包裝飲用水銅綠假單胞菌檢測的相關問題及污染控制探討

□ 周 斌 徐雪梅 白雯靜 田妮娜 劉 荔 蘭州市食品藥品檢驗所

2017年某單位對全省包裝飲用水的生產單位、銷售單位的包裝飲用水進行了監督抽檢。共抽檢602批次，不合格48批次，不合格率為8.0%，不合格的主要是大桶裝的包裝飲用水，不合格的主要項目是銅綠假單胞菌。銅綠假單胞菌通常會引起黏膜、傷口感染化膿。包裝飲用水衛生的新國家標準GB 19298-2014，要求水樣中不得檢出銅綠假單胞菌。

包裝飲用水中銅綠假單胞菌的檢測是依據GB8538-2016，實驗中要用的材料、儀器、方法如下。

1 材料與方法

1.1 樣品

樣品主要來源于省內的生產、銷售單位，共計603批。

1.2 試劑和培養基

銅綠假單胞菌選擇性CN 瓊脂培養基、金氏B 瓊脂養基、乙酰胺液體培養基、綠膿菌素測定用培養基、十六烷三甲基溴化銨瓊脂、乙酰胺瓊脂培養基、氧化酶試劑、營養瓊脂、納氏試劑。

1.3 儀器設備

生物安全柜、恒溫培養箱、顯微鏡、膜過濾系統、全自動微生物鑒定及藥敏分析系統（VITEK 2）和紫外儀。

1.4 方法

《食品安全國家標準飲用天然礦泉水檢驗方法》（GB 8538-2016）57中采用濾膜法，將250mL水樣用孔徑為0.45 μm的濾膜過濾，并將濾膜移至CN瓊脂選擇性培養基上，于（36±1）℃恒溫箱中培養20～48h，典型菌落能夠在CN瓊脂選擇性培養基上生長并產生綠膿菌素，或者能夠在溴化十六烷基三甲基選擇性培養基上生長并且氧化酶呈陽性、紫外光（360±20）nm照射下能發熒光，能夠利用乙酰胺產氨的革蘭氏陰性無芽孢桿菌，經證實為銅綠假單胞菌，則其檢測結果為陽性。

2 結果

共抽檢樣品602份，檢出銅綠假單胞菌的有48份，檢出率達到8.0%，可見在桶裝飲用水銅綠假單胞菌的檢出率是相當高的。

3 檢驗過程中應注意的問題

第一，水樣過濾完畢在貼濾膜的過程中一定要注意濾膜要平鋪并避免在濾膜和培養基之間夾留氣泡。若不注意留有氣泡就會影響后期的判定，因為氣泡在紫外燈下也會產生熒光，這樣同產熒光的銅綠假單胞菌互相干擾，給后期的鑒定造成麻煩且會增加多余的工作量。

第二，培養時應將平板倒置于36℃的培養箱中培養，并防止干燥。

第三，培養時間也很重要，在20～24h時一定要觀察是否長菌或者長菌的多少，若長菌要觀察是否有可疑菌落，有可疑菌落就要挑取做下一步的實驗。若等到培養40～48h再進行觀察，菌長得多的平板上可疑菌就有可能會重疊或者菌落過分生長而出現菌落融合，不利于下一步的實驗，有可能造成漏檢或誤判。

第四，在紫外線下檢查濾膜時，應避免長時間在紫外光下照射，否則可能會將平板上的菌落殺滅，從而導致可疑菌無法在證實培養基上生長，造成目標菌的漏檢。

4 污染控制探討

銅綠假單胞菌是一種重要的水源性致病菌，廣泛生存于各類型水中。GB 19298-2014規定每250mL水樣中銅綠假單胞菌不得檢出。由于隨著社會的發展，人類對環境污染也屢有報道，進一步也影響到人們日常的生活用水，所以現在許多人選擇飲用大包裝的桶裝水。但近年來包裝飲用水中檢出銅綠假單胞菌的通報也不是什么新鮮事，全國多地都有。對于飲用了被銅綠假單胞菌污染的水是否會損害健康，取決于水中銅綠假單胞菌含量和不合格水的飲用量。

第一，飲用桶裝水的生產企業應在源頭上杜絕水源的污染，首先做好水源水的檢驗，若水源水中檢出銅綠假單胞菌應調差分析可能存在的污染，分析污染是有何種情況造成的，然后針對問題研究解決的方案。

第二，企業應加強對人員的培訓，不斷提高人員的專業技能和自身綜合素質，使生產人員講究衛生規范操作，以免人為的因素污染產品；同時企業也應重視硬件設施的更新和維護，生產的環境應符合相關的規定。

第三，食藥監管部門應進一步加強生產企業的監管，尤其在夏季，環境的濕度大，溫度也最適宜銅綠假單胞菌的生長（銅綠假單胞菌的最適生長溫度是（36±1）℃，督促企業規范生產，做好日常檢驗或委托檢驗，食藥監管部門和企業雙管齊下相信包裝飲用水的質量會越來越好。

消費者購買桶裝水時選擇品牌商的授權網點。飲用時，最好在一周內飲用完，開封一個月的桶裝水最好煮沸后再飲用，避免滋生細菌，合格的桶裝水沒必要煮沸飲用。礦泉水因水源取自地殼深處不會受污染，建議直接飲用。

[1]王燕梅,唐震,喬昕,等．江蘇省桶裝飲用水中銅綠假單胞菌污染情況調查[J].中國衛生檢驗雜志,2015(12):2019-2020.