應用高效液相色譜法檢測食品中黃曲霉毒素

□ 李 莉 金銘特 浙江省杭州市余杭區(qū)食品藥品監(jiān)測中心

1 黃曲霉毒素的危害與影響

黃曲霉毒素（AFT）是一種化學結構類似的化合物，是二氫呋喃香豆素的衍生物。而黃曲霉毒素就是由黃曲霉、寄生曲霉產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物，其主要出現(xiàn)在一些濕熱地區(qū)的食品以及飼料中。黃曲霉毒素在土壤、各種堅果以及動植物中廣泛存在，容易污染花生、玉米以及小麥等糧油產(chǎn)品，是一種對人體健康產(chǎn)生較大危害的霉菌毒素。2016年，歐盟對于黃曲霉毒素共發(fā)出原始通報2 993份，原始通報產(chǎn)生的后續(xù)跟蹤信息7 288條，總體2016年通報比2015年增長11.1%。在歐盟報告中明確與中國有關信息主要包括中國堅果、堅果產(chǎn)品和籽類中黃曲霉毒素被通報數(shù)量排名第5，通報數(shù)量為50條；原產(chǎn)中國的花生被通報49條，其中48條采取邊境拒絕措施；我國產(chǎn)品被通報總數(shù)254條，同比下降35.53%。現(xiàn)階段如何解決黃曲霉毒素問題已經(jīng)是食品安全領域的重點問題[1]。

2 高效液相色譜法（HPLC檢測法）

通過HPLC檢測法加強對黃曲霉毒素的檢測是現(xiàn)階段較為權威的方式。通過高效液相色譜以及熒光檢測器進行檢測在實踐中效果顯著。其中，HPLC檢測法就是一種色譜法，以甲醇等液體作為其流動相，利用四元泵把一些緩沖液以及溶劑泵入色譜柱之中，這樣就會分離在樣品中的不同組分，其被分離的物質在進入檢測系統(tǒng)中就會被發(fā)現(xiàn)。高效液相色譜法在檢測黃曲霉毒素的過程中，首先要利用三氯甲烷、甲醇等溶液的提取溶劑對要監(jiān)測物質進行處理，提取黃曲霉素樣品，然后利用過濾膜過濾之后放置在反相色譜柱中，再通過熒光檢測器對其進行系統(tǒng)的監(jiān)測分析，通過對獲得的峰高以及峰面積利用綜合外標法進行分析，就可以了解在被檢測物中黃曲霉毒素的具體含量[2]。

而在實踐中為了提升樣品的純度，避免各種雜質的影響，可以將HPLC檢測技術與免疫親和層析技術相結合，進而檢測黃曲霉毒素的特異性以及靈敏性。在黃曲霉毒素進入免疫親和柱的時候，其產(chǎn)生的免疫親核反應會吸附在柱內的固體支持物中，而在提取融合劑流于親和柱的時候，存在的抗體就會與黃曲霉毒素進行融合。通過清水沖洗就可以有效消除在免疫親和色譜柱中殘留的各種雜質，再利用甲醇等洗脫劑就可以清除殘留的黃曲霉毒素[3]。

而為了獲得精準的黃曲霉素B1以及黃曲霉毒素M1的靈敏度，可以應用光化學衍生技術、

電化學衍生技術以及碘衍生技術、三氟乙酸柱前衍生化技術等。其中三氟乙酸柱前衍生化技術是現(xiàn)階段AOAC應用中的重要技術，在實踐中靈敏度較高。

FLD檢測器方式應用在液相色譜檢測中，具有分辨率高、靈敏度高且精準性較強的特征。在實踐中可以對不同類型的黃曲霉素進行科學的分析。但是因為其應用步驟流程相對較為復雜，黃曲霉素的種類繁多，各種結構較為相似，在進行分離處理的時候就會浪費大量的人力、物力以及時間資源。同時，黃曲霉素的G1、B1檢測靈敏度相對較低，在實踐中必須要通過衍生化的方式對其進行處理，對于HPLC檢測操作人員的要求較為嚴格，因此，主要在專業(yè)的實驗中應用。

3 液相色譜一串聯(lián)質譜法（LC-MS）

液相色譜-串聯(lián)質譜法是通過色譜技術對樣品進行分離，再通過聯(lián)合質譜檢測技術檢測樣品。在實踐中質譜技術具有一定的檢測優(yōu)勢，且其選擇性良好，是今后檢測黃曲霉素的重要技術。在實踐中，通過溶液提取樣品中的黃曲霉素，然后進行樣品稀釋以及純化處理，對其進行免疫親和柱的純化吸附，通過霉菌毒素多功能凈化站對其進行吸附純化處理，其提取液通過液相色譜柱對其進行分離，通過電噴霧的方式對其進行離子化處理。在監(jiān)測過程中主要采取反應離子監(jiān)測方式開展工作，基于色譜技術保留時間以及質譜產(chǎn)生的碎片技術、離子風度的定性比，通過外標方式對其進行定量的分析處理。

4 結束語

黃曲霉毒素對動物以及人類產(chǎn)生較為嚴重的危害，現(xiàn)階段人們對其較為關注。在自然界中存在大量的黃曲霉毒素，而這些黃曲霉毒素會給人們的生活以及生產(chǎn)帶來較為嚴重的影響。對此必須要加強對黃曲霉毒素的檢測。通過高效液相色譜技術對黃曲霉毒素進行檢測可以有效了解具體含量，進而在根本上保障食品安全性。

[1]宋月,陳穎,白欣.光化學衍生-高效液相色譜法檢測食品中的黃曲霉毒素[J].實用預防醫(yī)學,2016,23(7):882-884.

[2]趙霞.光化學衍生-高效液相色譜法檢測食品中的黃曲霉毒素[J].中國保健營養(yǎng),2017,27(13).

[3]何翠霞.高效液相色譜在黃曲霉素檢測中的應用[J].食品安全導刊,2016(18):116.