滸苔多糖的提取工藝研究

周秋梅 陳小燕 段定 曾華婷 陳洪

【摘 要】采取水提醇沉法探討滸苔中多糖的提取工藝，研究溫度、時間、料液比三因素對多糖提取的影響。通過單因素和正交試驗得到滸苔多糖提取最佳工藝組合為：溫度100℃，時間5h，料液比（g/ml）1：40。

【關鍵詞】滸苔多糖；提取工藝

中圖分類號： TQ461 文獻標識碼： A 文章編號： 2095-2457（2018）01-0051-002

【Abstract】The extraction process of polysaccharides from Enteromorpha prolifera was studied by water extraction and alcohol precipitation method.The effects of temperature，time and solid-liquid ratio on the extraction of polysaccharides were studied.The optimal combination of polysaccharides from Enteromorpha polysaccharides was obtained by single factor and orthogonal experiments as follows：temperature 100℃，time 5h，ratio of material to liquid（g/ml）1：40.

【Key words】Enteromorpha polysaccharides；Extraction process

滸苔（Enteromorpha）屬于綠藻門、綠藻綱、石莼目、石莼科滸苔屬藻類植物，是重要的經濟海藻，也是一種海洋中藥。滸苔在農業、食品、化工、醫藥等行業被廣泛應用[1]。充分開發利用豐富的滸苔資源是改善生態環境和海藻綜合利用的重要課題。滸苔多糖的提取方法有多種[2]，但水提醇沉法是多糖提取的傳統方法，該方法所使用的試驗設備簡單，操作方便，準確度高，成本低廉，一次性投入較小，容易實現工業化生產。本實驗中采用水提醇沉法探討了滸苔多糖的提取工藝，通過單因素和正交試驗，比較提取時間、料液比和溫度對多糖提取率的影響，確定了滸苔多糖提取的最佳工藝，為開發和利用滸苔多糖提供理論參考。

1 實驗部分

1.1 材料、儀器及試劑

材料：滸苔，浙江寧波，干燥野生滸苔。

試劑：葡萄糖、重蒸酚、95%乙醇、濃硫酸等。

儀器：AUY120型電子天平，SHZ-DⅢ型循環真空泵，UV-2012PCS紫外分光光度計，DF-1O1S型集熱式恒溫磁力攪拌器。

1.2 試驗方法

1.2.1 滸苔多糖提取工藝流程：

滸苔5.0g干燥粉碎→水提→抽濾得濾液→真空濃縮→加95%乙醇醇沉→抽濾得濾液→真空濃縮→滸苔多糖→用蒸餾水稀釋至料液比對應體積→澄清液（備用）

1.2.2 提取液多糖含量測定

多糖含量測定采用苯酚-硫酸法[3]。

以葡萄糖為標樣，以葡萄糖質量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線，用上法測定，得回歸方程為y=17.123x+0.0065，r=0.9997。

1.2.3 滸苔多糖提取率的測定及計算

取備用的澄清液1ml于10ml容量瓶中加蒸餾水定容，取1ml稀釋液，于490nm處測定其吸光度，根據以下公式計算出多糖提取率。式中：C為根據標準曲線回歸方程計算得到的樣品多糖濃度（mg/ml），V為提取液總體積（ml），M為滸苔質量（g），10為1ml提取液稀釋倍數，1000為mg與g的單位換算率。

多糖提取率=■×100%

2 結果與討論

2.1 滸苔多糖提取單因素實驗

2.1.1 溫度對滸苔多糖提取率的影響

料液比（g/ml）1：50，時間4h，探討提取溫度為60、70、80、90、100℃，5個不同水平對滸苔多糖提取率的影響。多糖提取率（%）分別為1.182，1.378，1.843，2.016，2.085。由此可知，多糖提取率隨著溫度的上升而增加，當溫度達到100℃時多糖提取率為2.085，此時提取率比60℃時提高了76.40%，可見溫度對多糖提取率有顯著的影響，溫度100℃時提取率最佳。隨溫度的增加，提取率雖有提高，但逐漸放緩，且溫度增加會增加成本。綜合考慮，本實驗選擇溫度（℃）80、90、100為正交試驗因素。

2.1.2 時間對滸苔多糖提取率的影響

料液比（g/ml）1：50，溫度100℃，探討提取時間（h）為1、2、3、4、5 五個不同水平對滸苔多糖提取率的影響。多糖提取率（%）分別為1.534，1.538，1.964，2.125，1.673。由此可知，提取時間在4h時提取率達到最大值2.125，此時提取率比1h時提高了38.53%；此后，隨時間的延長，多糖提取率呈下降趨勢，可能是高溫下長時間提取會造成多糖的分解，導致多糖提取率的減少，時間4h時提取率最佳。

2.1.3 料液比對滸苔多糖提取率的影響

溫度為100℃，時間為4h，探討料液比（g/ml）為1：20、1：30、1：40、1：50、1：60五個不同水平對多糖提取率的影響。多糖提取率（%）分別為1.671，1.801，1.646，2.011，1.78。由此可知，料液比（g/ml）1：50提取率最佳。

2.2 滸苔多糖提取的正交實驗結果

正交試驗是在單因素實驗的基礎上，選擇提取溫度（A）、時間（B）、料液比（C）為考察因素，以多糖提取率為指標，采用正交試驗法確定滸苔多糖提取的最佳工藝。

由表2可知，采用水提醇沉法浸提滸苔多糖，影響多糖提取率的因素主次順序依次為A（提取溫度）>B（提取時間）>C（料液比）。根據極差分析得到滸苔多糖提取最優方案為A3B3C1。

3 結論

影響多糖提取率的因素主次順序依次為提取溫度、提取時間、料液比，其中，提取溫度對滸苔多糖提取率的影響顯著。滸苔多糖最佳提取工藝為：提取溫度100℃，提取時間5小時，料液比（g/ml）1：40。

【參考文獻】

[1]單俊偉，劉海燕.滸苔的研究與資源化利用進展[J].現代農業科技，2016（15）：258-260.

[2]唐志紅，于志超.滸苔多糖超聲波提取工藝的研究[J].現代食品科技，2011，27（01）：56-59.

[3]張青，張天民.苯酚-硫酸比色法測定多糖含量[J].山東食品科技，2004（7）：17-18.