食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制

◎ 隋佳琪

（遼源市食品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，吉林 遼源 136200）

食品微生物檢驗(yàn)是評(píng)價(jià)和確保食品衛(wèi)生安全、預(yù)防和控制食源性疾病，確保百姓舌尖上安全的重要手段之一。遼源市食品質(zhì)量安全檢測(cè)中心成立于2017年5月，是利用世界銀行貸款和省市兩級(jí)財(cái)政配套資金建成的集農(nóng)產(chǎn)品、畜產(chǎn)品、水產(chǎn)品、食品、產(chǎn)地環(huán)境等方面檢測(cè)為一體的綜合檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)。中心現(xiàn)有專業(yè)技術(shù)人員18人，其中碩士研究生13人。中心自成立以來，從實(shí)驗(yàn)室的人（檢測(cè)人員）、機(jī)（儀器設(shè)備）、料（樣品）、法（標(biāo)準(zhǔn)）、環(huán)（環(huán)境設(shè)施）5個(gè)框架全面著手，細(xì)化實(shí)施。于2018年6月順利通過CMA認(rèn)證。中心成立以來，分別從實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制和外部質(zhì)量評(píng)估兩方面嚴(yán)格把控，以達(dá)到對(duì)微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。現(xiàn)綜合檢測(cè)中心實(shí)際情況淺談如何開展微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)部質(zhì)量控制。

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制是由實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部制訂并細(xì)化實(shí)施，對(duì)檢驗(yàn)的各個(gè)環(huán)節(jié)、各個(gè)因素進(jìn)行連續(xù)評(píng)價(jià)和驗(yàn)證，對(duì)發(fā)現(xiàn)的問題和不合格情況及時(shí)處理并采取糾正措施[1]。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)控是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果真實(shí)可靠的重要手段，也是做好實(shí)驗(yàn)室外部質(zhì)量評(píng)估的基礎(chǔ)和前提。為提高微生物檢測(cè)數(shù)據(jù)結(jié)果的可靠性，必須在人、機(jī)、料、法、環(huán)等各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格把控。現(xiàn)主要從以下幾個(gè)方面介紹如何開展食品微生物實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)部質(zhì)量控制。

1 檢測(cè)人員

檢驗(yàn)人員應(yīng)具備專業(yè)的教育背景、熟悉相應(yīng)的法律法規(guī)、政策文件和規(guī)章制度，操作熟練，并通過請(qǐng)進(jìn)來、走出去的方式進(jìn)行專業(yè)的相關(guān)培訓(xùn)，并取得相應(yīng)的檢驗(yàn)資質(zhì)。微生物檢驗(yàn)人員應(yīng)該具有高度的責(zé)任感、使命感和實(shí)事求是的工作態(tài)度。檢驗(yàn)人員在操作過程中應(yīng)該嚴(yán)格無菌操作，防止人為污染樣品，同時(shí)也應(yīng)該做好自身防護(hù)，尤其當(dāng)檢出疑似致病菌時(shí)，應(yīng)該嚴(yán)格按照致病菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)室管理人員應(yīng)定期對(duì)檢驗(yàn)人員進(jìn)行技術(shù)考核和人員比對(duì)，并通過例如大比武、大練兵等活動(dòng)讓檢測(cè)人員始終保持工作的緊迫性和主動(dòng)性。

