母嬰阻斷成功兒童1歲至3歲乙肝表面抗體的保護性研究

曹衛(wèi)華 張英 李明慧 冉崇平 齊天林 王星月 胡玉紅 周明書 張璐 路遙 吳淑玲 申戈 郝紅曉 常敏 胡蕾蘋 劉如玉 華文浩 易為 謝堯

100015北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部教學(xué)醫(yī)院 北京地壇醫(yī)院肝病中心(曹衛(wèi)華、張英、謝堯);100015 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院肝病中心(李明慧、冉崇平、齊天林、王星月、張璐、路遙、吳淑玲、申戈、郝紅曉、常敏、胡蕾蘋、劉如玉)；檢驗科(華文浩)；婦產(chǎn)科(易為、胡玉紅、周明書)

母嬰阻斷成功兒童1歲至3歲乙肝表面抗體的保護性研究

曹衛(wèi)華 張英 李明慧 冉崇平 齊天林 王星月 胡玉紅 周明書 張璐 路遙 吳淑玲 申戈 郝紅曉 常敏 胡蕾蘋 劉如玉 華文浩 易為 謝堯

100015北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部教學(xué)醫(yī)院 北京地壇醫(yī)院肝病中心(曹衛(wèi)華、張英、謝堯);100015 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院肝病中心(李明慧、冉崇平、齊天林、王星月、張璐、路遙、吳淑玲、申戈、郝紅曉、常敏、胡蕾蘋、劉如玉)；檢驗科(華文浩)；婦產(chǎn)科(易為、胡玉紅、周明書)

目的探討高病毒載量e抗原(HBeAg)陽性慢乙肝孕婦母嬰阻斷成功后，在1歲和3歲之間兒童HBsAb 滴度變化以及分析其長期保護性和感染率。方法入組乙肝表面抗原(HBsAg)、HBeAg雙陽性、孕28周HBV DNA≥106IU/ml慢性HBV感染孕婦的1周歲齡兒童，并隨訪至3歲，分別在1歲和3歲時檢測這些兒童的進口乙肝五項及生化檢測并分析1歲至3歲未補打加強疫苗兒童HBsAb 滴度變化、陽性率、陰性率和感染率；同時回顧性收集這些1歲兒童在我院有7個月HBsAb滴度檢測者，分析7個月至1歲期間未補打加強疫苗兒童HBsAb滴度變化、陽性率和陰性率。結(jié)果該研究入組264例1歲兒童，其中有7個月至1歲期間未補打加強疫苗兒童有178例，1歲至3歲期間的兒童中有114例未補打加強疫苗。結(jié)果顯示在1歲和3歲時未發(fā)現(xiàn)感染兒童。7個月至1歲兒童HBsAb 滴度呈現(xiàn)下降趨勢，HBsAb 滴度中位數(shù)從1 000 IU/L降至509.43 IU/L(P<0.05)，抗體仍然具有保護性；而1歲至3歲期間，HBsAb 滴度中位數(shù)從466.72 IU/L降至 67.3 IU/L (P<0.05)，3歲時有60.52%兒童處于低免疫應(yīng)答或無應(yīng)答狀態(tài)，但仍具有保護性，但顯著低于補打加強疫苗者，因此，這些1歲至3歲期間未補打加強疫苗的兒童仍處于高危狀態(tài)。結(jié)論7個月抗體有保護性，則1歲和3歲時不易感染；而3歲時抗體降至低或無應(yīng)答狀態(tài)，兒童仍處于高危狀態(tài)，有必要對其采取保護措施，補打加強疫苗。

