甲巰咪唑治療Graves病甲狀腺功能亢進癥患者前后血清ZAG水平的變化*

鄧晶榮,郝 坡△，孟凡萍

(1.重慶三峽醫藥高等專科學校醫學技術系 404020；2.重慶三峽中心醫院檢驗科 404000)

Graves病(Graves′ disease，GD)是一種常見的器官特異性自身免疫性甲狀腺疾病。GD是原發性甲狀腺功能亢進癥中最常見及最主要的一種，約占所有甲狀腺功能亢進癥的85%，其發病率約1%～2%，近年來呈逐年增高趨勢[1]。甲狀腺的健康問題已成為醫學界關注的重點，但關于其具體發病機制尚未明確。目前抗甲狀腺藥物是甲狀腺功能亢進癥的主要治療方式之一。

鋅-α2-糖蛋白(Zinc-α2-glycoprotein，ZAG)是一種相對分子質量為41×103的可溶性糖蛋白，可由肝、脂肪組織等分泌[2]。ZAG作為新發現的細胞因子，具有提高胰島素敏感性、改善胰島素抵抗、促進機體脂質分解、增強機體能量消耗及降低體質量等作用[3-5]。眾所周知，高代謝癥候群、基礎代謝率增加及體質量降低是GD的主要臨床特征，且GD患者治療前后往往伴隨著血清中眾多細胞因子的變化[1,6]。然而，關于ZAG在GD病理生理發展過程中的作用尚無相關報道。因此，本研究對初發GD患者血清ZAG濃度及GD病甲狀腺功能亢進癥患者抗甲狀腺藥物治療前后血清ZAG水平的變化進行測定，并進一步分析ZAG與甲狀腺功能、血脂的關聯關系，為GD的發病機制及其臨床治療提供一定的實驗基礎。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取重慶三峽中心醫院內分泌科2014年 12月至2015年11月新發未治療的 GD 甲狀腺功能亢進癥(浸潤性突眼除外)患者54例為新發GD人群(nGD組)，其中男21 例，女 33例，平均年齡(41±13)歲，診斷依據為《中國甲狀腺疾病診治指南》的Graves診斷標準。所有患者于治療前及甲巰咪唑(methimazol,MMI) 治療(口服他巴唑 20～40 mg/d，根據患者癥狀臨床體征和甲狀腺功能逐漸減量)12周后分別檢測血清甲狀腺功能激素[促甲狀腺素(TSH)、游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)、總三碘甲狀腺原氨酸(TT3)、總甲狀腺素(TT4)]、甲狀腺素相關自身抗體[包括抗甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)、抗甲狀腺髓過氧化物酶抗體(TPO)和促甲狀腺素受體抗體(TRAb)]。同時設年齡和性別相匹配的健康體檢者62例為健康人群(NC組)，其中男28例，女34例，平均年齡(42±9)歲，均無甲狀腺疾病史，無甲狀腺腫大，甲狀腺功能正常且上述自身抗體陰性的門診患者作為對照組。所有患者均無病毒性肝炎、1型糖尿病、傳染性疾病及其他自身免疫病史。排除嚴重心肺肝脾腎疾病、腫瘤、中樞神經系統疾病、血管性疾病及對MMI不能耐受者。所有受檢對象均知情同意。

1.2方法 所有受檢者均空腹8～12 h后，于第2天清晨取肘正中靜脈血，4 ℃低溫4 000 r/min離心分離血清后分為3份，其中1份即時測定甲狀腺功能和甲狀腺相關自身抗體；1份用于測定三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、游離脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)；1份保存于-80 ℃冰箱以待批量檢測ZAG濃度。其中TSH、FT3、FT4、TT3、TT4、TGAb、TPO和 TRAb均采用電化學發光法檢測(Roche Cobas 601，瑞士)，血脂均采用酶法檢測(HighTachi 7020,日本)，血清ZAG水平利用ELISA法原理，嚴格按照試劑盒說明書進行操作(武漢優而生科技股份有限公司，中國)。其中ELISA試劑盒抗體為特異的兔抗人ZAG單克隆抗體，與脂聯素、血漿胰島素、抵抗素等肽類激素無交叉反應。最低檢測限為1.9 ng/mL；線性范圍為 4.69～300.00 ng/mL；批內變異系數(CV)<10%，批間CV<12%。

2 結 果

2.1兩組甲狀腺功能、甲狀腺相關自身抗體、血脂水平及血清ZAG水平的比較 與NC組相比較，nGD組FFA、TC、TG、HDL-C、LDL-C、TSH均明顯降低(P<0.05)，而FT3、FT4、TT3、TT4、TGAb、TPO、TRAb及ZAG明顯高于NC組(P<0.05)，兩組間年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

