相關的生物標志物，從而采取積極措施控制病情進展，改善患者預后，就顯得至關重要。

Fas相關死亡結構域蛋白最早是在1995年由Chinnaiyan等篩選出來的，是能與Fas分子胞內段死亡域相互作用的新蛋白[10-12]。Fas相關死亡結構域蛋白包括C端的死亡結構域和N端的死亡效應域[13-15]。有研究發現，在Fas、DR3等凋亡信號途徑中，Fas相關死亡結構域蛋白是必需蛋白，特別是在Fas凋亡信號途徑中，Fas相關死亡結構域蛋白以其C端死亡結構域直接結合Fas死亡結構域，互相作用，顯露出死亡效應域，隨后作用于無活性的Caspase-6酶原，使之活化，引發Caspase級聯反應，致使細胞凋亡[16]。而細胞凋亡失控在胃癌、非小細胞肺癌、肝癌等腫瘤的發生與發展中發揮著重要的作用[17]。但是，臨床上尚未明確Fas相關死亡結構域蛋白與腫瘤細胞轉移發生關系的具體作用機制和臨床病理意義[18]。

本研究發現，Fas相關死亡結構域蛋白表達于乳腺癌癌細胞胞漿內和乳腺良性病變上皮細胞內。且A組Fas相關死亡結構域蛋白陽性表達率高于B組、C組（P<0.05）。由此可知，乳腺癌患者Fas相關死亡結構域蛋白陽性表達與其淋巴結轉移有關。本研究還深入分析了乳腺癌中Fas相關死亡結構域蛋白與病理指標相關性。結果顯示，在乳腺癌患者中，淋巴結轉移、確診年齡與Fas相關死亡結構域蛋白表達有關（P<0.05），但臨床分期、組織學類型與Fas相關死亡結構域蛋白表達無關（P>0.05）。進一步證實了乳腺癌患者Fas相關死亡結構域蛋白陽性表達與其淋巴結轉移的關系。本研究局限之處在于未明確Fas相關死亡結構域蛋白影響乳腺癌淋巴結轉移的作用機制，今后仍需進行深入分析。

綜上所述，Fas相關死亡結構域蛋白與乳腺癌淋巴結轉移有著密切的關系，需引起高度關注。endprint

[參考文獻]

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（收稿日期：2017-07-21 本文編輯：任 念）endprint