血清VILIP-1、NSE水平與缺血性腦卒中患者預后的關系

王浩,孫菊光

(南京中醫藥大學，南京 210023)

急性缺血性腦卒中是由多種因素引起患者腦動脈狹窄、閉塞或破裂,導致腦部血液供應障礙，進而出現腦組織內缺血引起細胞壞死，臨床主要表現為神經功能損傷[1]。急性缺血性腦卒中具有致殘率高、致死率高、預后差等特點[2]，早期診斷并評估患者病情，并制定針對性治療方案可有效改善患者病情，改善預后。目前臨床主要結合病史、體格檢查及影像學檢查等綜合診斷并判斷病情嚴重程度，可能會延誤治療最佳時機[3]。從血清學中尋找靈敏度高、特異性好的生化標志物簡便、快捷的輔助診斷急性缺血性腦卒中，對評估患者病情嚴重程度有重要價值。視錐蛋白樣蛋白1(VILIP-1)屬于神經元鈣傳感蛋白視錐蛋白/恢復蛋白家族成員，在腦部損傷及部分神經退行性疾病發病過程中有重要作用[4]。研究[5]認為，VILIP-1可早期診斷阿爾茲海默病，并可預測認知功能障礙發生情況。特異性烯醇化酶(NSE)是神經元標志性酶，腦組織受損后的神經元可釋放NSE入血，并與腦損傷嚴重程度密切相關[6]。2016年3月～2018年3月，測定血清VILIP-1、NSE水平，旨在探討其在急性缺血性腦卒中患者發病過程中的作用及其與預后的關系。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2016年3月～2018年3月我院收治的109例急性缺血性腦卒中患者為病例組，納入標準：①結合臨床癥狀和體征，CT或MRI檢查證實為急性缺血性腦卒中，并符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2010》[7]；②發病至入院時間≤7 d；③預計生存時間超過6個月。排除標準：①肝、腎功能障礙者；②入院前服用過其他可能影響本研究結果的藥物；③短暫性腦缺血發作；④既往有缺血性腦卒中病史；⑤急、慢性感染性疾病和自身免疫性疾病；⑥外傷所致缺血性腦卒中；⑦腦出血、顱內占位性病變、蛛網膜下腔出血等腦部疾病；⑧隨訪少于3個月。其中男65例、女44例，年齡53～79(62.9±8.7)歲。高血壓史23例，糖尿病史18例。根據入院時美國國立衛生研究院卒中量表(NIHSS)評分將患者分為輕度缺損組41例(NIHSS評分基0～7分)；中度缺損組35例(NIHSS評分7～15分)；重度缺損組33例(NIHSS評分>15分)。根據入院時腦梗死面積將患者分為腔隙性梗死組37例(顱腦MRI檢查腦梗死灶最大層面直徑<1.5 cm[9])；中等面積腦梗死組52例(梗死灶最大層面直徑1.5～5 cm)；大面積腦梗死組20例(梗死灶最大層面直徑>5 cm)。根據90 d后mRS評分將患者分為預后良好組73例(mRS評分0～2分)；預后不良組36例(mRS評分3～6分)。并于同期隨機選取30例健康體檢者為對照組，其中男18例、女12例，年齡47～80(63.8±7.1)歲。高血壓史5例，糖尿病史4例。病例組與對照組性別、年齡、高血壓史、糖尿病史比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究獲醫院倫理委員會批準，研究對象均簽署知情同意書。

1.2 神經功能損傷程度評定 采用NIHSS[8]對急性缺血性腦卒中患者入院時的神經功能缺損程度進行評定：NIHSS評分<7分計為神經功能輕度損傷，NIHSS評分7～15分計為神經功能中度損傷，NIHSS評分>15分計為神經功能重度損傷。

1.3 預后評定 采用改良的Rankin量表(mRS)對急性缺血性腦卒中患者90 d功能恢復情況進行評定，mRS 0～2分計為預后良好，mRS 3～6分計為預后不良[10]。

1.4 血清VILIP-1、NSE檢測 收集病例組入院時空腹肘靜脈血3 mL，并于3 000 r/min離心5 min，收集上清液置于-80 ℃環境下保存，留待檢測。采用酶聯免疫吸附法測定血清VILIP-1水平，嚴格按照試劑盒(美國BioVendor公司，生產批號：171867-04)說明進行操作；采用電化學發光法測定血清NSE水平，檢測儀器為羅氏全自動電化學發光免疫分析系統COBAS E601，嚴格按照試劑盒(羅氏診斷產品(上海)有限公司)說明進行操作。

2 結果

2.1 病例組與對照組血清VILIP-1、NSE水平比較 病例組與對照組血清VILIP-1水平分別為(9.38±1.56)、(1.02±1.46)μg/L，血清NSE水平分別為(35.58±2.24)、(3.96±1.85)ng/mL，兩組比較差異有統計學意義(t分別為29.246、78.992，P<0.001)。

2.2 不同神經功能損傷程度患者血清VILIP-1、NSE水平比較 神經功能輕度、中度、重度損傷者分別為41、35、33例，血清VILIP-1水平分別為(4.31±1.08)、(7.89±1.42)、(13.34±1.39)μg/L，三者間兩兩比較，P均<0.05；血清NSE水平分別為(8.22±2.79)、(21.03±2.35)、(46.51±2.54)ng/mL，三者間兩兩比較，P均<0.05。

