羅紅霉素含量測定技術分析

趙德春

摘 要：目的：對于羅紅霉素的含量進行測定，并且針對相關技術進行分析。方法：首先選取一定數量的羅紅霉素樣本，經過分配之后再進行研究，并且利用HPLC的方式對其進行檢測，主要針對其進行吸光度以波長方面的檢測，經過一系列試驗之后進行對比和分析，經過總結就可以得出其中羅紅霉素的實際含量了。結果：我們經過實際試驗所得到了數據，并且對數據進行了分析，我們已經發現這種測定方式具有較高的精度，并且具有良好的穩定性，針對片劑以及分散片進行測定之后得到的含量并非完全相同，很多外界因素也會對其造成影響，例如反應時的溫度以及作用時間等等。結論：上文中對羅紅霉素進行質量測定的方式是比較合理的，運用光譜法可以有效檢出羅紅霉素在整個藥品中的含量，值得進一步推廣使用。

關鍵詞：羅紅霉素；含量測定；測定技術

有些物質本身存在著富電子的屬性，而有些卻又有缺電子的屬性，所以利用這種屬性來有效轉移電荷，這樣就可以組成一種絡合物了，這個過程中就運用了荷移反應。很多物質生成的時候，荷移反應過程中所形成的絡合物也經常在吸收波長和自身的顏色上存在一定的特色。所以在這個時候我們就需要通過一定手段來測定其物質含量，這種方式目前在羅紅霉含量測定中有了一定程度的應用。在對羅紅霉素的含量進行測定的時候，荷移光譜法是一種比較簡便、測定結果較為準確的方式，可以有效確保整個試劑的穩定性，所以在目前受到很多人的重視，具有一定的推廣價值。

就羅紅霉素來說，其本身是抗生素的體驗一個類別，具有較為明顯的殺菌作用，尤其是對格蘭陽性菌和厭氧菌具有較好的處理效果。當前來看，我們針對羅紅霉素進行檢定的方式還仍然較為傳統，運用到的SP法和伏安法都已經比較老舊沒并且測定結果本身也存在著一系列的問題，難以適應具體的需要，所以現在已經有越來越多的研究人員采用荷移光譜法了。本文主要針對荷移光譜法進行分析和探討，確定其物質分析的準確性，希望可以給相關工作帶來一些參考。

1 資料與方法

1.1 主要試劑與設備

TCNQ（Sigma公司產品）丙酮溶液：5.0×10-3mol/L：標準羅紅霉素（羅紅霉素對照品，購自中國藥物生物制品檢定所）：1.0×10-3mol/L丙酮溶液；甲醇、無水乙醇、丙酮、氯仿等有機試劑均為分析純。羅紅霉素片（江蘇恒瑞醫藥股份有限公司，批號0501125l；江蘇亞邦愛普森藥業有限公司，批號041l129）。實驗用水均為二次蒸餾水。UV2401PC型紫外可見分光光度計（日本島津）；HHS21Ni型恒溫水浴（北京靖衛科學儀器廠）。

1.2 實驗方法

選定樣品試劑，并應用能夠承裝10ml溶液的比色管進行丙酮溶液的承裝，所承裝的丙酮溶液量需要控制為5.0×10-3mol/L。同時在比色管中，加入適量的羅紅霉素，利用丙酮溶液來對羅紅霉素進行稀釋，直到比色管中的混合液達到了標準刻度的時候，就可以充分的對兩種物質進行搖勻處理，在進行混合液配制的過程中，需要將溫度控制在30℃，并且兩種物質的反應時間也需要控制在20min，將搖勻的溶液放置到低溫環境下，進行冷凍，直到混合物的溫度下降到室溫溫度值即可停止冷凍。最后配制一個相應的空白試劑，利用該試劑與混合試劑進行對比分析，利用比色皿來對兩個試劑的吸光度進行檢測，而吸光度的檢測位置設定在743nm以及842nm的位置處。

1.3 樣品的測定

（1）樣品的準備：取不同廠家生產的羅紅霉素各10片（標示量均為每片150rag），精確稱量后研磨混勻，然后準確稱取總量的十分之一，用丙酮溶解，過濾，棄去不溶物。濾液于100ml容量瓶中定容備用。

