外周注射Ghrelin對非洲雛鴕鳥攝食的影響

王俊　楊杰　王家鄉

摘要：為了研究Ghrelin對非洲雛鴕鳥攝食量的影響，給非洲雛鴕鳥的生長發育及飼養管理提供理論依據，試驗選取16羽45日齡非洲雛鴕鳥，平均體重（5.5±0.8） kg，按照雌雄各半的原則隨機分成4組（每組2個重復，每個重復2羽）。采用頸部皮下注射不同濃度Ghrelin（0 μg/kg、10 μg/kg、50 μg/kg、100 μg/kg）后，通過檢測食物容器內剩余食物及水的量，觀察外周應用Ghrelin對非洲雛鴕鳥攝食的影響。試驗期7 d，注射劑量為1 μL/羽。結果顯示，Ghrelin能夠增加非洲雛鴕鳥的攝食及飲水量。

關鍵詞：非洲雛鴕鳥；Ghrelin；攝食；飲水

中圖分類號：S829.9 文獻標識碼：A 文章編號：1007-273X（2018）04-0005-02

Ghrelin是由日本科學家Kojima等[1]于1999年從大鼠胃組織中提取得到的一種含28個氨基酸殘基的多肽，能夠促進生長激素（Growth hormone，GH）的釋放。除此之外，Ghrelin在動物攝食、能量代謝、胃腸功能、生殖和免疫等方面也發揮作用[2]。但Ghrelin調節攝食具有種屬差異性。研究發現，給大鼠腦室及腹腔注射Ghrelin均會增加其對食物的需求，表現明顯的攝食行為，人血清中Ghrelin含量在進餐前后呈現前高后低的變化趨勢，也說明了Ghrelin具有促進攝食的功能[3，4]。Ghrelin對禽類攝食的調節較哺乳動物復雜，主要受注射劑量和注射方式等影響。有研究證實，給雛雞腦室注射Ghrelin，或者給預先空腹幾小時后的雛雞腦室注射Ghrelin，均可抑制雛雞對食物的攝入[5]，這與哺乳動物完全不同。Ghrelin對非洲雛鴕鳥的攝食有何影響，到目前為止尚未見相關報道。本研究采用頸部皮下注射不同濃度Ghrelin后， 通過檢測食物容器內剩余食物及水的量，觀察外周應用Ghrelin對非洲雛鴕鳥攝食的影響，旨在為非洲雛鴕鳥的生長發育提供新的理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物 選取健康的45 d非洲雛鴕鳥為試驗材料，平均體重（5.5±0.8） kg，隨機分為4組（每組2個重復，每個重復2羽），雌雄不限，均來自于長江大學鴕鳥研究所。

1.1.2 試驗基礎日糧 試驗過程使用自配育雛料，主要由青菜配合肉用仔雞前期配合飼料，飼料采用荊州海大飼料有限公司的產品。

1.1.3 試驗試劑 非洲鴕鳥Ghrelin， GSS（Octanoyl）FLSPEYKKIQKQKDPKKPTTKLHC由上海強耀生物科技有限公司合成.

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設計 通過頸部皮下注射不同濃度外源性Ghrelin，其濃度分別為0 μg/kg（對照組）、10 μg/kg、50 μg/kg、100 μg/kg，用生理鹽水稀釋，注射劑量為1 μL/羽，注射時間為每天上午8：00，連續注射6 d，于第7天上午8：00取材。

1.2.2 飼養管理 整個飼養階段在長江大學鴕鳥研究所進行，為避免影響試驗效果，雛鴕鳥采用分欄飼養。每天定時給料，具體為8：00、11：00、14：00、17：00四個時間段各飼喂一次，記錄每天總采食量。在試驗開始前，對鴕鳥舍全場進行全面徹底噴霧式消毒，在試驗期間，嚴格按照長江大學鴕鳥研究所消毒程序進行。

1.2.3 攝食和飲水的計算 試驗開始前對雛鴕鳥測定體重，測定體重前禁食12 h，試驗過程中，記錄每天攝食量和飲水量，至試驗第7天時計算日均攝食量，并再次測定雛鴕鳥體重。