我國HBV感染的主要傳播方式是圍產(chǎn)期母嬰垂直傳播。HBeAg陽性慢性HBV感染孕婦高病毒載量是HBV母嬰垂直傳播最重要的危險因素[1-3]。目前，乙肝疫苗刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生保護性抗體是預(yù)防HBV感染的最有效方法。自1992年,我國將新生兒出生后0,1,6個月，乙肝疫苗常規(guī)接種納入計劃免疫有效控制了HBV母嬰傳播，有效率高達95%。WHO推薦應(yīng)用高病毒載量孕婦分娩的新生兒在出生后12 h內(nèi)接種HBIG和乙肝疫苗，并在出生后1個月和6個月分別注射乙肝疫苗來預(yù)防新生兒感染極大地提高了母嬰阻斷的效果[4]；一項研究表明，HBV感染孕婦分娩新生兒中，95%未被感染的新生兒對首次接種的疫苗有應(yīng)答[5]。還有研究證明，第1針乙肝疫苗接種1個月后，只有約30%的孩子會產(chǎn)生HBsAb，而相繼接種第2針第3針疫苗后大約70%～90%會產(chǎn)生HBsAb[6]。由于兒童免疫系統(tǒng)功能不如成人強大，經(jīng)常規(guī)接種乙肝疫苗后，隨著年齡增長，產(chǎn)生的HBsAb會被慢慢消耗，抗體滴度會下降甚至失去保護性[7-8]。有研究發(fā)現(xiàn)，部分兒童在1歲時沒有感染，但是在1歲以后發(fā)生HBV感染[9]。因此，本研究的目的是探討經(jīng)過常規(guī)接種乙肝疫苗后7個月至1歲和1歲至3歲期間未補種乙肝疫苗的高危兒童乙肝表面抗體滴度的變化及分析其長期保護性和感染率。

1 材料與方法

1.1研究設(shè)計本研究是一項回顧性、觀察性研究，入組自2013年10月至2014年8月到首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院婦產(chǎn)科就診的孕婦其滿1歲的264例兒童，并隨訪至3歲；同時，收集這些兒童7個月HBsAb滴度定量檢測值，分別在1歲和3歲時檢測這些兒童的進口乙肝五項，肝功能，腎功能，電解質(zhì)以及血常規(guī)。回顧性分析7個月至1歲時HBsAb滴度變化，觀察1歲至3歲時HBsAb滴度變化以及分析其長期保護性和感染率；分析7個月至1歲兒童時排除這期間補打加強疫苗的兒童；分析1歲至3歲兒童時排除這期間補打加強疫苗的兒童。入組標(biāo)準(zhǔn)為： HBsAg 陽性超過6個月，HBeAg 陽性且在孕28周和產(chǎn)前HBV DNA載量均大于1×106IU/ml，孕期肝功能正常的母親所生孩子，且這些孩子均經(jīng)過出生后2 h、1個月、6個月常規(guī)注射10 μg 重組乙型肝炎疫苗(大連，漢遜酵母)免疫接種。排除標(biāo)準(zhǔn)：母親孕期羊水穿刺史；妊娠高血壓疾病、胎膜早破、早產(chǎn)、前置胎盤、胎盤早剝等病史；孕期注射乙肝免疫球蛋白治療；孕婦孕期合并除HBV外的其它病毒感染；出生7個月確診已經(jīng)感染的孩子以及患有肝臟疾病或免疫缺陷病等兒童排除。家屬簽署知情同意書，本研究通過了首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院倫理審核。

1.2檢測指標(biāo)分別在1歲和3歲時檢測隨訪兒童的進口乙肝五項，肝功能，腎功能，電解質(zhì)以及血常規(guī)，這些指標(biāo)均由首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院檢驗科提供。

1.3保護性評價指標(biāo)將HBsAb滴度作為保在護性指標(biāo)。參考文獻[10]HBsAb滴度定義如下：HBsAb滴度≥100IU/L定義為強應(yīng)答，HBsAb滴度在10-99 IU/L之間定義為弱應(yīng)答，HBsAb滴度<10 IU/L定義為無應(yīng)答。HBsAb滴度≥10IU/L(定義為HBsAb陽性，有保護性)百分率，HBsAb滴度<10 IU/L(定義為HBsAb轉(zhuǎn)陰，無保護性)百分率以及感染率。HBV母嬰傳播失敗率定義為出生后7個月靜脈血HBsAg陽性和/或DNA陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用統(tǒng)計軟件SPSS 19.0進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差或中位數(shù)表示。正態(tài)分布資料的兩組間數(shù)據(jù)的比較采用t檢驗完成，配對資料比較用配對設(shè)計t檢驗。計數(shù)資料用率表示，組間差異采用卡方檢驗。P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1入組1歲兒童基本情況本研究共入組264例1歲兒童，包括128例女孩和136例男孩，其中7個月至1歲期間未補打乙肝疫苗的兒童有178例；自1歲隨訪至3歲的兒童中有114例未補打加強疫苗。7個月確診母嬰阻斷成功的兒童在1歲、3歲隨訪時未發(fā)現(xiàn)HBsAg陽性兒童。

