黔產野生水芹總黃酮提取率的比較

吳娜怡郁 郭曉青 陳曉靚 羅顯華 代甜甜

摘要[目的]選取黔產野生水芹（下文簡稱水芹），比較不同提取方法下水芹總黃酮提取率的差異，考察水芹總黃酮最佳提取方法。[方法]以65%乙醇為溶劑，采用水浴、索氏、微波、超聲4種提取方法分別提取水芹中的總黃酮，利用紫外-可見分光光度法測定總黃酮含量。[結果]采用水浴、超聲、微波、索氏提取出的總黃酮含量分別為0.052 5、0.057 1、0.066 1、0.027 6 mg/g，水芹總黃酮的較佳提取方法為水浴、超聲、微波。[結論]從時間成本、方法簡便、提取物含量等因素綜合考慮，建議使用微波提取。

關鍵詞黔產野生水芹；總黃酮；提取率

中圖分類號S647文獻標識碼A文章編號0517-6611（2018）05-0189-02

Abstract[Objective] The wild water dropwort in Guizhou（hereinafter referred to as water celery） was taken as material， the extraction yield of different extraction methods for water celery was compared， and the optimal total flavonoids extraction method of water celery was studied. [Method] The total flavonoids of water celery was extracted by four extraction methods like water bath， Soxhlet， microwave and ultrasonic， with ethanol as solvent， and the total flavonoids content was determined by using ultravioletvisible spectrophotometry. [Result] The flavonoids contents of water celery extracted by water bath， ultrasonic， microwave and Soxhlet were 0.052 5， 0.057 1 and 0.066 1 and 0.027 6 mg/g， respectively， among them the better extraction methods of total flavonoids from water celery were water bath， ultrasonic and microwave. [Conclusion] Comprehensive considering in aspects of time， extract content and method， the flavonoids contents of water celery shoud be extracted by using microwave extraction method.

Key wordsWild water dropwort in Guizhou；Flavonoids；Extraction rate

水芹[Oenanthe javanica（Bl.）DC.]又名小葉芹、水芹菜、野芹等，一般生長在低濕洼地、淺水沼澤與河流岸邊[1]。它屬傘形科多年生宿根草本水生植物，莖細長，中空，具有匍匐性，各節間均能生根形成新株，是我國傳統特色水生蔬菜的種類[2-3]。目前，關于水芹中總黃酮提取率的研究鮮見報道，而對水芹中總黃酮提取率的比較研究具有一定的實踐意義。筆者選擇貴州省野生水芹，采用水浴、索氏、微波、超聲這4種提取方法分別提取了水芹中的總黃酮，并比較了總黃酮含量的提取率，以期找出最佳提取方法。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1植物材料。

水芹采自貴州省貴陽市烏當區馬場。

1.1.2試劑。

無水乙醇、硝酸鋁、亞硝酸鈉、氫氧化鈉等試劑均為分析純。

1.1.3主要儀器。

GZX-GFC·101-3-S電熱恒溫鼓風干燥箱（上海博泰實驗設備有限公司）；美的牌微波爐；FA1604A電子天平（上海精天電子儀器有限公司）；索氏提取器；SHA-2型制冷水浴恒溫振蕩器；超聲波清洗機（山東科源超聲波設備有限公司）；TU-1810型紫外可見分光光度計（北京市譜析通用儀器有限公司）；R-1001-VW旋轉蒸發儀（河南鄭州長城科工貿有限公司）；ZN-500微型高速粉碎機（湖南長沙市中南制藥機械廠）；DYYB-12真空冷凍干燥機（上海德洋意邦儀器有限公司）。

1.2方法

1.2.1供試液的制備。

取2 g水芹干粉，以65%乙醇作溶劑，按料液1∶50（g/mL）的比例將物料攪拌均勻，得供試液[4]。

1.2.2水芹總黃酮紫外-可見吸收光譜圖的測定。

采用亞硝酸鈉-硝酸鋁顯色法，在190～500 nm區域掃描。

1.2.3水浴提取法。

供試液用水浴恒溫振蕩器，在60 ℃下振蕩提取40 min，冷卻過濾，濾液抽濾旋轉蒸發后，冷凍干燥，重復平行試驗3次，合并3次所得水芹總黃酮提取物粉，取2 g水芹總黃酮提取物粉（下文簡稱物粉），溶于100 mL 65%乙醇中，取1 mL物粉溶液測定總黃酮含量。

