咪鮮胺混劑的生物活性測定及對水稻紋枯病的防治效果

劉懷阿， 張春梅， 呂 敏， 衛(wèi) 甜， 吉春明

(江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學研究所，江蘇揚州 225007)

咪鮮胺為咪唑類高效、廣譜、低毒型殺菌劑，具有預防、保護和治療等多重作用。對多種作物子囊菌和半知菌引起的病害具有明顯的防效，它可以與大多數(shù)殺菌劑、殺蟲劑、除草劑混用，均有較好的防治效果。對大田作物、水果蔬菜、草皮及觀賞植物上的多種病害具有治療和鏟除作用，如水稻稻瘟病、水稻紋枯病、油菜菌核病、小麥赤霉病、果樹蔬菜葉斑病、白粉病、銹病等[1]。

國內(nèi)眾多科研部門和農(nóng)藥生產(chǎn)企業(yè)都在研究開發(fā)咪鮮胺類的復配制劑，以便能夠進一步擴大防治對象，提升使用效果，減少農(nóng)藥使用劑量及延緩病菌抗藥性的產(chǎn)生與發(fā)展。市售產(chǎn)品眾多，如咪鮮胺與烯唑嗎啉、咪鮮胺與三環(huán)唑、咪鮮胺與甲環(huán)唑、咪鮮胺與氟硅唑等在生產(chǎn)上得到了廣泛的應用。江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學研究所以咪鮮胺與戊唑醇作為原料，進行了該混劑的生物活性測定以及田間對水稻紋枯病的防治試驗。戊唑醇為三唑類廣譜、內(nèi)吸性殺菌劑，同樣具有保護、治療和鏟除三大功能，殺菌譜廣，持效期長，主要用于防治小麥、水稻、蔬菜、果樹等作物上的多種真菌病害，在60多種作物上取得登記并廣泛應用[2]。

1 材料與方法

1.1 生物活性測定

1.1.1 試驗材料供試靶標 小麥赤霉病病原禾谷鐮刀菌，由江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學研究所保存并提供，將小麥赤霉病菌菌株接種至PDA培養(yǎng)基平板上，置于生物培養(yǎng)箱中，溫度在25～26 ℃條件下備用。試驗藥劑：丙酮(分析純)；95% 咪鮮胺原藥，江蘇綠葉農(nóng)化有限公司提供；97%戊唑醇原藥，江蘇七洲綠色化工股份有限公司提供。

1.1.2 試驗方法 參照NY/T 1156.2—2006《農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準則 殺菌劑 第2部分：抑制病原真菌菌絲生長試驗 平皿法》，采用抑制菌絲生長速率法[3]。

1.1.3 試驗處理 藥液的配制：分別稱取一定量的咪鮮胺原藥與戊唑醇原藥，用丙酮溶液配制成100 μg/mL的母液備用。根據(jù)預試驗得知咪鮮胺與戊唑醇對小麥赤霉病菌的聯(lián)合毒力趨勢，設置咪鮮胺 ∶戊唑醇分別為5 ∶1、4 ∶1、3 ∶1、2 ∶1、1 ∶1(體積比)5組配比進行測定，各單劑及各組混劑用0.1%吐溫80水溶液稀釋成5個系列濃度藥液。含藥平板的制備：在無菌條件下，依據(jù)上述藥液濃度從低到高定量吸取藥液加入含有定量融化PDA培養(yǎng)基的無菌錐形瓶中，充分搖勻，然后等量倒入4個直徑為9 cm的培養(yǎng)皿內(nèi)，制成5個系列濃度的含藥平板，咪鮮胺單劑及各配比測定濃度均為1、0.5、0.25、0.125、0.0625 μg/mL；戊唑醇單劑測定濃度為10.5、2.5、1.25、0.625 μg/mL，同時設置不含藥平板作空白對照，每處理重復4皿，即重復4次。接種：在無菌條件下，用直徑5 mm的滅菌打孔器沿已培養(yǎng)好的菌落邊緣切取菌餅，用已消毒的接種器將菌餅接種于不同處理培養(yǎng)基平板的中央，有菌絲一面朝下，置于25～26 ℃的生物培養(yǎng)箱中培育3 d后，調(diào)查測定結(jié)果。

