江蘇省牛羊布魯氏菌病初步調(diào)查

徐正軍，徐小艷，王相子，開(kāi) 妍，陳昌海，董永毅，張 毅

（1. 江蘇省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江蘇南京 210036；2. 中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032）

布魯氏菌病（Brucellosis，以下簡(jiǎn)稱布病）是由布魯氏菌屬病原菌引起的，以流產(chǎn)或睪丸炎為主要特征的人獸共患傳染病[1]，對(duì)人類健康和畜牧業(yè)生產(chǎn)都有嚴(yán)重危害[2]，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為必須報(bào)告的動(dòng)物疫病，被我國(guó)列為二類動(dòng)物疫病[3]。布病1886年首次在馬爾他島被發(fā)現(xiàn)[4]，曾遍布全世界[5]，目前主要在發(fā)展中國(guó)家發(fā)生和流行，在發(fā)達(dá)國(guó)家已被根除或得到有效控制。20世紀(jì)80年代布病在我國(guó)本已得到有效控制[6]，但20世紀(jì)90年代后，隨著畜牧業(yè)及運(yùn)輸業(yè)的快速發(fā)展，布病疫情呈持續(xù)上升趨勢(shì)[7]。

為做好布病防治工作，農(nóng)業(yè)部會(huì)同國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委印發(fā)了《國(guó)家布魯氏菌病防治計(jì)劃（2016—2020年）》，要求根據(jù)畜間和人間布病發(fā)生和流行程度，綜合考慮家畜流動(dòng)實(shí)際情況，采取整片防治推進(jìn)策略，對(duì)家畜布病實(shí)行區(qū)域化管理[8]。為了解江蘇省牛羊養(yǎng)殖、免疫、流動(dòng)、布病感染等情況，2017年1—5月在江蘇省開(kāi)展了畜間布病基本調(diào)查，從而為布病防治提供依據(jù)。

1 范圍與內(nèi)容

對(duì)江蘇省有牛羊存欄的所有縣（市、區(qū)）進(jìn)行調(diào)查。主要內(nèi)容包括牛羊養(yǎng)殖數(shù)量、場(chǎng)群分布，以及牛羊調(diào)入、布病免疫和布病感染等情況。

2 方法

對(duì)牛羊養(yǎng)殖、免疫和調(diào)入等情況，采用預(yù)先設(shè)定表格，由防疫人員組織登記的方法；對(duì)布病感染情況，采用抽樣監(jiān)測(cè)方法。

2.1 分類與統(tǒng)計(jì)

2.1.1規(guī)模場(chǎng) 牛存欄量≥20頭、羊存欄量≥100只的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）為規(guī)模場(chǎng)。以規(guī)模場(chǎng)為統(tǒng)計(jì)單位，1個(gè)縣（市、區(qū)）內(nèi)有多個(gè)分場(chǎng)的，仍按1個(gè)場(chǎng)群統(tǒng)計(jì)，分場(chǎng)跨縣（市、區(qū)）的，在各縣（市、區(qū)）分別統(tǒng)計(jì)。

2.1.2散養(yǎng)戶 牛存欄量＜20頭，羊存欄量＜100只的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）為散養(yǎng)戶。散養(yǎng)戶以行政村為單位統(tǒng)計(jì)。

2.1.3養(yǎng)殖小區(qū) 由多個(gè)養(yǎng)殖主體在統(tǒng)一建設(shè)的場(chǎng)所內(nèi)從事養(yǎng)殖活動(dòng)。養(yǎng)殖小區(qū)以小區(qū)為單位統(tǒng)計(jì)。

2.1.4 “公司+農(nóng)戶” 公司提供幼畜、飼料、獸藥、技術(shù)等，農(nóng)戶進(jìn)行飼養(yǎng)的合作模式。如公司負(fù)責(zé)提供幼畜，并統(tǒng)一組織防疫的，以公司為單位統(tǒng)計(jì)，否則按散養(yǎng)統(tǒng)計(jì)。

2.2 抽樣設(shè)計(jì)