1.2.4超聲提取法。

供試液用超聲波清洗機在60 ℃下提取40 min，冷卻過濾，濾液抽濾旋轉蒸發后，冷凍干燥，重復平行試驗3次，合并3次所得物粉。取2 g物粉，溶于100 mL 65%乙醇，取1 mL物粉溶液測定總黃酮含量。

1.2.5微波提取法。

供試液置于微波爐中，沸騰提取1次后，冷卻至室溫，在相同條件下再沸騰1次，冷卻過濾，濾液抽濾旋轉蒸發后，冷凍干燥，重復平行試驗3次，合并3次所得物粉。取2 g物粉，溶于100 mL 65%乙醇，取1 mL物粉溶液測定總黃酮含量。

1.2.6索氏提取法。

供試液用索氏提取器虹吸3次后，冷卻過濾，濾液抽濾旋轉蒸發后，冷凍干燥，重復平行試驗3次，合并3次所得物粉。取2 g物粉，溶于100 mL 65%乙醇，取1 mL物粉溶液測定總黃酮含量。

1.2.7水芹總黃酮物粉測定。

將獲得的物粉稱重后，通過式（1）求出水芹總黃酮物粉的產率。

產率= 提取物粉的質量水芹干粉總質量×100%（1）

1.2.8水芹總黃酮含量測定。

根據參考文獻[5-7]，采用亞硝酸鈉-硝酸鋁顯色法測定水芹中總黃酮含量，并得出標準曲線回歸方程：A=6.184 8C-0.004 3（R=0.996 3）。式中，C為蘆丁質量濃度（mg/mL）；A為吸光度。根據式（2）求出樣品液中總黃酮含量。

總黃酮含量（mg/g）=C×VW樣（2）

式中，C為總黃酮的質量濃度（mg/mL），由標準曲線吸光度換算而得；V為樣品體溶液體積（mL）；W樣為樣品質量（g）。

2結果與分析

2.1光譜分析

由圖1可知，在247～276、258～282、334～360、298～359、348～392、343～392、334～425 nm等區域有明顯的吸收峰，結合參考文獻[7]中黃酮類化合物的顯色反應以及張培成[8]的《黃酮化學》中黃酮化合物紫外-可見吸收波段范圍，可初步確定水芹中可能含有黃酮醇類、異黃酮類、查耳酮類、橙酮類等化合物。

2.2水芹總黃酮物粉產率比較

由表1可知，采用水浴、超聲、微波、索氏4種提取方法提取的水芹總黃酮物粉質量較

接近，其產率相對略高的是水浴提取法，產率相對略低的是索氏提取，這4種試驗方法都適用于提取水芹的總黃酮物粉。

2.3水芹總黃酮含量比較

由表2可知，采用微波提取的總黃酮含量相對較高，索氏提取的總黃酮含量相對較低，水

浴和超聲提取的總黃酮含量較接近。

3結論

采用水浴、超聲、微波、索氏4種提取方法分別提取水芹中的總黃酮，總黃酮含量分別為0.052 5、0.057 1、0.066 1、0027 6 mg/g，水浴、超聲、微波3種提取方法提取出的黃酮含量較接近，微波提取的總黃酮含量相對較高，索氏提取的總黃酮含量相對較低，提取黔產野生水芹中總黃酮的較佳方法為水浴、超聲、微波，但從時間成本、方法簡便、提取物含量等方面綜合考慮，建議使用微波提取。

參考文獻

[1] 張儉，李勝華，谷榮輝.水芹的化學成分研究[J].中草藥，2012，43（7）：1289-1292.

[2] 田丹.水芹總酚酸的藥學研究[D].北京：北京化工大學，2010：1.

[3] 黃凱豐，時政，宋毓雪，等.水芹的理化特性研究[J].北方園藝，2011（9）：23-25.

[4] 孫國兵，谷超，陳曉靚，等.黔產野生水芹總黃酮提取工藝優化及含量測定[J].中成藥，2017，39（2）：430-433.

[5] 王慧彥，方蕓，王妍，等.AB-8大孔樹脂對槐花總黃酮吸附性能研究[J].食品科學，2009，30（20）：146-150.

[6] 郁陽，張阿玉，王國凱，等.大孔樹脂純化馬蘭總黃酮工藝研究[J].廣州化工，2015，43（24）：61-63.

[7] 陳曉靚，郭曉青，羅顯華，等.黔產野生水芹水溶性總黃酮純化工藝[J].安徽農業科學，2017，45（12）：106-109.

[8] 張培成.黃酮化學[M].北京：化學工業出版社，2009：239.