新生兒感染性肺炎患兒血清中Th17細胞相關細胞因子表達水平及意義

楊喜永 劉雅文 趙小燕 王珍 鄭錫銘

新生兒機體免疫功能不全，易受病原菌侵襲而發生各種感染，尤以新生兒感染性肺炎多見[1]。新生兒感染性肺炎發病快，潛伏期短，是新生兒死亡的重要原因，及時、準確的臨床診療及疾病監測對新生兒的救治非常重要[2]。各種病原體感染肺臟后可引起全身炎癥反應及抗炎反應，嚴重時可導致多器官衰竭甚至死亡，研究表明患兒發病時細胞因子變化的程度與預后關系密切[3]。輔助性T細胞17（Th17） 細胞作為一種新發現的免疫調節性細胞，能夠分泌IL-17、IL-22，在機體炎性反應中具有重要意義。IL-23能夠聯合IL-6刺激Th0細胞向Th17細胞轉化，進而分泌IL-17、IL-22等促炎因子。本研究采用ELISA法對我院新生兒科2015年1月～2016年12月收治的116例新生兒感染性肺炎住院患兒血清細胞因子水平進行檢測，以探討Th17細胞相關炎性細胞因子表達水平的變化及其臨床意義，現報道如下。

1 材料與方法

1.1研究對象選擇2015年1月～2016年12月我院新生兒科收治的新生兒感染性肺炎患兒116例，全部患兒均符合感染性新生兒肺炎診斷標準[4]，其中重癥患兒56例（重癥組），輕癥患兒60例（輕癥組）；男62例，女54例；早產兒17例，足月兒99例；年齡 1～28d，平均（12.23±2.12）d；體重 1.83～5.47kg，平均（3.86±0.28）kg。選擇我院同期健康新生兒30例作為對照組，男15例，女15例，年齡1～28d，平均（15.54±3.78）d；體重 2.65～6.22kg，平均（4.78±0.52）kg；排除患有心血管疾病、其他急性疾病史患兒。兩組新生兒年齡、性別、體重等一般資料比較無統計學差異（P＞0.05），具有可比性。研究獲得新生兒家長同意及我院醫院倫理委員會批準。

1.2方法清晨采集空腹肝素抗凝靜脈血3ml，1 500min離心10min，留取血清于-80℃冰箱中冷凍保存，統一待檢。肺炎恢復期（一般在病程的2～3周，患兒臨床癥狀明顯好轉，肺部體征消失）患兒重新留取血清待檢。采用ELISA法檢測血清IL-17、IL-22和IL-23的表達水平，檢測試劑盒由北京全式金生物技術有限公司提供，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.3統計學分析采用SPSS 22.0軟件對數據進行統計學分析，計量資料以±s表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；Pearson相關系數分析各檢測指標之間的相關性；各檢測指標與疾病嚴重程度及活動度的相關性采用Spearman相關分析。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達水平較對照組升高（P＜0.05）；重癥組顯著高于輕癥組，并且高于對照組（P＜0.05），見表 1。

表 1 患兒血清 IL-17、IL-22 和 IL-23 的表達（±s，ng/L）

表 1 患兒血清 IL-17、IL-22 和 IL-23 的表達（±s，ng/L）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與輕癥組比較，△P＜0.05

組別 n IL-17 IL-22 IL-23對照組 30 67.98±7.55 124.15±8.27 86.54±6.71患兒組 116 88.75±15.31* 151.94±14.51* 110.04±10.99*輕癥組 60 83.76±10.94* 146.04±9.65* 106.01±8.46*重癥組 56 94.11±16.47△*158.26±16.18△*114.35±11.80△*

2.2恢復期患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達經臨床治療后，恢復期患兒IL-17、IL-22和IL-23的表達水平較急性期有所降低，但其表達水平仍高于對照組，恢復期IL-22的降低差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 恢復期患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達（±s，ng/L）

表2 恢復期患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達（±s，ng/L）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與患兒組比較，△P＜0.05

對照組 30 67.98±7.55 124.15±8.27 86.54±6.71患兒組 116 88.75±15.31 151.94±14.51 110.04±10.99恢復期 116 73.73±1.72△ 141.79±14.49*96.46±10.59*△