1.3 統計分析

獲得的全部數據用SAS數據處理軟件進行統計分析。所得數據以平均數±標準差表示，通過t檢驗法比較各組間的差異顯著性。P<0.05為差異顯著。

2 結果與分析

從表1中可以看出，當頸部皮下注射不同濃度的Ghrelin后，非洲雛鴕鳥的攝食量和飲水量都增加，且與對照相比差異顯著（P<0.05），而體重雖然有所增加，但差異不顯著（P>0.05），以上結果說明Ghrelin能夠促進非洲雛鴕鳥的攝食和飲水，且呈劑量性增加。

3 小結與討論

Ghrelin調節攝食具有種屬差異性。許多研究表明，Ghrelin具有促進哺乳動物攝食的功能。檢測人類血清中Ghrelin的含量，發現血清中Ghrelin水平在餐前升高和餐后降低，進一步證明了Ghrelin是一種攝食的引發劑[4]。而Furuse等[5]、Saito等[6]在給新生雞的腦室內注射雞Ghrelin或人Ghrelin后，發現新生雞的攝食行為明顯下降。Shousha 等[7]給日本鵪鶉腦室內注射Ghrelin，發現結果與Ghrelin對雞的作用一樣，也導致其食欲下降，但是當他們給日本鵪鶉腹腔注射Ghrelin時，發現Ghrelin對日本鵪鶉食欲的影響則與注射劑量有關，大劑量注射時，可導致日本鵪鶉食欲下降；小劑量注射時可刺激食欲。Cummings等[4]研究發現，當給雞靜脈內注射雞Ghrelin 1 h后（1 nmol/100 g體重），雞的食欲下降。然而，Kaiya等[8]研究發現，當給雞靜脈內注射雞Ghrelin 2 h后（600 pmol/100 g體重），其食欲卻沒有改變。他們對產生這種現象的原因進行分析，結果認為這可能與雞的品種有關。本研究發現，非洲雛鴕鳥頸部皮下注射不同濃度的Ghrelin ，能夠促進其攝食和飲水，且呈劑量性增加，這與哺乳動物一致，而與雞和鵪鶉不同，這進一步說明了Ghrelin 調節攝食具有種屬差異性。Ghrelin對非洲鴕鳥攝食的影響機制還有待于進一步研究。

參考文獻：

[1] KOJIMA M，HOSODA H，DATE Y，et al. Ghrelin is a growth hormone-releasing acylated peptide from stomach[J].Nature，1999，402：656-660.

[2] SOARES J B，LEITE-MOREIRA A F. Ghrelin，des-acyl ghrelin and obestatin：three pieces of the same puzzle[J].Peptides，2008，29（7）：1255-1270.

[3] 雷治海.Ghrelin 研究進展[J].畜牧與獸醫，2005，37（5）：54-57.

[4] CUMMINGS D E PURNELL J Q，FRAYO R S，et al.A preprandial rise in plasma ghrelin levels suggests a role in meal initiation in humans[J].Diabetes，2001，50：1714-1719.

[5] FURUSE M，TACHIBANA T，OHGUSHI A，et al. Intracerebrovent- ricular injection of ghrelin and growth hormone releasing factor inhibits food intake in neonatal chicks[J].Neurosci Lett，2001，301：123-126

[6] SAITO E S，KAIYA H，TACHIBANAT T，et al. Inhibitory effect of ghrelin on food intake is mediated by the corticotropin-releasing factor system in neonatal chicks[J].Regul Pept，2005，125：201-208.

[7] SHOUSHA S，NAKAHARA K，KOJIMA M，et al. Different effects of peripheral and central ghrelin on regulation of food intake in the Japanese quail[J].Gen Comp Endocrinol，2005，141（2）：178-183.

[8] KAIYA H，SAITO E S，TACHIBANA T，et al. Changes in ghrelin levels of plasma and proventriculus and ghrelin mRNA of proventriculus in fasted and refed layer chicks[J].Domest Anim Endocrinol，2007，32：247-259.