以縣為單位組織實(shí)施分層隨機(jī)抽樣。按預(yù)期場(chǎng)群流行率0～10%，置信水平90%，可接受誤差10%的標(biāo)準(zhǔn)，在每縣（市、區(qū)）隨機(jī)抽取24場(chǎng)群（不足24場(chǎng)群的縣或市、區(qū)100%抽取），再按預(yù)期個(gè)體流行率0～10%，置信水平90%，可接受誤差10%的標(biāo)準(zhǔn)，在每個(gè)場(chǎng)群隨機(jī)抽取24個(gè)牛羊個(gè)體。

2.3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

2.3.1檢測(cè)方法 依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)》（GB/T 18646—2002），初篩采用虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBT），確診采用試管凝集試驗(yàn)（SAT）進(jìn)行布病抗體檢測(cè)。參照殷善述等[9]試驗(yàn)，用RBT、SAT方法檢測(cè)86份人工感染布病的綿羊陽(yáng)性血清，分別檢出陽(yáng)性62份和54份，計(jì)算出的敏感性（Se）分別為72.09%、62.79%，用RBT、SAT方法檢測(cè)95份健康山羊血清，結(jié)果均為陰性，計(jì)算出的特異性（Sp）均為100%，垂直試驗(yàn)的敏感性、特異性分別為45.27%、100%。

2.3.2結(jié)果判定 血清學(xué)確診為陽(yáng)性的未免疫動(dòng)物，判定為感染動(dòng)物；初篩為陽(yáng)性、確診為陰性的，30 d后重新采樣檢測(cè)，復(fù)檢陽(yáng)性的判定為感染動(dòng)物。

2.3.3流行率計(jì)算公式 表觀陽(yáng)性率（AP）為陽(yáng)性數(shù)占所有檢測(cè)數(shù)的百分比。真實(shí)流行率（TP）根據(jù)公式（1）計(jì)算；真實(shí)流行率的95%置信區(qū)間（95%CI）按公式（2）計(jì)算。其中，P為真實(shí)流行率；Z為標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布中概率0.05對(duì)應(yīng)的統(tǒng)計(jì)量，取值1.96，N為樣本數(shù)量。

3 結(jié)果

3.1 牛羊養(yǎng)殖情況

3.1.1牛 牛養(yǎng)殖以蘇北地區(qū)較多，以規(guī)模養(yǎng)殖為主。全省共存欄牛22.854 3萬(wàn)頭。其中：規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)存欄18.983 4萬(wàn)頭，占83.06%；散養(yǎng)牛3.152 6萬(wàn)頭，占13.79%；奶牛養(yǎng)殖小區(qū)存欄0.573 6萬(wàn)頭，占2.51%；“公司+農(nóng)戶”存欄0.144 7萬(wàn)頭，占0.64%（表1）。

表1 江蘇省各地級(jí)市牛養(yǎng)殖情況統(tǒng)計(jì)

3.1.2羊 羊飼養(yǎng)分布極不均衡，規(guī)模養(yǎng)殖和散養(yǎng)比重較為均衡。全省共存欄羊262.168 5萬(wàn)只。其中：規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)存欄137.564 6萬(wàn)只，占52.47%；散養(yǎng)羊124.078 8萬(wàn)只，占47.33%；養(yǎng)殖小區(qū)存欄0.348 6萬(wàn)只，占0.13%；“公司+農(nóng)戶”存欄0.176 5萬(wàn)只，占0.07%（表2）。

表2 江蘇省各地級(jí)市羊養(yǎng)殖情況統(tǒng)計(jì)

3.2 牛羊調(diào)入情況

全省牛羊以自繁自養(yǎng)為主，外地調(diào)入的較少。其中，牛調(diào)入來(lái)源為澳大利亞以及我國(guó)黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、山東、山西、河北、新疆、云南、浙江等省份（圖1），羊調(diào)入來(lái)源為內(nèi)蒙古、山東、安徽等省份（圖2）。調(diào)入牛羊多數(shù)來(lái)自我國(guó)布病防治一類地區(qū)。

圖1 江蘇省牛調(diào)入情況

圖2 江蘇省羊調(diào)入情況

3.3 布病免疫情況

本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)江蘇省也存在部分牛羊養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）實(shí)施布病免疫情況。其中，免疫牛5 208頭，來(lái)自連云港、徐州、蘇州、揚(yáng)州等4個(gè)市21個(gè)規(guī)模場(chǎng)和6個(gè)村的散養(yǎng)戶；羊5 107只，來(lái)自連云港、徐州、揚(yáng)州、淮安等4個(gè)市21個(gè)規(guī)模場(chǎng)和3個(gè)村的散養(yǎng)戶。

