張三軍 鄭偉 陳奎 王艷
1.河南省駐馬店市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心; 2.河南省信陽(yáng)市衛(wèi)生監(jiān)督所
近年來(lái),豬病的混合感染越來(lái)越嚴(yán)重,筆者接診了一例豬瘟、偽狂犬與副豬嗜血桿菌混合感染的病例,臨床癥狀較典型,現(xiàn)將整個(gè)診治過(guò)程介紹如下。
2018年2月7日某養(yǎng)殖場(chǎng)帶病豬前來(lái)就診。主訴:該場(chǎng)存欄1000多頭,其中母豬120頭,育肥豬832頭,發(fā)病豬群主要為育肥豬。1月30日出現(xiàn)發(fā)病癥狀,截止就診已出現(xiàn)發(fā)病癥狀的豬有100多頭,死亡12頭,母豬有5頭出現(xiàn)流產(chǎn)。該批育肥豬在0日齡、7日齡分別滴鼻偽狂犬疫苗和胸腔注射支原體疫苗,24日齡、60日齡注射的豬瘟細(xì)胞凍干活疫苗4頭份/頭。
育肥豬表現(xiàn)精神沉郁、食欲不振、扎堆躺臥,體溫40℃左右,咳嗽、喘氣等呼吸道癥狀特別明顯,糞便時(shí)干時(shí)稀,有的病豬耳尖、四肢末端、會(huì)陰部等處有紫紅色出血點(diǎn)或斑,個(gè)別豬關(guān)節(jié)腫脹、腿瘸、死前有神經(jīng)癥狀;母豬出現(xiàn)一過(guò)性發(fā)熱、不分胎次的流產(chǎn),無(wú)意識(shí)的空嚼、鼻吻突有磨損性結(jié)繭現(xiàn)象。曾用氟苯尼考注射液和長(zhǎng)效土霉素注射液治療,連用3 d不見(jiàn)好轉(zhuǎn),然后改用頭孢噻呋粉針,使用板藍(lán)根注射液稀釋治療,效果不理想。
對(duì)病豬進(jìn)行了臨床剖檢,可見(jiàn)膝關(guān)節(jié)有粘稠灰白色液體流出;周身淋巴結(jié)出血、潰瘍,尤其頜下淋巴結(jié)較為典型;扁桃體出現(xiàn)壞死斑(如圖1),橫切扁桃體呈虎斑色;心包液增多、淡黃色,心臟表面呈現(xiàn)茸毛心狀(圖2);肝臟表面有纖維素樣滲出物和灰白色壞死點(diǎn)(見(jiàn)圖3);脾臟暗紫色,有纖維素樣滲出物及多量粉紅色壞死點(diǎn)(圖4);腎臟表面有少量針尖樣出血點(diǎn)和灰白色壞死灶;回盲口處有潰瘍?cè)睢?/p>

圖1 扁桃體出現(xiàn)壞死斑

圖2 心臟表面呈現(xiàn)茸毛心狀

圖3 肝臟表面灰白色壞死點(diǎn)

圖4 脾臟暗紫色,表面分布多量粉紅色壞死點(diǎn)
1.細(xì)菌分離鑒定。
(1)病料涂片染色鏡檢:無(wú)菌采集肝臟、肺臟病料組織,分別進(jìn)行革蘭氏和美藍(lán)染色。革蘭氏染色鏡檢可見(jiàn)革蘭氏陰性細(xì)小桿菌,呈多種形態(tài),從單個(gè)的球桿菌到長(zhǎng)的、細(xì)長(zhǎng)的、以至細(xì)絲狀的菌體。美藍(lán)染色鏡檢可見(jiàn)兩極濃染且有莢膜的小桿菌;
(2)細(xì)菌的分離培養(yǎng):無(wú)菌采集發(fā)病豬新鮮的肺臟、關(guān)節(jié)液、心血等病料,劃線接種于TSA固體培養(yǎng)基,置于5%的CO2培養(yǎng)箱,37℃培養(yǎng)24~48 h后觀察結(jié)果,可見(jiàn)圓形、光滑濕潤(rùn)、無(wú)色透明、直徑為0.5~1 mm的菌落。挑取上述單個(gè)菌落逐步純化培養(yǎng),將純培養(yǎng)疑似菌株分別接種于并進(jìn)行涂片,革蘭氏染色后在顯微鏡下觀察,細(xì)菌形態(tài)與組織觸片鏡檢中看到的一致;
(3)生化試驗(yàn):生化反應(yīng)結(jié)果符合副豬嗜血桿菌的生理生化特性(見(jiàn)表1)。

