雪菊總黃酮對小鼠體重及記憶再現(xiàn)障礙的影響

秦 樂 陳新梅 邢佰穎 岳志敏

(山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，山東 濟(jì)南 250355)

雪菊，菊科植物兩色金雞菊，具有清熱解毒、活血化疲、和胃健脾之功效。現(xiàn)代藥理研究表明，雪菊具有降血糖、降血壓、降血脂、抗氧化、去除體內(nèi)垃圾等多種功效[1]。其主要含有黃酮類物質(zhì)、人體必需礦物質(zhì)元素、氨基酸及蛋白質(zhì)類，也含有豐富的芳香族化合物，有機(jī)酸、多糖等[2]。其中，雪菊總黃酮含量高，具有顯著的抗病毒、抗氧化能力[3]，且從植物中提取得到的天然黃酮類化合物可有效對抗記憶力衰退[4]，為探討雪菊總黃酮對新陳代謝以及記憶力的影響，本實(shí)驗(yàn)采用稱量法和小鼠跳臺實(shí)驗(yàn)法研究其對體重、小鼠記憶再現(xiàn)及行為能力的影響程度，對人們的日常飲食與體重控制有一定指導(dǎo)意義，可為雪菊總黃酮在此方面的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材 料

1.1 動物

SPF級雄性昆明種小鼠，體重28～32g。由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司質(zhì)檢中心實(shí)驗(yàn)動物室提供。動物合格證編SCXK(魯)20160007。

1.2 儀器

XZC-5A 型小鼠跳臺儀(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站提供)；恒溫不銹鋼水浴鍋(上海樹立儀器儀表有限公司)；JM-A3002電子天平(諸暨市超澤衡器設(shè)備有限公司)。

1.3 試藥

雪菊(新疆潤元本草有限公司，批號：20160910)；95%乙醇(天津市富宇精細(xì)化工有限公司，分析純，批號: 20150725);氯化鈉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，分析純，批號：20160902)。

2 方法與結(jié)果

2.1 雪菊總黃酮的提取

精密稱取研碎后過60目網(wǎng)篩的雪菊粉末4.00 g，按料液比1∶10加入40 mL純水，于90 ℃下熱浸20 min后過濾。如此重復(fù)2次，合并2次浸出液得到11.14 mg/mL高劑量雪菊總黃酮[5]。后稀釋2次，各稀釋1倍，得5.57 mg/mL中劑量和2.78 mg/mL低劑量雪菊總黃酮。

2.2 動物分組及給藥

健康昆侖種小鼠40只，隨機(jī)分為4組，即空白組，低、中、高劑量雪菊總黃酮組，每組10只。除空白組外，其余各組分別灌胃(0.1 mL/10 g)給予低、中、高劑量雪菊總黃酮，空白組灌胃給予等量生理鹽水，每天2次，連續(xù)給藥30天。

2.3 小鼠體重的測定

各組小鼠自由取食及飲用水，分別在灌胃前，灌胃后10、20、30 d稱重記錄體重。并觀察每組小鼠排泄情況及健康狀況。

由表1可知，灌胃前，各組小鼠體重?zé)o差異，且4組小鼠在實(shí)驗(yàn)過程中體重均增加，且不同劑量雪菊總黃酮組的小鼠體重增長較空白組均有不同程度的減緩，劑量越大，體重增長越慢。與空白組相比，灌胃后20 d中、高濃度雪菊總黃酮組小鼠的體重統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著；灌胃后30 d高劑量組體重統(tǒng)計(jì)學(xué)差異極為顯著，表明高濃度雪菊總黃酮能明顯控制小鼠體重增長。

表1 不同濃度雪菊總黃酮給藥天數(shù)對小鼠體重的影響Table 1 Effects for days of different concentration total flavonoids from coreopsis tinctoria on weight of mice

注：與空白組比較，***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05。

2.4 跳臺實(shí)驗(yàn)

第30 d給藥1 h后，跳臺訓(xùn)練5 min(36 V，1 mA，Alternating Current交流電)。訓(xùn)練后24 h，試驗(yàn)前30 min，空白組灌胃40%乙醇10 mL·kg-1，低、中、高劑量雪菊總黃酮組等量灌胃末次給藥，進(jìn)行重復(fù)跳臺測試，記錄小鼠5 min內(nèi)受到電擊的總次數(shù)，定義為跳臺錯(cuò)誤次數(shù)。

表2 不同濃度雪菊總黃酮對40%乙醇致記憶再現(xiàn)障礙小鼠跳臺實(shí)驗(yàn)錯(cuò)誤次數(shù)Table 2 effects of different concentration total flavonoids from coreopsis tinctoriaon memory emersion disorders caused by 40% ethanol of mice

注：與空白組比較，***P<0.001。

由表2可知，與空白組相比，不同劑量雪菊總黃酮組的小鼠跳臺錯(cuò)誤次數(shù)均減少，濃度越大，跳臺錯(cuò)誤次數(shù)越少，且中、高劑量組有極顯著差異，表明中、高劑量雪菊總黃酮能顯著降低乙醇引起的記憶再現(xiàn)障礙模型小鼠跳臺錯(cuò)誤次數(shù)，提高其記憶再現(xiàn)能力。