2.3 不同腦梗死面積患者血清VILIP-1、NSE水平比較 腔隙性梗死、中等面積腦梗死、大面積腦梗死者分別為37、52、20例，血清VILIP-1水平分別為(3.27±1.52)、(6.93±1.09)、(14.58±1.46)μg/L，三者間兩兩比較，P均<0.05；血清NSE水平分別為(10.95±3.07)、(22.61±2.89)、(35.24±2.54)ng/mL，三者間兩兩比較，P均<0.05。

2.4 不同mRS評分患者血清VILIP-1、NSE水平比較 預后良好者73例，預后不良者36例，血清VILIP-1水平分別為(7.26±1.57)、(12.34±1.29)μg/L，血清NSE水平分別為(24.05±2.18)、(34.67±1.97)ng/mL，二者血清VILIP-1、NSE水平比較差異均有統計學意義(t分別為-16.819、-24.672，P均<0.05)。

2.5 血清VILIP-1、NSE對急性缺血性腦卒中預后的診斷價值 血清VILIP-1對急性缺血性腦卒中預后診斷的AUC為0.805，95%CI為0.720～0.891，此時VILIP-1截斷值為7.25 μg/L，靈敏度、特異度為0.85、0.81，準確度為0.76；NSE對急性缺血性腦卒中預后診斷的AUC為0.784,95%CI為0.698～0.870，此時NSE截斷值為20.61 ng/mL，靈敏度、特異度為0.79、0.86，準確度為0.75。

3 討論

研究[11]顯示，我國急性缺血性腦卒中的發病率可達120/10萬，每年發病人數約為200萬，患者致殘率約占75%，每年病死人數高達120萬，給患者及家屬帶來沉重的疾病負擔。目前對急性缺血性腦卒中的診斷主要依賴臨床癥狀和體征、CT或MRI等影像學手段，但研究[12]表明，約40%的患者無法通過影像學手段快速有效診斷，治療棘手。

VILIP-1屬于神經元鈣傳感蛋白視錐蛋白/恢復蛋白家族成員，是一種主要在腦部神經細胞表達的小相對分子質量胞質蛋白，通過與鈣離子結合而介導鈣平衡過程，并于鈣離子信號調控下發揮生物學功能。研究[13]認為，VILIP-1可作為腦部損傷和少數退行性疾病的潛在標志物。Groblewska等[14]研究發現，VILIP-1使tau蛋白聚集而產生神經毒性，并進一步破壞VILIP-1細胞，使其釋放至腦脊液和血液中。Kirkwood等[15]研究表明腦脊液中VILIP-1可預測阿爾茨海默病病情嚴重程度及評估認知功能損害情況。NSE是一種存在于神經組織及神經內分泌系統中的糖酵解特異性蛋白，在神經細胞分化及成熟過程中有重要作用，可在缺氧狀態下保護神經細胞免受損害，當神經組織的神經元水腫、變性甚至壞死后，NSE釋放至腦脊液并穿過血腦屏障進入血液循環系統。研究[6]表明，NSE參與了缺氧性腦病、癲癇持續狀態等腦損傷疾病的發生發展，并可作為判斷腦損傷嚴重程度及評估預后的重要指標。

本研究結果顯示，急性缺血性腦卒中患者血清VILIP-1、NSE水平高于健康體檢者，提示VILIP-1、NSE參與了急性缺血性腦卒中發病過程，與有關研究結果相似[3,4]，即急性缺血性腦卒中損傷腦組織神經元，導致VILIP-1和NSE釋放至腦脊液并進一步通過血腦屏障進入血液。NIHSS評分是評估腦損傷嚴重程度的重要指標，評分越高提示神經功能損傷越嚴重。本研究發現，神經功能中度和重度缺損患者血清VILIP-1、NSE水平高于輕度缺損患者，且重度缺損患者高于中度缺損患者，提示VILIP-1、NSE參與神經功能損傷過程，可作為評估急性缺血性腦卒中病情嚴重程度的重要標志物。此外，腦梗死面積亦是評估急性缺血性腦卒中嚴重程度的指標，梗死面積越大提示患者病情越嚴重。本研究中，中等面積和大面積腦梗死患者血清VILIP-1、NSE水平高于腔隙性腦梗死患者，且大面積腦梗死患者高于中等面積腦梗死患者，進一步證實VILIP-1、NSE可用于判斷急性缺血性腦卒中病情嚴重程度。

mRS評分用于評估患者治療后神經功能恢復狀況，評分越低表明患者預后良好，本研究結果顯示，治療90 d后，預后不良者血清VILIP-1、NSE水平高于預后良好者，提示VILIP-1、NSE可用于判斷急性缺血性腦卒中患者預后，VILIP-1、NSE水平越高，患者預后越差。采用ROC曲線下面積判斷VILIP-1、NSE對急性缺血性腦卒中預后的診斷價值，VILIP-1為7.25 μg/L時，此時的靈敏度、特異度、準確度分別為0.85、0.81、0.76，而NSE為20.61 ng/mL時，靈敏度、特異度、準確度分別為0.79、0.86、0.75，提示VILIP-1、NSE對急性缺血性腦卒中預后有較好的預測價值。

綜上所述，血清VILIP-1、NSE異常表達參與了急性缺血性腦卒中發病過程，且與患者腦損傷嚴重程度、預后密切相關，早期聯合檢測可作為預測急性缺血性腦卒中預后的重要標志物。