2 設(shè)備和檢驗(yàn)用品

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該配備能夠充分滿足工作需要的檢測(cè)設(shè)備。檢測(cè)設(shè)備的存放、使用、維護(hù)保養(yǎng)應(yīng)該嚴(yán)格按照要求進(jìn)行，并定期對(duì)設(shè)備進(jìn)行期間核查、功能性核查、檢定校準(zhǔn)等，以確保設(shè)備處于正常的工作狀態(tài)。每臺(tái)設(shè)備都應(yīng)該有專人負(fù)責(zé)，并做好設(shè)備設(shè)施監(jiān)控記錄和使用記錄。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該配備至少3倍于日常檢測(cè)量的實(shí)驗(yàn)用品。例如，培養(yǎng)皿、吸管、接種環(huán)、接種針等需要反復(fù)使用的實(shí)驗(yàn)用品可以用一次性用品來代替。已滅菌和待滅菌的檢驗(yàn)用品應(yīng)該分開存放，并做好標(biāo)識(shí)，以防混用。滅菌方法的選擇應(yīng)該按照用品的性能進(jìn)行區(qū)分，一般包括：干熱滅菌法，常用設(shè)備如干熱滅菌箱；濕熱滅菌，常用設(shè)備如高壓蒸汽滅菌鍋；紫外殺菌法和化學(xué)滅菌法等。

3 標(biāo)準(zhǔn)

正確選擇檢驗(yàn)方法是確保檢驗(yàn)質(zhì)量的首要條件。標(biāo)準(zhǔn)方法按級(jí)別可以分為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。一般情況下，客戶有要求的應(yīng)該按照客戶要求的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)客戶未指定檢測(cè)方法時(shí)，應(yīng)該優(yōu)先使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布的最新方法。食品微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)同一檢驗(yàn)項(xiàng)目有兩個(gè)及兩個(gè)以上定性檢驗(yàn)方法時(shí)，應(yīng)以常規(guī)培養(yǎng)方法為基準(zhǔn)方法，對(duì)同一檢驗(yàn)項(xiàng)目有兩個(gè)及兩個(gè)以上定量檢驗(yàn)方法時(shí)，應(yīng)以平板計(jì)數(shù)法為基準(zhǔn)方法[2]。

4 環(huán)境設(shè)施

由于微生物的特殊性，所以對(duì)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求十分嚴(yán)格。為確保實(shí)驗(yàn)安全，避免檢測(cè)環(huán)境對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，食品微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和管理應(yīng)該參照標(biāo)準(zhǔn)GB 19489-2008實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求進(jìn)行。在布局上，微生物實(shí)驗(yàn)室的工作區(qū)域應(yīng)與辦公室區(qū)域應(yīng)分開。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采用單向工作流程，避免交叉污染，同時(shí)應(yīng)該設(shè)有傳遞窗、互鎖設(shè)備、緩沖間、高效過濾器等，以確保檢測(cè)環(huán)境不會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響[3]。在相應(yīng)的區(qū)域應(yīng)該設(shè)有潔凈標(biāo)識(shí)、危險(xiǎn)標(biāo)識(shí)、緊急逃生標(biāo)識(shí)，外來人員未經(jīng)本實(shí)驗(yàn)室人員允許禁止進(jìn)入標(biāo)識(shí)等。樣品的檢驗(yàn)應(yīng)該嚴(yán)格按照檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室功能進(jìn)行區(qū)分。一般樣品檢驗(yàn)應(yīng)在潔凈區(qū)域進(jìn)行。食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)與水的檢驗(yàn)、土壤微生物檢驗(yàn)、真菌的檢驗(yàn)應(yīng)該有明顯的區(qū)域劃分。病原微生物的分離鑒定應(yīng)在二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，并需配備二級(jí)生物安全柜。二級(jí)生物安全柜的使用管理應(yīng)該參照國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)YY 0569-2011。不同功能的微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)溫度、濕度和潔凈度等都有不同的要求，應(yīng)該嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行管控，每個(gè)檢測(cè)室都應(yīng)該有專人負(fù)責(zé)，每日做好環(huán)境監(jiān)控記錄，潔凈室還應(yīng)該按照要求定期進(jìn)行清潔，檢測(cè)潔凈度是否達(dá)標(biāo)，潔凈度的評(píng)價(jià)一般以沉降菌的計(jì)數(shù)為常用方法，通常以9 cm培養(yǎng)皿暴露30 min經(jīng)培養(yǎng)后，百級(jí)潔凈室菌落總數(shù)不大于1 CFU[4]。