1.1.4 數(shù)據(jù)記載與分析 培養(yǎng)到預定時間后，取出培養(yǎng)皿，采用卡尺以十字交叉法垂直測量2個菌落直徑(mm)，取其平均值作為該菌落的直徑。根據(jù)調(diào)查結(jié)果，由下列公式計算各處理對小麥赤霉病菌菌絲生長抑制率：菌絲生長抑制率=[1-(處理菌落直徑-5)/(對照菌落-5)]×100%。根據(jù)藥劑濃度對數(shù)值及對應的菌絲生長抑制率概率值作回歸分析，利用DPS分析軟件，計算出回歸方程，求出抑制孢子萌發(fā)50%的藥液濃度(EC50)、95%置信限及相關(guān)系數(shù)(r)。根據(jù)Warley法計算混劑的增效系數(shù)(SR)，從而評價藥劑混用的增效作用，即SR>1.5為增效作用，SR<0.5為拮抗作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用。增效系數(shù)(SR)計算公式如下：X=(PA+PB)÷(PA/A+PB/B)，SR=X/X1。式中：X為混劑的EC50(g/mL)理論值；PA為混劑中A的百分含量；PB為混劑中B的百分含量；A為混劑中A的EC50(g/mL)；B為混劑中B的EC50(g/mL)值；SR為混劑的增效系數(shù)；X1為混劑的EC50(g/mL)實測值。

1.2 田間藥效試驗

1.2.1 試驗對象 水稻栽培品種南粳9108，防治對象：水稻紋枯病。

1.2.2 供試藥劑 45%咪鮮胺·戊唑醇可濕性粉劑(WP)由江蘇揚州綠源生化有限公司提供，25%咪鮮胺乳油(EC)為江蘇連云港市立本農(nóng)藥化工有限公司市售產(chǎn)品，43%戊唑醇懸浮劑(SC)為江蘇七洲綠色化學股份有限公司產(chǎn)品。

1.2.3 試驗地概況 試驗地點設在江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學研究所良種繁育基地，試驗田前茬為小麥，土質(zhì)為黏性土，肥力中等，pH值6.7。栽培方式為育苗移栽，水稻長勢良好，常規(guī)肥水管理，水稻紋枯病常規(guī)中等發(fā)生，整個生育期不施其他農(nóng)藥。

1.2.4 試驗處理 試驗設6個處理，分別為：(1)45%咪鮮胺·戊唑醇 WP 750 g/hm2；(2)45%咪鮮胺·戊唑醇WP 900 g/hm2；(3)45%咪鮮胺·戊唑醇 WP 1 050 g/hm2；(4)25%咪鮮胺EC 900 mL/hm2；(5)43%戊唑醇SC 300 mL/hm2；(6)清水對照(CK)。每處理重復4次，小區(qū)面積30 m2，隨機區(qū)組排列，小區(qū)間筑埂隔開，田間肥水管理一致。

1.2.5 施藥與調(diào)查方法 本試驗用藥2次，使用華豐-16型背負式噴霧器，噴孔直徑1.3 mm，操作壓力3～4 kg/cm2，由低劑量到高劑量依次常規(guī)噴霧，用藥兌水750 L/hm2，于2016年7月20日水稻孕穗期第1次施藥、8月30日水稻抽穗期第2次施藥。調(diào)查方法：每處理定5個點，每點固定調(diào)查5叢，第2次施藥后14 d分別調(diào)查水稻總株數(shù)，各級病株數(shù)，計算病指及防效。

1.2.6 藥效計算方法 病情指數(shù)=∑[(各級病穗數(shù)×相對應病級數(shù)值)/(調(diào)查總穗數(shù)×9)]×100%；防效=(空白對照區(qū)病情指數(shù)-藥劑處理區(qū)病情指數(shù))/空白對照區(qū)病情指數(shù)×100%。采用鄧肯氏新復極差法(DMRT)進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 生物活性測定