2.2nGD組患者經 MMI 治療前后甲狀腺功能、甲狀腺相關自身抗體、血脂水平及血清ZAG水平的比較 nGD組患者經 MMI治療12周后TC、TG、HDL-C、LDL-C、TSH均明顯升高(P<0.05)，與治療前相比較，FT3、FT4、TT3、TT4、TRAb及ZAG均顯著降低(P<0.05)，而治療前后兩組間TGAb、TPO及FFA差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表1 各組人群實驗室指標

a：P<0.05，與NC組比較

表2 初發GD人群MMI治療前后實驗室指標

a：P<0.05，與治療前比較

2.3相關性分析 線性相關分析表明：nGD組患者空腹血清ZAG水平與FT3、FT4、TT3及TT4呈正相關(r=0.613、0.796、0.646、0.570，P<0.01)；而與TSH、TG、TC、FFA呈負相關(r=-0.789、-0.816、-0.547、-0.428，P<0.01)。以空腹血清ZAG濃度為應變量，以年齡、TC、TG、FFA、HDL-C、LDL-C、TSH、FT3、FT4、TT3、TT4及TRAb等為自變量進行多元線性逐步回歸分析，結果表明，TSH、TG及TC分別是血漿ZAG水平的獨立相關因素(回歸方程為ZAG=61.864-4.28×TSH-0.897×TG-2.012×TC)，見表3。

表3 nGD組患者血清ZAG與甲狀腺功能、甲狀腺相關自身抗體及血脂水平的相關性

3 討 論

ZAG是1961年從人類血清中提純獲得的一種可溶的分泌性糖蛋白，主要表達于有分泌功能的上皮細胞胞質，如肝臟、胃腸道及汗腺、唾液腺、乳腺、前列腺和支氣管等組織的上皮細胞[2,7]。ZAG已被證實是一種促進脂肪分解的脂解因子，具有促進脂肪分解、減輕體脂作用，在許多腫瘤組織特別是惡病質狀態下高度表達[3-5,8]。近來，國內外研究表明ZAG在體內外眾多病理生理過程及維持機體內環境穩態中發揮著重要的作用，如調節免疫、抑制腫瘤細胞增殖與轉移、促進骨骼肌合成、提高胰島素敏感性、抑制機體炎癥等[9-11]。基礎代謝率增高、血脂降低及體質量減低作為GD患者最突出的臨床表現。然而，作為促脂肪分解因子，ZAG血清水平與GD的相關性尚無報道。因此，為初步闡釋ZAG在GD中所發揮的作用，本研究首次通過對新發GD患者(nGD)及經MMI治療前后新發GD患者血清ZAG濃度變化進行檢測，并進一步分析ZAG與甲狀腺功能、血脂水平及甲狀腺相關自身抗體的相關關系。結果表明：初發GD患者人群血清ZAG水平顯著高于健康對照組，這提示ZAG在GD的發生、發展過程中具有一定的作用。

GD患者高代謝癥候群主要與甲狀腺功能亢進、體內甲狀腺激素水平升高密切相關。MMI作為GD患者的主要抗甲狀腺治療藥物，通過抑制甲狀腺內過氧化物酶活性，從而阻礙甲狀腺素和三碘甲狀腺原氨酸的合成，并且在外周抑制T4向T3的轉化[12]。本研究結果顯示，新發GD患者經過MMI治療12周后，隨著體內甲狀腺功能的改善，血清ZAG濃度明顯降低。其次，相關分析結果顯示，nGD患者空腹血清ZAG水平與FT3、FT4、TT3及TT4呈正相關，而與TSH水平負相關。這進一步說明了循環中ZAG與甲狀腺功能密切相關。

甲狀腺激素通過調節血脂合成、轉運和氧化分解等維持血脂穩態。甲狀腺激素水平過高時體內脂肪儲備減少，引起血漿中的TG、磷脂和TC濃度降低，而甲狀腺激素含量不足時常引起血脂不同程度的升高[13-14]。與此結論一致的是，本研究結果顯示GD患者血脂水平較健康人群明顯降低。

近來研究顯示，肥胖患者及肥胖小鼠循環ZAG濃度較正常體質量者降低，可能和體質量的調節相關[15]。注射外源性ZAG蛋白能夠促進肥胖小鼠及人源性脂肪細胞TG分解，而抑制脂肪組織ZAG表達能夠促進TG蓄積[16-17]。研究表明，ZAG可顯著改善肥胖小鼠的糖脂代謝，可能與其抑制肝臟組織長鏈脂酰CoA合成酶1(ACSL1)和葡萄糖6-磷酸脫氫酶(G6P)表達、促進過氧化物酶體增殖物活化受體協同刺激因子1α(PGC-1α)和人糖原合成酶2(GYS2)表達有關[18]。雖然目前關于ZAG促進脂肪分解的機制尚不十分明確，但能夠確定的是ZAG在機體脂代謝穩態中發揮著關鍵作用。本研究相關分析結果顯示，GD患者空腹血清ZAG水平與TG、TC、FFA呈負相關，且多元線性逐步回歸表明TG及TC分別是影響血漿ZAG水平的獨立相關因素，這說明GD患者脂代謝紊亂可能與ZAG水平升高有關。然而，在GD患者中，甲狀腺功能亢進是直接還是間接通過調節ZAG表達影響脂代謝尚不清楚，有待于后續研究深層次闡釋。此外，本研究結果顯示GD患者血清ZAG水平與甲狀腺自身抗體TGAb、TPO及TRAb水平無相關性，說明血清ZAG可能與甲狀腺自身免疫無關。然而，由于本研究受樣本量及研究人群特定地域的限制，對于他們之間的具體關系需要深入研究。

總之，本研究結果初步揭示了ZAG與GD患者甲狀腺功能及血脂代謝密切相關，且MMI影響ZAG分泌水平。但因樣本量較小、隨訪時間短、研究人群分布范圍狹窄等，對于ZAG在GD中的表達變化、病理生理發展過程中所發揮的調節作用及其具體機制仍需進一步研究。

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