脯氨酸緩解酸性土壤上小白菜鋁毒脅迫的效應及其潛在機制

呂 波，王宇函，姜存倉

（華中農業大學資源與環境學院，微量元素研究中心，武漢 430070）

我國以酸性土壤為主，鋁（Al）毒是限制作物生長和減少產量的重要原因之一[1]。通常情況下，土壤中Al以難溶性或固定狀態存在于土壤固相中，對植物不產生毒害作用，當土壤pH<5時，活性鋁含量就隨pH值降低而升高[2]，它們存在于土壤介質中，直接對植物產生脅迫作用。植物在Al脅迫下，其根尖結構遭破壞，根系伸長被抑制，根系活力降低[3]，Al脅迫阻礙植物對養分的吸收，降低其抵抗外界環境變化的能力，從而影響植物生長和作物產量[4]。脯氨酸（Pro）在植物體內水溶性較強，可以被植物快速吸收[5]，是植物體內最有效的滲透調節物質之一。有關研究表明，Pro可以提高油菜、水稻等作物產量[6]、抵御逆境脅迫過程[7]以及提高植物葉綠素的含量[8]；Pro還可促進植物對必需元素（如鈣、鎂等）的利用[9]，改善光合作用過程[10]，并提高代謝能力。植物在逆境條件下易產生活性氧，Pro可與活性氧結合，使植物免受傷害[11]。Pro還可作為重金屬、低溫、高溫等逆境脅迫條件下植物的保護劑，提高植物抗氧化酶活性，增強植物抗逆性[12]。在逆境脅迫條件下可通過施用外源Pro來提高植物抗逆能力[13]。目前關于外源Pro緩解鹽以及重金屬等脅迫的研究很多[14-15]，但是對于外源Pro緩解Al脅迫的研究卻鮮有報道。因此，本文研究了不同濃度外源Pro對Al脅迫下小白菜產量、生理特性的影響，為外源Pro對Al毒緩解的應用提供科學的理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本試驗于2017年3—5月在華中農業大學盆栽場進行，供試作物為小白菜“四月慢”。供試土壤為黃棕壤，取自校內大田耕層。土壤經自然風干后，除去石塊及植物未腐爛殘體后研磨過2 mm篩，混勻后備用。其基本理化性質：pH值5.2，有機質13.3 g·kg-1，全氮 0.81 g·kg-1，堿解氮 38.9 mg·kg-1，速效磷 49.2 mg·kg-1，速效鉀 169.4 mg·kg-1，活性 Al 407.5 μg·g-1。

1.2 試驗設計

本試驗以土培盆栽的方式進行，設置T1（0外源Al+0外源Pro）、T2（外源Al）、T3（外源Al+10 mmol·L-1外源Pro）、T4（外源Al+20 mmol·L-1外源Pro）、T5（外源Al+50 mmol·L-1外源 Pro）5個處理，每個處理 4次重復。外源 Al為 AlCl3·6H2O（分子量為 241.43），微量元素用Arnon營養液配方（pH值為6.0）。取過2 mm篩的風干土樣1.5 kg于盆中，稱取底肥：NH4NO30.571 g·kg-1，KH2PO40.439 g·kg-1，KCl 0.141 g·kg-1，AlCl3·6H2O 0.242 g·kg-1。外源 Al和基肥按試驗處理分別施入土壤且均勻混合。種子晾曬后浸泡于純水中過夜（4℃），挑選飽滿一致的種子于塑料盆中，每盆播種約20顆，分散距離均勻，在溫室內培養至發芽，發芽后間苗培養，用不同濃度外源Pro溶液進行灌根處理，于2月28日播種，3月14日第一次處理，每7 d進行1次，每次用量50 mL，總共3次，T3、T4和T5外源Pro總施用量分別為每盆0.17、0.34 g和0.86 g，4月14日收獲，期間每日澆水，運用重量差減法使水分維持約75%田間持水量，共培養45 d。

