軍事醫學與特種醫學

自噬活性的降低增加人鼻咽癌CNE-2細胞的放射敏感性

盧小迪，朱小東，趙偉，等

摘要：目的：鼻咽癌是我國高發的惡性腫瘤之一，放射治療被公認為其最有效的治療手段。然而，研究發現，鼻咽癌組織中存在一定比例的放射抗拒細胞，嚴重制約了鼻咽癌的放射治療療效和預后。自噬是胞質大分子物質和細胞器在裂解腔隙中大量降解的非選擇性動力學過程。自噬被認為不僅可以通過清除細胞內的廢物、維持細胞內環境的穩定而影響細胞的生長發育，而且參與了多種疾病及腫瘤的發生、發展過程。研究表明，在多種人類腫瘤中均存在自噬活性的改變。自噬是近年來國內外研究腫瘤細胞死亡機制的新熱點。然而，關于自噬與放療的關系，特別是自噬在鼻咽癌放射治療中的作用的研究國內外卻鮮有報道。本課題組前期實驗已證實，射線可以誘導鼻咽癌CNE-2細胞發生自噬，并且，自噬的發生表現為不同程度的劑量和時間依賴關系。基于以上理論，本研究選取自噬相關基因ATG5為切入點，利用慢病毒介導的RNA干擾這一實驗方法，沉默自噬相關基因ATG5，進一步研究自噬與鼻咽癌CNE-2細胞放射敏感性之間的關系，以期為鼻咽癌放射抗拒的研究提供理論依據，為提高鼻咽癌放療療效提供新思路。方法：采用慢病毒介導的RNA干擾技術建立穩定沉默自噬相關基因ATG5的人鼻咽癌CNE-2細胞系，實驗分為Control組、NC組及ATG5組，應用CCK-8法、流式細胞術及克隆形成實驗檢測細胞增殖、凋亡及放射敏感性的變化。結果：CCK-8實驗結果顯示，與Control組和NC組相比，各劑量點ATG5組的細胞存活率均顯著降低（F＝3.755、46.086、8.609、44.160，P＜0.05），繪制細胞生存曲線可見下調ATG5的表達后可以增加CNE-2細胞的放射敏感性；流式細胞術結果顯示，經6 Gy X射線照射后，ATG5組細胞的凋亡指數較NC組及Control組明顯升高（F＝394.876，P＜0.01）；克隆形成實驗結果提示沉默ATG5基因可增加鼻咽癌CNE-2細胞的放射敏感性（F＝219.025，P＜0.05）。結論：降低鼻咽癌CNE-2細胞的自噬活性可以增強其放射敏感性。

來源出版物：中華放射醫學與防護雜志, 2015, 35(6):423-427

入選年份：2015