減肥保健品非法添加3種化學(xué)藥物的TLC—Micro FTIR檢測

馬姣　胡婭琳　趙益?zhèn)b　許鳳

摘要：利用薄層色譜（TLC）與顯微傅里葉變換紅外光譜（Micro FHR）聯(lián)用技術(shù)檢測減肥保健品中非法添加酚酞、西布曲明、芬氟拉明3種組分。供試品用甲醇超聲提取，以硅膠GFzu鋁合金薄層板為固定相，以氯仿一甲醇一氨水（11：1：0.12）為展開劑，在紫外燈254nm下檢視，薄層色譜法（TLC）快速初篩，顯微傅里葉變換紅外光譜（Micro FTIR）進(jìn)行定性檢測。結(jié)果顯示在隨機(jī)抽取的9批供試品中，5批檢測到酚酞，7批含有西布曲明，2批含有芬氟拉明。所建立的方法專屬性強(qiáng)、靈敏度高，可以作為該類保健品非法添加酚酞、西布曲明、芬氟拉明的檢測方法。

關(guān)鍵詞：薄層色譜法；顯微傅里葉變換紅外光譜法；酚酞；西布曲明；芬氟拉明

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1674-5124（2018）05-0053-05

0引言

減肥保健品是隨著審美觀念的變化衍生出來的一種瘦身產(chǎn)品，因其快速的減肥效果受到很多人尤其是女性的喜愛。但是有很多對人體有害的減肥產(chǎn)品充斥著市場，讓減肥保健品市場魚龍混雜。減肥產(chǎn)品非法添加物中酚酞、西布曲明、芬氟拉明（結(jié)構(gòu)如圖1所示）因其減肥效果好，是一些常見的添加物。酚酞屬刺激劑，用于慢性便秘，長期使用可損害腸神經(jīng)系統(tǒng)，且很可能是不可逆的；西布曲明為非苯丙胺類食欲抑制劑，通過抑制人的食欲，達(dá)到減肥的效果，但會(huì)增加嚴(yán)重的心腦血管不良事件；芬氟拉明為苯丙胺類食欲抑制藥，會(huì)導(dǎo)致心臟瓣膜病變等不良反應(yīng)。故減肥保健品非法添加化學(xué)藥物的行為不僅違反了食品衛(wèi)生法規(guī)，而且嚴(yán)重危害人體健康。

目前，減肥保健品中非法添加西藥的常用檢測方法有薄層色譜法（TLC）液相色譜法（HPLC）、液相色譜一質(zhì)譜法（HPLC-MS），表面增強(qiáng)拉曼光譜法（SERS）等。本實(shí)驗(yàn)中，薄層色譜方法作為初篩手段，簡單快速，再聯(lián)用顯微傅里葉變換紅外光譜的高靈敏度、高專一性對非法添加藥物快速檢測。

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器與試劑

顯微傅里葉變換紅外光譜儀NICOLET iN10（Thermo SCIENTIFIC）；硅膠GF₂₅₄鋁合金薄層板（德國默克公司）；超聲波清洗儀UIP50（南京壘君達(dá)超聲電子設(shè)備有限公司）：高速臺(tái)式離心機(jī)TGL-16（上海醫(yī)用分析儀器廠）。

酚酞對照品（A，批號：100102）、西布曲明對照品（B，批號：100624）、鹽酸芬氟拉明對照品（c，批號：0073-9501）：均購自中國藥品生物制品檢定所。實(shí)驗(yàn)中所用的9批減肥保健品均購于市場：其他試劑均為分析純。

對照品溶液和混合對照品溶液的制備：分別精密稱定A、B、C 3種對照品適量，加入甲醇溶解、超聲5 min，制成濃度為1 mg/mL的A溶液、2mg/mL的B溶液和5 mg/mL的C溶液作為對照品溶液和同等濃度的混合對照品溶液。

供試品溶液的制備：取膠囊劑10粒或袋泡茶4包，稱取內(nèi)容物約1/10置于10mL容量瓶中，加入5mL甲醇振搖、超聲10min后，離心5min（4000dmin），取上清液作為供試品溶液。

1.2實(shí)驗(yàn)條件

以硅膠GF搿鋁合金薄層板為固定相，以氯仿一甲醇一氨水（11：1：0.12）為展開劑，點(diǎn)樣量為4μL，飽和5 min后，展開、取出晾干，在紫外燈254 nm下檢視定位。再將TLC板上對照品斑點(diǎn)刮下，放在2 mL的離心管中用0.5mL的甲醇溶解，超聲5min、高速離心3～5 min，取上清溶液放在離心管中室溫?fù)]干，然后放在金板上進(jìn)行顯微紅外光譜檢測。采集模式：反射，檢測條件：液氮冷卻后檢測，采集時(shí)間：12 s，掃描：64次，光譜分辨率：8 cm^-1。數(shù)據(jù)處理軟件為OMNIC工作站和origin6.1。

2結(jié)果與分析

2.1對照品TLC及Micro FTIR測定

用微量進(jìn)樣器在硅膠GF搿鋁合金薄層板上點(diǎn)對照品溶液及對照品混合溶液各4μL，按1.2節(jié)下實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行測定。再取極少量的酚酞、西布曲明、芬氟拉明對照品粉末放在金板上，進(jìn)行顯微紅外光譜檢測。結(jié)果如圖2（a）～圖2（d）所示。