1.3 指標測定與方法

1.3.1 樣品采集

收獲時，調查小白菜株高等農藝性狀，稱取每盆產量（地上部可食部分鮮重），每盆隨機取1株樣品測定葉綠素、抗氧化酶以及丙二醛（MDA）等鮮樣指標，所有樣品在105℃下殺青30 min，60℃烘干稱干重，把干樣磨碎后供分析測試用。樣品收獲后，將不同處理的土樣風干磨細并分別過20目和100目的篩子，土樣用自封袋保存供分析測試用。

1.3.2 植物樣品測定

采用乙醇比色法[16]測定植物葉片葉綠素含量；采用愈創木酚法[16]測定過氧化物酶（POD）活性；采用NBT還原法[16]測定超氧化物歧化酶（SOD）活性；采用紫外分光光度法[16]測定過氧化氫酶（CAT）活性；采用硫代巴比妥反應法[16]測定MDA含量；采用濃H2SO4-H2O2消煮，蒸餾定氮法測定植株氮含量[17]，鉬銻抗比色法測定植株磷含量[17]、火焰光度法測定植株鉀含量[17]。采用硝酸和高氯酸混酸消解-石墨爐原子吸收分光光度法[18]測定植物葉片Al含量。

1.3.3 土壤基本理化性質測定

土壤樣品用于測定收獲后土壤的基本理化性質以及土壤的活性Al含量。土壤基本理化性質參照鮑士旦[17]編制的《土壤農化分析》測定：使用pH計測定土壤 pH 值（土水比 1∶2.5），10.0 g土+25.0 mL 水；堿解擴散法測定土壤堿解氮；NH4OAc浸提，火焰光度法測定土壤速效鉀；0.5 mol·L-1NaHCO3浸提，鉬銻抗比色法測定土壤有效磷；用龐叔薇等[19]提出的浸提方法測定土壤活性Al的含量。

1.4 數據處理與分析

試驗公式[20]：

養分積累量=養分含量×植株干物質積累量。

采用Excel 2010對數據進行處理分析和作圖。用SAS進行單因素方差分析，t檢驗差異顯著性水平為0.05。

2 結果與分析

2.1 外源Pro對Al脅迫下小白菜產量的影響

從表1可知，相對于T1，單施Al使小白菜產量、干重和株高顯著降低，株高和產量分別減少了9.2%和10.6%，均達到顯著水平；Al脅迫下，不同濃度外源Pro使小白菜株高、產量和干重顯著增大，株高分別提高了17.8%、25.4%和14.4%，產量分別升高了28.4%、38.4%和65.2%。Al脅迫下，不同濃度外源Pro處理的產量相對于T1均增加，且有逐漸升高的趨勢，其中50 mmol·L-1外源Pro處理產量最高，提高了約37.1%。因此說明外源Pro具有緩解Al對小白菜生長脅迫和提高小白菜產量的作用。

2.2 外源Pro對Al脅迫下小白菜養分含量和積累量的影響

從表2得出，相對于T1，Al脅迫下小白菜的氮、磷、鉀含量明顯降低，分別減少了28.2%、40.9%和13.1%，養分總積累量分別降低了45.5%、55.2%和34.0%，均達到顯著水平，Al對小白菜養分吸收產生抑制作用。Al脅迫下施加不同濃度外源Pro，小白菜的氮、磷、鉀含量均明顯上升，且隨著Pro濃度的升高，養分含量呈現逐漸升高的趨勢，濃度為50 mmol·L-1時養分含量最高，相對于T2氮、磷、鉀含量分別增加了60.7%、50.0%和23.2%；此外，小白菜養分總積累量明顯增加，緩解Al對小白菜的抑制作用，其中50 mmol·L-1緩解效果最好，相對于 T2氮、磷、鉀總積累量分別增加了169.4%、151.6%和106.6%。因此，外源Pro可緩解Al對小白菜養分吸收的抑制，促進小白菜對養分的積累。