表1 分離菌生化試驗(yàn)結(jié)果
2.病原學(xué)檢測(cè)。采集部分扁桃體、淋巴結(jié)、肺臟、脾臟組織,放入U(xiǎn)型離心管,加生理鹽水、鋼珠經(jīng)組織搗勻儀(MM400)處理、凱特離心機(jī)(凱特TG16G)離心,取上清液送PCR室,采用熒光RT-PCR和熒光PCR方法檢測(cè),結(jié)果顯示豬瘟病毒核酸陽(yáng)性、偽狂犬病毒核酸陽(yáng)性。
根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化和實(shí)驗(yàn)室診斷確診為豬瘟、偽狂犬與副豬嗜血桿菌病的混合感染。
對(duì)發(fā)病豬立即隔離,按照國(guó)家有關(guān)規(guī)定處置。對(duì)于其他豬群緊急接種豬瘟和偽狂犬疫苗,在飼料中添加頭孢噻呋和黃芪多糖,飲水中添加電解多維,控制副豬嗜血桿菌和提高豬只的免疫力。
1.該豬場(chǎng)豬瘟和偽狂犬病的發(fā)生與該場(chǎng)豬瘟、偽狂犬免疫方案有著直接的關(guān)系。該豬場(chǎng)采取免疫方案會(huì)造成豬只育肥階段豬瘟、偽狂犬抗體滴度達(dá)不到要求,出現(xiàn)免疫空白。因此,根據(jù)當(dāng)前疫病流行趨勢(shì)和該豬場(chǎng)實(shí)際情況建議育肥豬在50 kg左右加強(qiáng)免疫一次豬瘟,免疫劑量適宜加大;35日齡和80日齡各加強(qiáng)免疫一次偽狂犬疫苗。
2.目前緊急接種是快速控制豬瘟和偽狂犬等病毒病的有效措施,雖然同時(shí)接種會(huì)造成豬瘟疫苗和偽狂犬疫苗之間出現(xiàn)相互干擾情況,對(duì)抗體滴度的有一定的影響,但對(duì)于豬場(chǎng)緊急控制疫病流行狀態(tài)、減少損害,這種影響可以忽略不計(jì)。
3.豬一旦感染偽狂犬病,偽狂犬病毒就會(huì)定植于豬的三叉神經(jīng)節(jié),造成豬只終身帶毒,不定時(shí)排毒;而豬瘟的發(fā)生與種豬帶毒有著密切的關(guān)系,因此豬場(chǎng)想要擺脫豬瘟、偽狂犬病的困擾,除采取合理的疫苗免疫,還需建立嚴(yán)格的生物安全措施,并開展動(dòng)物疫病凈化工作。
4.副豬嗜血桿菌屬于豬只的早期定居菌,單獨(dú)發(fā)病較少,常繼發(fā)于豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、偽狂犬等病毒病,因此做好豬瘟、藍(lán)耳病、偽狂犬等病毒病的免疫,是控制副豬嗜血桿菌病的有效措施。同時(shí)加強(qiáng)豬場(chǎng)飼養(yǎng)管理,減少各種應(yīng)激,必要時(shí)豬場(chǎng)可把副豬嗜血桿菌疫苗加入到免疫程序。由于副豬嗜血桿菌血清型較多,各血清型交叉保護(hù)差,所以選購(gòu)的疫苗要與豬場(chǎng)流行株相一致。