3.4 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)情況

3.4.1總體情況 共完成1 629場(chǎng)點(diǎn)54 851份樣品的牛羊布病檢測(cè)，表觀群體流行率和個(gè)體流行率分別為0.25%、0.05%，真實(shí)群體流行率和個(gè)體流行率分別為0.54%（95%CI：0.18%～0.90%）、0.12%（95%CI：0.09%～0.15%）。

3.4.2牛 共完成302場(chǎng)點(diǎn)、23 475份樣品的檢測(cè)，表觀群體流行率和個(gè)體流行率分別為1.32%和0.13%，真實(shí)群體流行率和個(gè)體流行率分別為2.93%（95%CI：1.01%～4.84%）和0.28%（95%CI：0.21%～0.35%）。其中：符合每場(chǎng)抽檢24份樣品要求的場(chǎng)點(diǎn)174個(gè)，樣品4 176份，表觀群體流行率和個(gè)體流行率分別為1.15%和0.10%，真實(shí)群體流行率和個(gè)體流行率分別為2.54%（95%CI：0.17%～4.91%）和0.21%（95%CI：0.07%～0.35%）；每場(chǎng)檢測(cè)低于24份樣品要求的場(chǎng)點(diǎn)53個(gè)，樣品801份，均為布病陰性；每場(chǎng)檢測(cè)高于24份樣品的場(chǎng)點(diǎn)75個(gè)，樣品18 498份，表觀群體流行率和個(gè)體流行率分別為2.67%和0.14%，真實(shí)群體流行率和個(gè)體流行率分別為5.89%（95%CI：0.50%～11.29%）和0.31%（95%CI：0.21%～0.35%）（表3）。檢出的4個(gè)布病陽(yáng)性場(chǎng)均為奶牛場(chǎng)，流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)其均無(wú)布病免疫和外地牛引進(jìn)情況，場(chǎng)內(nèi)個(gè)體表觀流行率分別為19.01%、8.33%、6.38%、8.33%，真實(shí)流行率分別為41.99%（95%CI：33.15%～50.82%）、18.41%（95%CI：2.69%～34.12%）、14.10%（95%CI：4.04%～24.16%）、18.41%（95%CI：2.69%～34.12%）（表4、圖3）。

表4 布病初步調(diào)查監(jiān)測(cè)陽(yáng)性情況

圖3 江蘇省布病陽(yáng)性場(chǎng)分布

3.4.3羊 共完成1 327場(chǎng)點(diǎn)、31 376份樣品的檢測(cè)。其中：符合每場(chǎng)抽檢24份樣品要求的場(chǎng)點(diǎn)1 060個(gè)，樣品25 440份，均為布病陰性；每場(chǎng)檢測(cè)低于24份樣品要求的場(chǎng)點(diǎn)176個(gè)，樣品1 821份，均為布病陰性；每場(chǎng)檢測(cè)抽檢高于24份的場(chǎng)點(diǎn)91個(gè)，樣品4 115份，均為布病陰性（表3）。

4 討論

患病動(dòng)物和帶菌動(dòng)物是布病的主要傳染源，感染動(dòng)物可長(zhǎng)期甚至終生帶菌[10]，通過(guò)糞便、尿液、母畜的陰道分泌物、流產(chǎn)胎兒、羊水、胎衣及公畜的精液等向外排出病菌，污染畜舍、飼料、飲水、排水溝及草場(chǎng)，然后傳播給其它動(dòng)物；人可通過(guò)飼喂、擠奶、剪毛、助產(chǎn)和處理流產(chǎn)物等導(dǎo)致感染。因此，布病防治必須監(jiān)測(cè)淘汰陽(yáng)性動(dòng)物。本次檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，牛羊布病真實(shí)群體流行率和個(gè)體流行率分別為0.54%（95%CI：0.18%～0.90%）、0.12%（95%CI：0.09%～0.15%），說(shuō)明江蘇牛羊布魯氏菌病感染總體水平較低，利于凈化。但個(gè)別場(chǎng)陽(yáng)性率較高，真實(shí)流行率高達(dá)41.99%（95%CI：33.15%～50.82%），應(yīng)加緊實(shí)施監(jiān)測(cè)并淘汰陽(yáng)性畜，以免造成擴(kuò)散。

