基礎醫學

浙江省5例輸入性瘧疾誤診病例的病原學診斷分析

姚立農，張玲玲，阮衛，等

摘要：目的：瘧疾是全球重要的公共衛生問題之一，每年可引起2億多人的感染病例和60～80萬人的死亡病例。卵形瘧原蟲是瘧疾的致病蟲種之一，主要分布在西非和太平洋西部的某些島嶼，其致病和臨床癥狀與間日瘧相似，且同樣存在可引起復發肝期裂殖子。在形態學上，間日瘧原蟲和卵形瘧原蟲也較為相近，僅依靠顯微鏡檢查對兩者進行區分仍存在一定的困難，常常導致錯判或誤診。本文結合顯微鏡檢查、瘧疾快速診斷試紙條（RDT）和巢式PCR檢測方法，對浙江省2011—2012年發現的5例輸入性瘧疾誤診病例進行病原學診斷和鑒定。方法：收集浙江省5例前期誤診為輸入性間日瘧患者的流行病學資料和血樣。應用抗凝血樣制作厚、薄血涂片，自然干燥、甲醇固定、吉姆薩染色后進行顯微鏡形態學檢查；應用RDT檢測試劑對血樣進行瘧原蟲抗原檢測；應用巢氏PCR方法（采用瘧原蟲屬特異性引物和4種種特異性引物）進行瘧原蟲基因檢測。對陽性PCR擴增產物進行測序，將測序序列與GenBank中已有的序列進行Blast比對分析，并將測序序列提交至GenBank中。結果：5例患者均為自非洲的歸國人員，其中3例歸國前有瘧疾發病史，臨床上主要表現為頭痛、咳嗽、發冷和發熱等癥狀，偶有腹瀉，初步診斷結果均為間日瘧感染。本文鏡檢復核結果顯示，4份血樣為卵形瘧原蟲感染1份（病例1）為卵形瘧原蟲和間日瘧原蟲混合感染。鏡下可見瘧原蟲環狀體、滋養體、未成熟裂殖體、成熟裂殖體和配子體。被寄生的紅細胞大小正常或略腫脹，部分被感染的紅細胞邊緣呈現傘矢狀，有的可見斑點粗大的薛氏小點。環狀體核較大，胞質粗厚，且存在一個紅細胞內多個環狀體以及環狀體和配子體重復感染的現象。大滋養體胞質堅實，空泡不顯著，呈圓形，瘧色素棕黃色。未成熟的裂殖體胞漿呈圓形或卵圓形，無空泡，可見棕黃色的瘧色素散在分布。成熟裂殖體可見聚集成團的棕黃色瘧色素，裂殖子數約為10個。雄配子體核質疏松，位于中央，胞質呈淺藍色，棕黃色瘧色素散在分布。RDT檢測結果顯示，5份血樣均為瘧原蟲陰性。巢氏PCR檢測結果顯示，5份血樣的全血DNA均擴增出卵形瘧原蟲特異性條帶（約800 bp），其中1份血樣（病例1）同時還擴增出間日瘧原蟲特異性條帶（約120 bp）。測序序列經Blast比對，5份血樣的擴增片段序列與Genbank中卵形瘧原蟲SSU RNA部分序列（登錄號分別為AB182489.1、AF145337.1、AB182490.1、AB182489.1和AF145337.1）的同源性均為99%，其中1份血樣（病例1）的另一擴增片段序列與間日瘧原蟲SV5 18S rRNA部分序列（登錄號為JQ627157.1）的同源性為99%。將5例卵形瘧原蟲特異性基因序列提交至GenBank中，登錄號分別為KC633223、KC633225-KC63228。結論：結合顯微鏡檢查、RDT和巢式PCR檢測結果，5例輸入性瘧疾病例中4例為卵形瘧原蟲感染，1例為卵形瘧原蟲和間日瘧原蟲混合感染。本文檢測結果提示：在瘧原蟲蟲種鑒定中，顯微鏡檢查雖作為瘧原蟲診斷的金標準，但僅依靠顯微鏡形態學檢查在某些蟲種鑒定時仍存在一定的局限，尤其在間日瘧原蟲和卵形瘧原蟲以及混合感染蟲種的鑒定中；RDT檢測方法因操作簡便、快速等優點而備受推崇，但其在檢測卵形瘧原蟲時常存在一定的假陰性結果，因此在感染瘧原蟲蟲種較難判定時，需進一步結合巢式PCR檢測結果進行確診。

來源出版物：中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志, 2013, 31(3):221-223

入選年份：2015