2.27個月和1歲兒童HBsAb滴度變化、陽性率和陰性率178例兒童在7個月至1歲期間未補打加強疫苗，通過比較兩個時間點HBsAb滴度水平發(fā)現(xiàn)，7個月至1歲，HBsAb滴度呈現(xiàn)下降趨勢：7個月HBsAb滴度中位數(shù)1 000, 12個月HBsAb滴度中位數(shù)509.43，兩個時間點比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)，如圖1所示。在7個月抗體陽性率達100%，1歲時只有1例兒童抗體轉(zhuǎn)陰，但未感染。

圖1 7個月與12個月HBsAb滴度的比較Fig.1 Comparing HBsAb titer at months 7 and 12

2.3完成3歲隨訪的未補打加強疫苗兒童HBsAb滴度變化、陽性率、陰性率和感染率114例兒童完成3歲隨訪，且沒有補打加強乙肝疫苗，這些兒童1歲和3歲HBsAb滴度比較發(fā)現(xiàn)，3歲時HBsAb滴度明顯低于1歲時HBsAb滴度(12個月HBsAb滴度中位數(shù)466.72, 36個月HBsAb滴度中位數(shù)67.34)，兩個時間點比較差異具有顯著地統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)如圖2所示。這些未補打乙肝加強疫苗的兒童在1歲時85.96%者處于免疫強應(yīng)答水平，低免疫應(yīng)答或無應(yīng)答所占比例很少，而在3歲時低應(yīng)答或者無應(yīng)答者占60.52%，比例較1歲時明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.017)，見表1, 隨著年齡的增長，兒童免疫應(yīng)答強度會下降，HBsAb滴度會逐漸下降。3歲時抗體陽性率92.10%，陰性率為7.90%。結(jié)果還顯示在3歲時沒有兒童感染。

圖2 12個月與36個月HBsAb滴度的比較Fig.2 Comparing HBsAb titer at months 12 and 36

表 1 年齡和HBsAb滴度應(yīng)答的相關(guān)性

2.41歲至3歲期間未補打加強疫苗和補打加強疫苗兒童抗體滴度及陽性率比較表2顯示補打加強疫苗兒童抗體滴度大于未補打加強疫苗兒童(P<0.001)，且補打者陽性率為100%。

表2 未補打加強疫苗和補打加強疫苗兒童抗體滴度及陽性率比較

3 討論

預(yù)防性接種乙肝疫苗可刺激機體產(chǎn)生HBsAb，在自然狀態(tài)下，HBsAb隨著年齡增長而逐漸被消耗，甚至失去對機體的保護性[11]。

有研究表明，母親HBV DNA高載量是母嬰垂直傳播的獨立危險因素，其所生孩子處于高危險狀態(tài)[12-13]。在7個月已確診母嬰阻斷成功的部分兒童在1歲以后可能會再感染HBV[14]，但在我們的研究中并沒有發(fā)現(xiàn)兒童在1歲和3歲時有感染者。我們的研究結(jié)果顯示7個月乙肝表面抗體滴度高時，1歲時也不易感染HBV；雖然3歲時抗體顯著下降，但是抗體仍為陽性，依然具有保護性，則3歲時也不易發(fā)生HBV感染。

本研究結(jié)果顯示，1歲至3歲期間未補打加強疫苗兒童的抗體滴度顯著低于補打疫苗兒童，抗體陽性率低于補打加強疫苗者，這提示1歲至3歲兒童在未補打疫苗情況下，雖然兒童體內(nèi)有抗體，但保護性較弱，再者，這些兒童仍處于高危險狀態(tài)中，因此，對這些低保護性兒童有必要采取保護措施，以降低其感染HBV的幾率。