表3 牛羊布病初步調(diào)查監(jiān)測(cè)結(jié)果匯總

由于執(zhí)行原因，檢測(cè)中出現(xiàn)了每場(chǎng)實(shí)際抽檢數(shù)量低于、等于和高于設(shè)計(jì)要求的不同情形，檢出的群體真實(shí)陽(yáng)性率分別為0，2.54%（95%CI：0.17%～4.91%），5.89%（95%CI：0.50%～11.29%），呈現(xiàn)隨著每場(chǎng)抽檢數(shù)量增多而增大的趨勢(shì)，因此布病監(jiān)測(cè)凈化和評(píng)估應(yīng)加大每場(chǎng)抽檢數(shù)量，以提高陽(yáng)性場(chǎng)群的檢出率。

牛羊養(yǎng)殖方面。江蘇省牛總存欄22.854 3萬(wàn)頭，數(shù)量不多，規(guī)模養(yǎng)殖占83.06%，規(guī)模化程度高。規(guī)模養(yǎng)殖具有防疫條件好的優(yōu)勢(shì)，且江蘇省具有持續(xù)多年開(kāi)展奶牛布病監(jiān)測(cè)的工作經(jīng)驗(yàn)，具有開(kāi)展布病監(jiān)測(cè)凈化的基礎(chǔ)和優(yōu)勢(shì)。相比而言，羊總存欄262.168 5萬(wàn)只，數(shù)量大，散戶養(yǎng)殖占47.33%，散戶養(yǎng)殖比例較高。散戶養(yǎng)殖防疫條件差，且羊的生產(chǎn)周期短，流動(dòng)性大，因此羊是布病監(jiān)測(cè)凈化的薄弱環(huán)節(jié)，也是重點(diǎn)和難點(diǎn)。江蘇省也曾有人接觸布病陽(yáng)性羊?qū)е赂腥镜那闆r[11]。本次檢測(cè)未檢出布病陽(yáng)性羊，主要原因可能在于方法的敏感性低和每場(chǎng)抽檢數(shù)量少有關(guān)。建議加大每場(chǎng)抽檢數(shù)量，群體規(guī)模較小或區(qū)域內(nèi)存欄總數(shù)小的，如群體規(guī)模在500只以下，縣（市、區(qū)）總存欄在20 000只以下，可以采用100%監(jiān)測(cè)淘汰陽(yáng)性的方法；群體規(guī)模較大或區(qū)域內(nèi)存欄總數(shù)大的，如群體規(guī)模在500只以上，縣（市、區(qū)）總存欄在20 000只以上，可以采用Cannon[12]提出的發(fā)現(xiàn)疫病的抽樣方法定期開(kāi)展疫病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估監(jiān)測(cè)，先篩選出陽(yáng)性群，再進(jìn)行100%監(jiān)測(cè)凈化。

活畜調(diào)運(yùn)方面。《國(guó)家布魯氏菌病防治計(jì)劃（2016—2020年）》要求嚴(yán)格限制活畜從高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)向低風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)流動(dòng)[8]。江蘇省雖屬于布病防治二類地區(qū)，但本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)仍有較多的來(lái)自內(nèi)蒙古、山東等高風(fēng)險(xiǎn)一類地區(qū)的牛羊調(diào)入情況。這不利于布病防治政策實(shí)施，建議有關(guān)部門(mén)和養(yǎng)殖者切實(shí)采取措施，杜絕此類事情的再次發(fā)生。

布病免疫方面。江蘇省作為布病二類地區(qū)應(yīng)執(zhí)行“牛羊原則上禁止免疫”[8]的政策，可能受相鄰的一類地區(qū)不同免疫政策的影響，調(diào)查發(fā)現(xiàn)了21個(gè)場(chǎng)、6個(gè)村的5 208頭奶牛和21個(gè)場(chǎng)、3個(gè)村的5 107只羊?qū)嵤┝瞬疾∶庖摺＿@不利于畜間布病凈化控制，建議有關(guān)部門(mén)加強(qiáng)監(jiān)管和宣傳引導(dǎo)，杜絕此類事件再次發(fā)生，已免疫的動(dòng)物應(yīng)禁止活畜移動(dòng)。

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