2.3患兒血清IL-17、IL-22和IL-23相關性分析患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達之間存在顯著正相關（r=0.677、0.632、0.740，P=0.000），相關性分析見圖1。

2.4患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達與肺炎嚴重程度及活動度相關性分析Spearman相關分析發現血清IL-17、IL-22和IL-23表達水平與肺炎嚴重程度存在正相關（r=0.675、0.538、0.523，P＜0.05）。血清中IL-17、IL-22和IL-23表達水平與患兒血清CRP、ESR表達水平存在正相關（r=0.437、0.358、0.561、0.539、0.521、0.411，P＜0.05），見表 3。

圖1 患兒血清IL-17、IL-22、IL-23相關性分析

表3 患兒血清IL-17、IL-22和IL-23與肺炎的相關性分析

3 討論

新生兒感染性肺炎的免疫學病理生理變化機制十分復雜，患兒對不同病原體可產生不同的免疫應答。感染性肺炎患兒體內存在免疫功能紊亂，特異性抗體對疾病恢復起一定作用，但過度的免疫反應往往引起更加嚴重的臨床癥狀及肺損傷[4]。因此患兒肺炎的發生除與嚴重的病原體感染有關外，在整個致病過程中起重要作用的是人體防御機制的過度激活和炎性細胞因子的大量釋放。

IL-17、IL-22作為Th17細胞分泌的主要細胞因子，在機體炎性反應中具有重要意義。IL-17、IL-22可以促進T 細胞的活化，同時刺激上皮細胞、內皮細胞、成纖維細胞產生如IL-6、IL-8、粒細胞-巨噬細胞刺激因子（GM-CSF）和化學增活素及細胞黏附分子 1（cellular adhesion molecule 1，CAM-1）等多種細胞因子，從而導致炎癥的產生[5，6]。同時IL-17是T細胞誘導的炎癥反應早期啟動因子，可以通過促進釋放前炎性細胞因子來放大炎癥反應。IL-17與受體結合后，可通過MAPK 激酶途徑和NF-kB途徑發揮其生物學作用[7，8]。IL-23作為IL-12家族的新成員，通過形成IL-23/IL-17信號通路可以促進CD4+T細胞向輔助性T細胞17（Th17）細胞分化，維持Th17細胞穩定和促進Th17細胞增殖、分化，維持及促進Th17 細胞生成 IL-17、IL-17F、IL-22、IL-6、腫瘤壞死因子-α及趨化因子C-C motif等，參與及放大炎癥性疾病的發生和發展；同時IL-23通過自分泌方式作用于樹突狀細胞和巨噬細胞誘導巨噬細胞分泌產生多種促炎因子[9～14]。

本研究中新生兒感染性肺炎患兒血清IL-17、IL-22和IL-23表達水平明顯高于對照組；尤其是重癥患兒組顯著高于對照組，與輕癥患兒組比較也明顯升高。患兒經治療后，恢復期血清IL-17、IL-22和IL-23表達水平較急性期降低，雖然IL-22表達差異無統計學意義，但表明血清IL-17、IL-22和IL-23 的表達水平與患兒病情有關。相關性分析發現，患兒血清IL-17、IL-22和IL-23相互之間存在顯著正相關，與文獻報道結果相一致[11]，表明在患兒肺炎的發生發展過程中Th17細胞相關細胞因子存在相互作用，可以同時促進機體的炎癥反應。Spearman相關分析發現患兒血清IL-17、IL-22、IL-23的表達水平與患兒肺炎嚴重程度存在正相關。同時，患兒血清IL-17、IL-22和IL-23表達水平與患兒血清CRP及ESR的表達水平也存在一定的正相關，血清CRP及ESR的表達水平與疾病活動度密切相關，表明患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達水平與患兒肺炎疾病活動度存在正相關。

綜上所述，Th17細胞相關細胞因子（IL-17、IL-22和IL-23）在新生兒感染性肺炎患兒血清中存在差異表達，可做為患兒肺炎嚴重程度及疾病活動度的臨床監測指標，但其具體免疫機制尚不明確，有待進一步研究。

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