我們研究目的旨在通過探討抗體的長期保護性和高危兒童的感染率，預(yù)防母嬰阻斷成功后兒童再發(fā)生HBV感染。然而，如何徹底避免1歲以后兒童感染HBV，尚需要進一步研究。

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2017-06-06)

(本文編輯：陳培莉)

ProtectivityofhepatitisBsurfaceantibodyinchildrenbetween1and3yearsaftersuccessfulblockingofmother-to-childtransmission

CaoWeihua,ZhnagYing,LiMinghui,RanChongping,QiTianlin,WangXingyue,HuYuhong,ZhouMingshu,ZhangLu,LuYao,WuShuling,ShenGe,HaoHongxiao,ChangMin,HuLeiping,LiuRuyu,HuaWenhao,YiWei,XieYao

DepartmentofLiverDiseasesCenter,BeijingDitanHospital,PekingUniversityTeachingHospital,Beijing100015,China(CaoWH,ZhangY,XieY);LiverDiseasesCenter,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China(LiMH,RanCP,QiTL,WangXY,ZhangL,LuY,WuSL,ShenG,HaoHX,ChangM,HuLP,LiuRY);ClinicalTestCenter,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China(HuaWH);DepartmentofObstetricsandGynecology,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China(YiW,HuYH,ZhouMS)

XieYao,Email:xieyao00120184@sina.com;YiWei,Email:yiwei1215@163.com.

ObjectiveTo investigate the change of hepatitis B surface antibody (HBsAb) titer and its long-term protection and infection rates between 1 and 3-year-old children whose mothers were chronic hepatitis B pregnant woman with HBeAg positive and high viral load after successful blocking of mother-to-child transmission.MethodsOne-year-old children whose mothers were hepatitis B surface antigen (HBsAg) and hepatitis B e antigen (HBeAg) positive, with HBV DNA≥106IU/ml were enrolled, then were followed up till 3 years old, and tested the five serological markers of hepatitis B and biochemical parameters at the age of one and three years respectively, and analyzed HBsAb titer, positive rate, negative rate and infection rate of 1 to 3-year-old children without enhanced vaccination; meanwhile, data of HBsAb titers at the age of 7 months were collected HBsAb titer, positive rate, and negative rate were analyzed.ResultsTotally 264 1-year-old children were enrolled into the study, including 178 children without enhanced vaccination between seven months and 1 year of age, and 114 children without enhanced vaccination between 1 year and 3 years of age. Our result showed that there were no infected children at the age between 1 and 3 years. HBsAb titer decreased from 7 months to 1 year old and dropped from 1 000 IU/L to 509.43 IU/L (P<0.05), and the antibody was still protective. From 1 year to 3 years old, HBsAb titer dropped from 466.72 IU/L to 67.3 IU/L (P< 0.05); at the age of 3 years, 60.52 % children were either weakly positive or negative, but still protective, but significantly less than those who had the reinforced vaccination. As a result , the children without the enhanced vaccination between 1 and 3 years of age were still at high risk.ConclusionsIf the antibody was protective at 7 months, children were not easily infected between 1 year and 3 years of age. At the age of 3, the antibody dropped to low or no responsive levels, and the children were still at high risk. It is necessary to take protective measures and supplement the vaccine.

Hepatitis B virus; Hepatitis B surface antibody; Hepatitis B vaccine; Mother-to-child transmission

謝堯，Email: xieyao00120184@sina.com; 易為，Email: yiwei1215@163.com

10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2017.05.005

肝炎病毒,乙型；乙肝表面抗體,疫苗肝炎，乙肝；母嬰傳播

北京市衛(wèi)生系統(tǒng)高層次衛(wèi)生人才項目(2015-3-106)；北京市科委首都臨床特色應(yīng)用課題(Z141107002514131)

FundprogramsBeijing Healthcare System for "High-level Technical Personnel Training Project"(2015-3-106); Beijing Science and Technology Commission Capital Clinical Characteristic Application Subject (Z141107002514131)