高危HPV陰性宮頸癌患者的臨床病理特征研究

陳倩，方繩權(quán)

（湖北省腫瘤醫(yī)院 婦瘤科，湖北 武漢 430079）

宮頸癌（cervical cancer，CC）是婦科最常見的惡性腫瘤。其中，浸潤癌多發(fā)于45～55歲，原發(fā)癌多發(fā)于30～35歲，對女性健康產(chǎn)生嚴(yán)重威脅。近年來CC發(fā)病率逐年升高，全球每年約50萬新發(fā)CC患者，給包括我國在內(nèi)的發(fā)展中國家CC患者家庭造成較重負(fù)擔(dān)[1]。臨床公認(rèn)CC和癌前病變的主要病因?yàn)楦呶Ｐ腿巳轭^瘤病毒（human papillomavirus，HPV）持續(xù)感染，故加大對高危型HPV感染情況監(jiān)測，對HPV陽性患者進(jìn)行有效干預(yù)，能從根本上降低CC發(fā)病率[2]。薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測是臨床上常用的篩查CC方法，提高宮頸上皮內(nèi)瘤變診斷的敏感性，降低假陰性率[3]。由于HPV感染是CC的主要原因，因而HPV-DNA檢測也是CC篩查的重要手段，但無法明確高危HPV陰性CC患者的發(fā)病機(jī)制，且高危HPV陰性CC患者的預(yù)后較差[4]。本研究對高危HPV陰性CC患者的臨床病理特征進(jìn)行探究，以期為后期臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2013年1月-2017年1月該院收治的1 123例CC患者的臨床資料。年齡為18～60歲，平均（43.28±8.37）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18周歲；②臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠期；②合并嚴(yán)重的心、肝、腎及肺功能障礙。

1.2 方法

1.2.1 采集標(biāo)本非月經(jīng)期內(nèi)采集3 d內(nèi)未進(jìn)行陰道沖洗、陰道內(nèi)給藥，且24 h內(nèi)無性生活的患者樣本。方法如下：使用窺器將子宮頸暴露，將專用的HPV子宮頸刷放在子宮頸口，然后輕輕順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)5圈，取出子宮頸刷放入已加入專用細(xì)胞保存液的取樣管內(nèi)保存。樣本在4℃保存，24 h內(nèi)檢測。

1.2.2 儀器和試劑專用HPV子宮頸刷、HPV-DNA提取試劑盒、醫(yī)用核酸分子快速雜交儀、HPV核酸擴(kuò)增分型檢測試劑盒、第2代雜交捕獲技術(shù)檢測試劑盒。

1.2.3 薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測采用Auto Cyte液基薄片制片機(jī)（美國Tripath Imaging公司）自動(dòng)制片，染色，并使用光學(xué)顯微鏡檢查。以TBS分類法作為診斷依據(jù)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)診斷：①正常范圍；②低度鱗狀上皮內(nèi)病變（low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）；③意義不明確的非典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamous epithelial cells of undefined significance，ASCUS）； ④鱗狀細(xì)胞癌；⑤高度鱗狀上皮內(nèi)病變（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）。

1.2.4 高危型HPV分型檢測使用醫(yī)用核酸分子快速雜交儀，并通過導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)對子宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行分型檢測，根據(jù)基因芯片上HPV分型的分布位置判斷HPV分型。高危HPV的13種型別檢測為任何一型即可診斷為高危型HPV陽性，未檢測到任何一型診斷為高危型HPV陰性。DNA分離和提取、PCR擴(kuò)增、導(dǎo)流雜交、酶標(biāo)顯色及判斷結(jié)果等操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。采用HC-Ⅱ法對高危型HPV陰性標(biāo)本進(jìn)行HPV-DNA檢測，熒光讀數(shù)與陰性測定值（RLU/CO）比值＜1.0診斷為高危型HPV感染陰性，≥1.0診斷為高危型HPV感染陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組高危型HPV患者的年齡構(gòu)成比較

兩組高危型HPV患者的年齡構(gòu)成比較，采用χ2檢驗(yàn)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。患者多發(fā)于36～50歲，且以腺癌為主。見表1。

2.2 兩組高危型HPV患者的病理類型比較

兩組高危型HPV患者腺癌比較，采用χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），高危型HPV陰性組患者腺癌比例高于高危型HPV陽性組患者。見表2。

2.3 兩組高危型HPV患者的臨床分期比較

兩組高危型HPV患者的臨床分期比較，采用χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），高危型HPV陰性組Ⅱb+Ⅲ-Ⅳ期比例高于高危型HPV陽性組。見表3。

表1 兩組高危型HPV患者的年齡構(gòu)成比較 例（%）

2.4 HPV-DNA檢測和薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測篩查價(jià)值比較

HPV-DNA檢測和薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測比較，該研究中1 123例CC患者的HPV-DNA檢測對高危HPV陰性CC患者的診斷敏感性和陰性預(yù)測值。見表4。

表2 兩組高危型HPV患者的病理類型比較 例（%）

表3 兩組高危型HPV患者的臨床分期比較 例（%）

表4 HPV-DNA檢測和薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測篩查價(jià)值比較 %

3 討論

CC的發(fā)生與HPV感染有密切相關(guān)性，HPV普遍存在于自然界，且有超過100種類型，但多數(shù)HPV病毒能通過人體免疫力清除，不會致病，僅少數(shù)HPV病毒可致癌[5]。依據(jù)HPV病毒的致病能力將其分為高危型和低危型，高危型HPV持續(xù)感染是造成CC的主要致病因素，因而清除高危型HPV感染對降低CC發(fā)生率有重要意義[6]。臨床篩查主要通過查找宮頸涂片中的異常細(xì)胞，宮頸細(xì)胞涂片的廣泛使用在很長一段時(shí)間內(nèi)被認(rèn)為是一種能成功篩選CC的方法，能降低其發(fā)病率[7]。但宮頸細(xì)胞圖片本身局限性較大，敏感性低，重復(fù)性差。已有研究指出[8]，HPV陰性患者仍然存在CC風(fēng)險(xiǎn)，RODRíGUEZ-CARUNCHIO等[9]通過HC-Ⅱ法對CC患者的HPV感染進(jìn)行檢測，陰性率為10.2%，提示筆者在臨床可采用HPV檢測對CC患者進(jìn)行篩查。

本研究結(jié)果顯示，由于子宮頸細(xì)胞染色體畸變、基因甲基化及p53基因突變等遺傳學(xué)變化而引起高危型HPV陰性CC患者發(fā)病的主要因素。隨著子宮頸疾病的不斷進(jìn)展，HPV病毒可能脫失，進(jìn)而造成HPV檢測結(jié)果呈陰性。臨床薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測的特異性較高，應(yīng)用于對高危型HPV陰性CC患者的篩查，若僅對HPV進(jìn)行檢測，可能會導(dǎo)致漏診的出現(xiàn)。但若與薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測聯(lián)合使用，可降低漏診率，提高檢測陽性率[11]。在本研究中筆者發(fā)現(xiàn)，臨床若患者經(jīng)HPV檢測為陰性，但其存在異常陰道流血、性交后出血及子宮頸表面柱狀上皮外移等體征或臨床癥狀異常時(shí)，應(yīng)聯(lián)合薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測對患者進(jìn)行篩查[12]。

綜上所述，HPV-DNA檢測能較好診斷高危型HPV陰性CC患者。應(yīng)加強(qiáng)對36～50歲HPV陰性的檢測，預(yù)防和降低CC的發(fā)病率、死亡率。

參 考 文 獻(xiàn)：

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