根據(jù)室內(nèi)生物活性測定結(jié)果，咪鮮胺、戊唑醇以及二者復配劑對小麥赤霉病菌菌絲生長具有較強的抑制作用，不同處理抑制孢子萌發(fā)50%的藥液濃度EC50為0.116 5～2.354 6 μg/mL(表1)。咪鮮胺與戊唑醇5個配比的增效系數(shù)SR≥0.5，表明咪鮮胺與戊唑醇復配沒有拮抗作用，復配可行；但不同配比，聯(lián)合作用表現(xiàn)有差異，其中咪鮮胺 ∶戊唑醇 2 ∶1 的增效系數(shù)SR最高，為1.58，表明具有增效作用(表2)。本試驗是在室內(nèi)離體條件下進行的，江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學研究所揚州綠源生化有限公司依據(jù)該試驗結(jié)果配制成45%咪鮮胺·戊唑醇WP待試驗使用。

2.2 田間藥效試驗

藥劑45%咪鮮胺·戊唑醇WP防治水稻紋枯病效果見表3。使用45%咪鮮胺·戊唑醇WP 750、900、1 050 g/hm2第2次施藥后14d的防效分別為82.30%、85.75%、88.13%；對照藥劑25% 咪鮮胺EC 900 mL/hm2、43%戊唑醇SC 300 mL/hm2的防效分別為79.69%、82.35%(表3)，分析結(jié)果表明，45%咪鮮胺·戊唑醇WP高劑量、中劑量2個處理的防效沒有顯著性差異，但均顯著高于該藥劑低劑量處理的防效，同時高、中劑量2處理防效也顯著高于對照藥劑25%咪鮮胺EC 900 mL/hm2和43%戊唑醇SC 300 mL/hm2的防效。供試藥劑在本試驗劑量范圍內(nèi)對試驗作物水稻安全無藥害，對環(huán)境亦無不良影響。

表1 咪鮮胺、戊唑醇及其混劑對小麥赤霉病菌菌絲生長的抑制效果

表2 咪鮮胺與戊唑醇混配的聯(lián)合作用

表3 45%咪鮮胺·戊唑醇 WP防治水稻紋枯病田間防效

3 結(jié)論與討論

咪鮮胺與戊唑醇復配在室內(nèi)離體條件下，對小麥赤霉病菌菌絲生長具有較強的抑制作用，其復配制劑在對小麥赤霉病田間試驗防治效果有待進一步驗證。

45%咪鮮胺·戊唑醇WP的本次田間藥效試驗以水稻紋枯病作為防治對象。水稻紋枯病由立枯絲核菌感染致病，多在高溫、高濕條件下發(fā)生，南方稻區(qū)普遍危害嚴重，是水稻生產(chǎn)上的主要病害之一[4]。水稻紋枯病使水稻不能抽穗，或抽穗的秕谷較多，粒質(zhì)量下降。防治上除了選用良種、加強栽培管理、采用配方施肥技術(shù)、合理密植等[5]，化學防治是必不可少的。在目前抗紋枯病水稻品種缺乏的情況下，選擇適當藥劑并采用合適的施藥方法是防治水稻紋枯病的重要措施[6]。

市場上防治水稻紋枯病的殺菌劑種類很多，比如井岡霉素、甲基硫菌靈、己唑醇、戊唑醇、噻呋酰胺、 氟環(huán)唑以及各類

復配劑。本研究田間試驗結(jié)果表明，45%咪鮮胺·戊唑醇WP 900～1 050 g/hm2對水稻紋枯病具有較好的防治效果，生產(chǎn)上適宜推廣使用。建議防治水稻紋枯病使用45%咪鮮胺·戊唑醇WP 900～1 050 g/hm2于水稻發(fā)病初期第1次施藥，之后根據(jù)病情發(fā)展需要或間隔15～20 d再施藥1次；若紋枯病嚴重發(fā)生年份，建議與其他殺菌劑輪換交替使用，防治效果會更好，同時也有利于減緩抗藥性的產(chǎn)生。