5 培養(yǎng)基和試劑

培養(yǎng)基和試劑的制備和質(zhì)量控制應(yīng)該按照GB 4789.28-2013的規(guī)定執(zhí)行，并進(jìn)行適用性驗(yàn)證[2]。食品微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該配備專門的試劑管理員，新購(gòu)入的培養(yǎng)基和試劑應(yīng)仔細(xì)盤點(diǎn)，做好臺(tái)賬，并妥善保管廠家提供的資料，對(duì)需要進(jìn)行驗(yàn)證和評(píng)價(jià)的培養(yǎng)基和試劑應(yīng)該按照國(guó)標(biāo)GB 4789.28-2013進(jìn)行，質(zhì)量達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求方可使用。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該定期對(duì)培養(yǎng)基和試劑進(jìn)行盤點(diǎn)，防止因由于短缺耽誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)定期對(duì)用標(biāo)準(zhǔn)菌株、培養(yǎng)基、試劑等設(shè)置陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照以確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確。檢驗(yàn)人員應(yīng)該正確掌握培養(yǎng)基的配制方法，使用商品化脫水合成培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配制，并標(biāo)記好配制人、配制日期、名稱、儲(chǔ)存條件，以便溯源[5]。

6 標(biāo)準(zhǔn)菌株

食品微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)菌株主要用于培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量測(cè)試，實(shí)驗(yàn)中用作陽性對(duì)照、陰性對(duì)照、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)控等。標(biāo)準(zhǔn)菌株一般要求應(yīng)是專門菌種保藏機(jī)構(gòu)保存的并且可溯源的菌株。新購(gòu)入標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，證實(shí)符合要求后按照要求進(jìn)行菌種保藏。菌種的采購(gòu)、保藏、復(fù)蘇、傳代都應(yīng)該做好相應(yīng)的記錄。用于性能測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存菌株，在保存和使用時(shí)應(yīng)注意避免交叉污染，并且對(duì)于保藏的菌種應(yīng)該定期進(jìn)行檢查，測(cè)試菌種活力，防止菌種衰退。儲(chǔ)備菌株的傳代次數(shù)不得超過5次，不合格的菌種應(yīng)該及時(shí)進(jìn)行無害化處理。

7 內(nèi)控

食品微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制方法主要有：①人員比對(duì)法，即由兩個(gè)或兩個(gè)以上的檢測(cè)人員同時(shí)對(duì)樣品進(jìn)行檢驗(yàn)。②定期使用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制。③使用相同或不同方法進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)。④平行樣實(shí)驗(yàn)。⑤盲樣測(cè)試。通過以上方法可以實(shí)現(xiàn)對(duì)開展的檢測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)。

8 結(jié)語

習(xí)近平在十九大報(bào)告中指出：“我國(guó)社會(huì)主要矛盾已經(jīng)轉(zhuǎn)化為人民日益增長(zhǎng)的美好生活需要和不平衡不充分的發(fā)展之間的矛盾。”隨著經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，人們對(duì)生活品質(zhì)的要求日漸提高。其中食品安全問題是事關(guān)民生的重中之重。食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)在守護(hù)人民舌尖上安全上發(fā)揮重要作用，進(jìn)行有效的質(zhì)量控制是確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可靠的重要一環(huán)，而實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制貫穿檢測(cè)活動(dòng)的始終，不僅僅是以上的各個(gè)要素，還包括樣品的采集、檢驗(yàn)的過程、報(bào)告的出具等。身為檢測(cè)人員，不僅要有相應(yīng)的知識(shí)儲(chǔ)備和熟練的操作技能，還應(yīng)具有高度的責(zé)任感和使命感，嚴(yán)格把控質(zhì)量關(guān)，出具準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，做好人民舌尖上的衛(wèi)士。