3 結(jié)果與討論

通過測量小鼠在灌胃前，灌胃后10、20、30 d的體重，發(fā)現(xiàn)不同濃度的雪菊總黃酮對小鼠體重增長有不同程度的減緩作用，且濃度越高，體重增長減緩程度越大。灌胃20 d后，中、高劑量雪菊總黃酮組與空白組的體重相比有顯著差異；灌胃30 d后高劑量組與空白組小鼠體重差異極為顯著，表明高濃度雪菊總黃酮可明顯控制小鼠體重增長。雪菊總黃酮中的兒茶素[6]能顯著抑制脂肪細(xì)胞的增殖、分化，有抑制細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)積累的功效，同時(shí)通過刺激機(jī)體熱生成、降低機(jī)體對食物營養(yǎng)成分的吸收等作用而減少機(jī)體的能量攝入和存儲[7]，從而減緩小鼠的體重增長。且觀察各組小鼠排泄情況可發(fā)現(xiàn)，高劑量雪菊總黃酮組小鼠的排泄量較空白組明顯增多，說明雪菊能加快腸道蠕動，排除小鼠體內(nèi)垃圾，清理毒素，其原因可能與雪菊總黃酮的抗氧化能力與促進(jìn)新陳代謝[8]有關(guān)。綜上，推測雪菊總黃酮具有一定的促消化、排毒，減少脂肪堆積的功效，臨床上可用于潤腸通便，排毒養(yǎng)顏以及減肥等日常保健。

小鼠跳臺行為實(shí)驗(yàn)法檢測不同濃度雪菊總黃酮對40%乙醇所致小鼠記憶再現(xiàn)障礙的結(jié)果表明，與空白組相比不同濃度的雪菊總黃酮對小鼠記憶再現(xiàn)障礙有改善作用，且中、高劑量組能顯著減少跳臺錯(cuò)誤次數(shù)，表明中、高濃度雪菊總黃酮對具有中樞抑制作用的低濃度乙醇造成的記憶再現(xiàn)缺損有顯著的對抗作用，提示雪菊總黃酮可能改善了乙醇引起的細(xì)胞毒性反應(yīng)，修復(fù)了細(xì)胞因乙醇攝入導(dǎo)致的磷脂和脂肪酸代謝紊亂及氧化代謝產(chǎn)物的增加造成的損傷[9]。其機(jī)制可能與總黃酮清除自由基，抗脂質(zhì)過氧化等作用有關(guān)[10]。雪菊總黃酮在小鼠學(xué)習(xí)記憶方面的積極作用在臨床上對老年癡呆等病癥的防治具有潛在優(yōu)勢和良好的應(yīng)用前景[11]。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，雪菊總黃酮具有抑制小鼠體重增重和提高小鼠記憶再現(xiàn)能力的功效?？蔀檫M(jìn)一步探討雪菊總黃酮對動物體重及智力發(fā)育的影響，開發(fā)利用以雪菊總黃酮為原材料的功能性藥品和食品提供借鑒參考。

[1] 方煊,李雅麗,陳新梅. 雪菊黃酮對脂肪變肝細(xì)胞的降脂效果[J]. 溫州醫(yī)科大學(xué)報(bào),2016,46(10):720～723.

[2] 張媛，木合布力·阿不力孜，李志遠(yuǎn).金雞菊屬藥用植物研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志，2013, 38(16): 2 633～2 638.

[3] 段章好,陳新梅. 抗乙肝病毒中藥活性成分研究進(jìn)展[J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2016, 18(11):112～115.

[4] 王麗娟,張彥青,王勇,等. 酸棗仁黃酮對記憶障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J]. 中國中醫(yī)藥信息雜志,2014,2(5)1:53～55，60.

[5] 徐斌,王丹,葛紅娟,等. 昆侖雪菊黃酮提取物體外抗氧化活性試驗(yàn)[J]. 中國獸醫(yī)雜志,2015, 51(12):103～106.

[6] 袁輝,趙建勇,楊文菊. 新疆不同產(chǎn)地雪菊UPLC指紋圖譜的建立及其成分測定[J]. 中草藥,2015, 46(8):1 223～1 226.

[7] 葉小燕,黃建安,劉仲華. 茶葉減肥作用及其機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué),2012,33(3):308～312.

[8] 謝偉,楊永亮,梁莉,等. 銀杏黃酮對骨骼肌抗疲勞能力的影響[J]. 中國臨床康復(fù),2006,10(36):98～100.

[9] 景波,呂程,于建,等. 蕁麻總黃酮對記憶障礙模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J]. 華西藥學(xué)雜志,2016,31(3):239～242.

[10] 李利平,王全勝,武變瑛,等. 高純度銀杏黃酮對衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響[J]. 中國臨床康復(fù),2005,9(44):97～99.

[11] 陳新梅. 抗老年癡呆藥物研究進(jìn)展[J]. 中國民族民間醫(yī)藥,2011,3:30.