由圖2（a）可知，酚酞、西布曲明和芬氟拉明3種成分在本實(shí)驗(yàn)色譜條件下分離較好。分析圖2（b）～圖2（d）可知，對照品粉末與刮板甲醇提取后的對照品紅外譜圖峰形、峰位基本一致。圖2（b）中3 289.50cm^-1處的吸收峰，說明分子中-OH的存在：1 718.24，1 216.52，1 123.64 cm^-1的吸收峰，說明分子中苯甲酸酯的存在；1 595.68，1 509.50，1 460.46，1 170.73，1 106.82 Cm^-1的吸收，說明分子中有與取代基共軛的苯環(huán)存在：圖2（c）中3 333.0 cm^-1吸收峰，說明分子中含有結(jié)晶水；2921.5 cm^-1吸收峰，說明環(huán)丁基的存在；1 566.0，1 414.5，1 078.9，1 017.6，793.3.0cm^-1吸收峰，說明氯苯基的存在；2 361.3，1 649.5，1 335.0cm^-1吸收峰，說明是叔胺鹽。圖2（d）中2951.5，2721.6，2479.4，2389.3，1452.8，1 334.5cm^-1吸收峰，說明分子為仲胺鹽；15879，、894.9，795.5cm^-1吸收峰，說明間位取代苯的存在；1 203.0，1118.4，1073.5cm^-1吸收峰，說明三氟代物的存在。

2.2 TLC及Micro FTIR最低檢測限考察

用微量進(jìn)樣器在硅膠GF₂₅₄鋁合金薄層板上點(diǎn)1.1節(jié)下的對照品溶液，酚酞和西布曲明的點(diǎn)樣量分別為1，2，3，4μL，芬氟拉明的點(diǎn)樣量分別為0.5，1.0，1.5，2μL，按1.2節(jié)下的TLC條件檢測，結(jié)果酚酞在1μg時(shí)可以檢出，西布曲明在2μg時(shí)可以檢出，芬氟拉明在2.5μg時(shí)可以檢出。將TLC板上對照品斑點(diǎn)刮下，取甲醇提取揮干后的粉末放在金板上進(jìn)行顯微紅外光譜檢測。結(jié)果酚酞和西布曲明在2μg時(shí)可以檢出，芬氟拉明在2.5μg時(shí)可以檢出。由此說明本實(shí)驗(yàn)條件下，TLC法及Micro FTIR方法靈敏度均較高。

2.3真實(shí)樣品檢測

2.3.1TLC檢測

用微量進(jìn)樣器取1.1節(jié)下的對照品混合溶液及1-9號供試品溶液各4μL點(diǎn)于硅膠GF₂₅₄鋁合金薄層板上，按1.2節(jié)下的檢測條件檢測，結(jié)果如圖3所示。

由圖可知，由比移值和斑點(diǎn)顏色初步判定供試品1，2，3，6，7，8批次含有酚酞、供試品1-9批次含有西布曲明、供試品2，3，5，8，9批次含有芬氟拉明。

2.3.2 Micro VrIR檢測

薄層色譜方法雖然簡單快速，但定性能力有限，易出現(xiàn)假陽性結(jié)果，因此只能作為初篩手段。與常規(guī)紅外光譜相比，顯微傅里葉變換紅外光譜靈敏度高，可以實(shí)現(xiàn)痕量樣品的分析：采用溴化鉀壓片法會(huì)出現(xiàn)水的吸收峰，還會(huì)使譜圖變形，而Micro FTIR技術(shù)分析時(shí)不需要添加任何稀釋劑，能反映樣品的本質(zhì)光譜。將圖3中對照品的斑點(diǎn)及相同比移值處供試品中疑似含有非法添加組分的斑點(diǎn)刮下，提取處理后取其少量粉末進(jìn)行顯微紅外測定。結(jié)果如圖4～圖6所示。

由圖4分析6個(gè)批次供試品的顯微紅外譜圖，在供試品1，2，3，7，8的譜圖中，幾個(gè)特征峰包括（V_OH、V_C=O、Vc_C-O-C、V_C=C）的峰位、峰形基本上與酚酞刮板對照品的顯微紅外譜圖一致，而供試品6無酚酞特征峰，說明其不含酚酞組分。

由圖5分析9批供試品的顯微紅外譜圖，在供試品1，2，3，4，7，8，9顯微紅外譜圖中，特征峰及相關(guān)峰（V_CH3、V_C-N、V_C=C、β_=C-H、γ_=C-H）的峰位峰形基本上與西布曲明刮對照品的顯微紅外譜圖一致，而供試品5、6無西布曲明特征峰，說明其不含西布曲明組分。

由圖6分析2，3，5，8，9等5個(gè)批次供試品的顯微紅外譜圖，供試品5，9幾個(gè)特征峰（仲NH₂⁺伸縮、V_CH3、V_C=C、C_C-N）的峰位、峰形與芬氟拉明刮板對照品的顯微紅外圖譜基本一致，認(rèn)為在供試品5，9中非法添加芬氟拉明，2，3，8號供試品均無相關(guān)特征峰，說明不含鹽酸芬氟拉明。

3結(jié)束語

在進(jìn)行顯微傅里葉變換紅外光譜檢測時(shí)，要保證前處理方法的一致性，即需要在相同的條件下將TLC薄層板上的對照品和樣品斑點(diǎn)刮下、提取和測定，否則無可比性。另外，掃描不同樣品區(qū)域時(shí)出現(xiàn)的吸收峰個(gè)別部位略有差別，需要多次測定取平均值。

本實(shí)驗(yàn)采用薄層色譜一顯微傅里葉變換紅外光譜聯(lián)用技術(shù)對減肥保健品中非法添加的酚酞、西布曲明、芬氟拉明進(jìn)行快速檢測，在被檢測的9批供試品中，5批供試品檢測出非法添加酚酞，7批供試品非法添加西布曲明，2批供試品非法添加芬氟拉明。此方法專屬性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確性好，適用于對該類化合物的快速檢測。

（編輯：徐柳）