（2）樣品的測定：取適量上述制備好的樣品試液于10ml比色管中，按實驗方法在max處進行測定，另按藥典方法測定相同藥物制劑含量，并用標準加入法作回收率實驗。

2 結果

2.1 羅紅霉素吸收光譜

按1.2實驗方法配制溶液，以相應的試劑空白為參比，繪制吸收光譜。試驗表明，羅紅霉素與TCNQ形成的絡合物分別在波長743、844nm處有兩個吸收峰，試劑在此波長范圍內吸收較小，羅紅霉素在此波長范圍內無吸收。

2.2 反應溫度的影響

分別在10℃～60℃恒溫一定時間后測量荷移絡合物的吸光度，研究溫度對荷移反應的影響。試驗表明，反應的最佳溫度為30℃。

2.3 反應時間的影響

控制反應溫度為30℃，分別選擇反應時間為10-50min，測定溶液吸光度，研究反應時間對生成絡合物的影響。試驗表明，最佳時間為20min。混合物在室溫下放置，120min內溶液的吸光度穩定。

2.4 試劑用量的影響

改變試劑用量，研究試劑用量對反應的影響。實驗表明，隨著試劑用量的增加，荷移絡合物的吸光度增大，當試劑用量達到一定時，溶液的吸光度基本保持不變，說明荷移反應趨于完全。適宜試劑用量為2ml。

2.5 溶劑的影響

分別用甲醇、無水乙醇、丙酮、氯仿等作溶劑，研究溶劑對反應的影響。實驗表明，以丙酮作溶劑為好，其荷移絡合物吸光度最大且穩定。

2.6 方法的重現性

移取6份羅紅霉素進行測定，測定結果的相對標準偏差為1%，說明方法重現性較好。

3 結論

物質如果發生了荷移反應，經常會導致物質顏色出現變化，其實這些顏色變化也是荷移反應所產生的絡合物上自帶的。這種絡合物可以有效吸收特定的波長，所以這是其具有的一個非常重要的特性，所以我們可以以此作為依托，來對物質含量進行較為精確的測定。當前荷移光譜法這種方式已經應用到很多藥物的檢測工作中了，其測量結果精確，操作簡單，可以有效節約檢測成本。

當前來看，經常用來藥物含量測定的方式還有紫外光法，這種方式可以有效針對波長在0.2-0.4μm的物質進行檢測，而羅紅霉素的波長為0.212μm，所以剛好在其檢測范圍內，但國內外都已經有學者證明，這種檢測方式本身并不具有很強的有效性，應用效果經常受到很多外界因素的影響，導致檢測結果不準確。在針對羅紅霉素進行檢測的時候，往往會出現一些特殊情況，例如試劑被吸收、輔料在試驗過程中被過量吸收等等，這些都給羅紅霉素成分的測定帶來了較大的影響，對于HPLC檢測方式來說，其并非是針對最大吸收波長這一項內容進行檢測的，所以我們采用了這種新型的、荷移光譜法來進行針對羅紅霉素的檢測工作。本次試驗在最低檢出量這一項雖然受到了一定程度的影響，但是我們也可以通過提高其使用劑量的方式來對這個問題進行彌補，這樣一來，檢測結果仍然是比較準確的，其他雜質也難以對檢測結果造成什么干擾。

結合上文所談，運用荷移光譜法這種方式可以得到較為準確的檢測結果，具有著很多舊有的檢測方式不具備的優點，例如操作簡單、檢測據有較高的穩定性等等，所以羅紅霉素檢測工作運用荷移光譜法完全可行，可以替代舊有的方式，值得進行廣泛推廣。

參考文獻

[1]左登平.HPLC法測定羅紅霉素膠囊含量的不確定度分析[J].黑龍江醫藥，2014（01）.

[2]沈幼鳴.高效液相色譜法測定羅紅霉素膠囊藥物含量的研究[J].求醫問藥（下半月），2012（08）.

[3]劉志杰，李東輝，饒金華.HPLC法測定羅紅霉素片中羅紅霉素含量不確定度評估[J].首都醫藥，2010（22）.

[4]左登平，何亞瓊，汪正宇.HPLC法測定羅紅霉素分散片含量的測量不確定度分析[J].中國藥房，2010（32）.endprint