動物疫病監(jiān)測中的豬樣品采集技術(shù)要點

(定興縣農(nóng)業(yè)局, 河北 定興 072650)

1 檢測對象不同的樣品采集技術(shù)

1.1 檢測細(xì)菌

假若豬樣品用于檢測細(xì)菌，則選擇樣品時應(yīng)選取病狀較典型且死亡時間較短的豬為最佳，假若條件不允許，則應(yīng)對采集的組織或樣品做無菌處理，亦可以在實驗室現(xiàn)場做無菌處理。主要方法為使用接種棒將豬試驗品中所需的血樣及肝臟通過接種的方法放置于血平板處。且需注意的一點是該樣品不經(jīng)允許不得加入任何物質(zhì)，處理完成后，應(yīng)立即將樣品放置于密閉性較好的、經(jīng)過滅菌處理的空間內(nèi)，并為其貼上詳細(xì)的標(biāo)簽以便下一次的尋找，緊接著為該樣品尋找一個空間較大的冷藏室，以備即將實施的送檢工作。

1.2 檢測病毒

假若該豬樣品的主要目的是檢測病毒，應(yīng)選擇在豬病發(fā)體溫升高的過程中進行采集，該樣品的采集結(jié)構(gòu)一般為豬的臟器或是糞便，與上述檢測細(xì)菌的處理方法相似，大致流程為“采集-無菌處理-貼標(biāo)簽-冷藏處理-送檢”。假設(shè)運送路途過于遙遠(yuǎn)，則可以采取先將樣品凍結(jié)的方法以保障采集樣品的可使用性，另一種有效手段為將所需樣品防治在酸堿度適中的乳液內(nèi)部，并在該容器內(nèi)加入適量的青霉素或鏈霉素，緊接著進行冷藏放置以備送檢。假若此次采集過程中所需樣品只能是抗凝血，則應(yīng)在采集樣品前，在用于采血的容器內(nèi)部添加適量的濃度為0.1%的肝素物質(zhì)，豬樣品應(yīng)從使用注射或真空采血的方法對其前腔靜脈做抽血處理。假若樣品需求量較少，則可選擇其他部分進行抽取，例如耳靜脈等。

1.3 檢測血清

采集檢測血清的豬樣品可使用的工具為一次性采血器、一次性注射器。首先利用注射器從豬的靜脈位置抽取大約3ml的血液樣品，并將其放置于一次性采血儀器內(nèi)部，緊接著為其貼標(biāo)簽，將其放置在室溫環(huán)境內(nèi)，確定血液凝固后為其安排送檢。經(jīng)過相關(guān)操作，使得樣品結(jié)構(gòu)內(nèi)的血清在最快程度內(nèi)分離出來[1]。值得注意的一點是假若在放置過程中，部分血液已呈現(xiàn)凝固狀態(tài)，則應(yīng)即刻進行低溫儲存，如若較長時間內(nèi)不做檢測處理，血清樣品應(yīng)保存在溫度為4℃的環(huán)境中，切記血清樣品不得多次做凍融處理，否則對于樣品的檢測結(jié)果會有所影響。

1.4 檢測病理組織

假設(shè)樣品用于檢測病理組織，則采集過程中的首要需求為保證樣品采集的新鮮程度，應(yīng)選擇病狀具有代表性的結(jié)構(gòu)組織，且采集時應(yīng)連同健康組織一起，以確保結(jié)構(gòu)的完整性。采集樣品的規(guī)格為長寬1～2cm，厚度為0.5cm，采集完成后立即進行固定處理，輔助材料為比例高達95%的酒精液體或是比例為4%酸堿度適中的甲醛緩沖液。

2 技術(shù)要點

2.1 樣品適宜

豬樣品所使用的作用不同，檢測樣品也會發(fā)生一定改變。假若需對疫病做具體檢測，應(yīng)選擇具有較重疫病的豬樣品。如若該疫病沒有具體定論，則應(yīng)采取全面采集的方法，例如豬瘟疫病檢測時，應(yīng)采取豬的淋巴結(jié)、全血等等各類結(jié)構(gòu)進行檢測以確定該疫病的起因。檢測口蹄疫時，則應(yīng)檢測水泡皮、淋巴結(jié)等結(jié)構(gòu)。

2.2 樣品具代表性

以檢測細(xì)菌的豬樣品為例，樣品選擇時應(yīng)選擇未經(jīng)過治療的、病狀極具代表性、病變情況尤為顯著的豬樣品；檢測病毒的豬樣品則應(yīng)采取極具普遍性的豬樣品；在檢測豬的并發(fā)癥時，應(yīng)選擇并發(fā)癥狀較為顯著的豬樣品。這樣的選擇方法會使得檢測結(jié)果較為合理且能說明問題。

2.3 采集時間適當(dāng)

采集過程中，對于采集的時間段亦有相關(guān)要求，應(yīng)根據(jù)采集樣品的特點合理化選擇豬樣品。例如在選擇檢測免疫抗體的豬樣品時，應(yīng)從注射疫苗的作用時間、疫苗類型等方面來全面考慮，用于分離病原體的豬樣品，則應(yīng)在病發(fā)時或癥狀較具代表性時方可達到最佳效果，病死的樣品更具實效性，應(yīng)在動物死的那刻立刻做采集處理。

2.4 無菌操作

假若樣品用于病原組織及血清的檢驗時，無菌操作是采樣過程中必須完成的一項重要操作，且參與采樣處理的各項設(shè)備都應(yīng)事先進行滅菌操作，用于尸體解剖檢驗的豬樣品，則應(yīng)在采樣處理完成后對其進行病理的深入研究，以保障采集樣品的可使用性，有效杜絕細(xì)菌、病毒等相關(guān)物質(zhì)的干預(yù)，提升檢測結(jié)果的準(zhǔn)確程度。

2.5 樣品需足量

由于檢測方法及物質(zhì)的不同，所需的豬樣品的質(zhì)量也存在較大差異，工作人員應(yīng)依據(jù)相關(guān)檢測內(nèi)容科學(xué)化確定其用量[2]。用量是否足量具有兩個檢測標(biāo)準(zhǔn)，一方面相關(guān)人員所收集的豬樣品數(shù)量需滿足實驗室檢測對于量的需求，另一方面豬樣品的采集數(shù)量盡可能留有剩余部分，因為采集數(shù)量的不足會導(dǎo)致采集難度的顯著性提高，且整個采集過程在人力、時間上的消耗遠(yuǎn)高于材料滿足時的情況[3]。

3 結(jié)束語

綜上所示，只有針對不同的檢測，選擇不同的采集樣品的方法，才能維護檢測結(jié)果的精確程度，對于疫病研究有所助益。

[1]張祖勇.常見動物病原學(xué)檢測樣品活體采集技術(shù)[J].貴州畜牧獸醫(yī),2016,40(1):55-56.

[2]王亞萍,鄧瓊,廖體萍.血清抗體監(jiān)測在豬疫病防控中的應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備,2017(2):191.

[3]孫美玲.貯存時間、濕度、銅源和添加劑來源對預(yù)混料中B族維生素穩(wěn)定性的影響[D].沈陽：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué),2016.