黃曲霉毒素B1人工抗原的制備、鑒定與免疫特性研究

陳宇熹,方振霞,雷美玲,吳藝嵐,張月珠,牛 蓉,葉 舟

(福建農林大學植物保護學院，福建福州350002)

黃曲霉毒素B1人工抗原的制備、鑒定與免疫特性研究

陳宇熹,方振霞,雷美玲,吳藝嵐,張月珠,牛 蓉,葉 舟?

(福建農林大學植物保護學院，福建福州350002)

采用EDC法制備獲得黃曲霉毒素B1人工抗原AFB1-BSA。對AFB1-BSA紫外掃描,結果表明其圖譜與黃曲霉毒素B1和BSA的圖譜有明顯差異,其紅外掃描結果與BSA的圖譜也有明顯差異,表明BSA與黃曲霉毒素B1偶聯成功。以不同摩爾比的AFB1-BSA人工抗原免疫小鼠,制備了特異性的鼠抗AFB1多克隆抗血清。綜合評價不同起始摩爾比反應所得人工抗原的免疫特性和AFB1轉化率,當AFB1與BSA的起始摩爾比為40∶1時,AFB1與BSA的偶聯產物摩爾比為4.93∶1,AFB1的轉化率達12.33%；用間接ELISA法測其抗血清的效價,經過四次免疫之后,抗血清的效價最高,高達1∶1 056 000。

黃曲霉毒素B1；人工抗原；抗體血清；ELISA

黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,簡稱AFB1)是由黃曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)產生的主要次級代謝產物之一,是目前所發現的一類強毒性,強致畸致癌性的真菌毒素(Ono et al.,2001；馮廣鵬等,2007；黃向華等,2004；Busby et al.,1984；馬健等,2012)。在世界不同地區,它對農作物、食品和飼料造成的廣泛污染,已成為威脅人類以及動物健康的嚴重問題(Maria et al.,2000；Ponland et al.,1993；Brown et al.,1998；Charles et al.,2001)。進一步加強對黃曲霉毒素B1的檢測,提高檢測效率,有助于預防和控制早期中毒事件的爆發(Lu et al.,2008；Cullen,2008),對保障食品安全和人畜健康具有重要的意義。

目前AFB1毒素的檢測有薄層層析法(馬俊,2013)、高效液相色譜法(Sani et al.,2013)、免疫親和柱層析法(謝芳等,2013)、ELISA法(Liu et al.,2013)、高靈敏度時間免疫分辨法(黃飚等,2006)等現代檢測方法(李響等,2013)。……