孫群,胡翔,胡福云
(深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院耳鼻喉科1、普外科2、外一科3,廣東深圳518108)
喉鱗狀細(xì)胞癌(laryngeal squamous cellcarcinoma,LSCC)是頭頸部最常見的惡性腫瘤,也是僅次于肺癌的呼吸道癌癥[1]。LSCC好發(fā)于中老年男性,流行病學(xué)資料顯示,我國每年有3~5/10萬新發(fā)喉癌患者,其中LSCC占96%左右,發(fā)病率占全身惡性腫瘤的5.7%~7.6%,并且呈現(xiàn)逐年上升的趨勢[2]。手術(shù)、放療、化療仍為目前主要的治療手段,但是治療后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、化療耐受等問題較多,術(shù)后5年生存率約為61%[3],預(yù)后不理想,迫切需要新的治療手段。LSCC的病因和發(fā)病機制尚未完全明確,近來研究認(rèn)為,其發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞的過度增殖和凋亡的減少有關(guān)[4],相關(guān)的分子靶向治療研究越來越廣泛。腫瘤壞死因子(TNF)有明確的抗腫瘤活性,也是體內(nèi)重要的細(xì)胞因子,能夠抑制腫瘤細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,參與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的調(diào)節(jié),是目前腫瘤治療常見的分子靶[5],已用于腫瘤免疫及腫瘤臨床的研究,部分產(chǎn)品也已投入臨床試用。但是,TNF在LSCC中對鱗癌細(xì)胞的毒作用和機制的相關(guān)研究較少。本研究旨在探討TNF對喉鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的增殖抑制作用。
1.1 研究對象人喉鱗癌Hep-2細(xì)胞株,由中國科學(xué)院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所提供。
1.2 藥品與試劑重組人腫瘤壞死因子α(TNF-α),貨號:CYT-223,以色列ProSpec-Tany公司產(chǎn)品,采用RPMI-1640培養(yǎng)基配制20 pg/mL、50 pg/mL、100 pg/mL、200 pg/mL濃度的TNF-α溶液;RPMI-1640培養(yǎng)基、胎牛血清(FBS)購自美國HyClone公司;磷酸鹽緩沖溶液(PBS)、四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)、二甲基亞砜(DMSO)、0.5%聚乙二醇辛基苯基醚(0.5%Txiton X-100),購自上海紫一試劑廠;0.25%胰蛋白酶消化液,美國Gibco公司產(chǎn)品;……