表1 外源Pro對Al脅迫下小白菜產量的影響Table 1 Exogenousproline effect on thegrowth of pakchoi under aluminumstress

2.3 外源Pro對Al脅迫下小白菜葉片Al含量的影響

從圖1得出，Al脅迫下小白菜葉片Al含量相對于T1顯著提高了24.3%，施加外源Pro后，小白菜葉片Al含量顯著降低，分別降低了20.4%、45.6%和49.8%，說明外源Pro可減少小白菜對Al的吸收，緩解Al脅迫作用。隨著外源Pro濃度升高，小白菜葉片Al含量呈現逐漸降低的趨勢，且均低于T1水平，其中50 mmol·L-1外源Pro緩解效果較好。

表2 外源Pro對Al脅迫下小白菜養分含量和積累量的影響Table 2 Exogenousproline effect on the nutrient content and accumulation of pakchoiunder aluminumstress

圖1 外源Pro對Al脅迫下小白菜葉片Al含量的影響Figure1 Exogenous proline effect on the content of aluminumin pakchoileaves under aluminumstress

2.4 外源Pro對Al脅迫下小白菜葉綠素的影響

如表3所示，Al會減少葉綠素含量，破壞小白菜葉片的葉綠素。相對于T1，T2處理的小白菜葉片葉綠素受到破壞，葉綠素a含量減少17.3%，葉綠素b減少27.2%，類胡蘿卜素含量減少29.0%，且均達到顯著水平；Al脅迫下施加不同濃度外源 Pro 后，T3、T4、T5處理葉綠素含量均相應地增加，隨著外源Pro濃度升高，葉綠素含量呈現遞增趨勢，其中50 mmol·L-1外源Pro的緩解效果較好，葉綠素a、b和類胡蘿卜素含量分別提高了29.1%、38.9%和36.4%。外源Pro對Al脅迫下小白菜葉片葉綠素含量產生了一定的影響，但并未顯著提高，只是緩解并逐漸恢復到T1水平。

表3 外源Pro對Al脅迫下小白菜葉片葉綠素的影響Table3 Exogenousprolineeffect on chlorophyll in leavesof pakchoiunder aluminumstress

2.5 外源Pro對Al脅迫下小白菜抗氧化酶活性和MDA含量的影響

從表 4 得知，相對于 T1，添加外源 Al，POD、SOD和 CAT活性分別降低了 13.7%、21.1%和 30.4%，MDA含量顯著升高了58.8%；Al脅迫下，不同濃度外源Pro使抗氧化酶活性顯著提高，MDA含量顯著降低，其中50 mmol·L-1效果最好，POD活性提高了24.3%，SOD活性升高了266.9%，CAT活性提高了142.6%，MDA含量降低了40.8%。隨著外源Pro濃度升高，POD、SOD和CAT活性呈現逐漸升高的趨勢，最終均比T1水平高，說明外源Pro可減弱Al對抗氧化酶活性的影響。因此，外源Pro可增強抗氧化酶活性來緩解Al脅迫。

2.6 外源Pro對Al脅迫下土壤pH值和活性Al含量的影響

圖2 外源Pro對Al脅迫下土壤pH值和活性Al含量的影響Figure 2 Exogenousproline effect on soil pH and available Al content under aluminumstress

表4 外源Pro對Al脅迫下小白菜抗氧化酶活性和MDA含量的影響Table 4 Exogenous proline effect on antioxidant enzyme activity and MDA content in pakchoiunder aluminumstress

從圖2可得出，相對于T1，外源Al使土壤pH值由5.65減少為4.90，降低了0.75個單位，達到顯著水平，施加不同濃度外源Pro后，土壤pH值并未明顯改善，未達到顯著水平，說明外源Pro對Al脅迫下土壤pH值的影響不大。T1土壤活性Al含量為456.02μg·g-1，T2土壤活性 Al含量為 525.86 μg·g-1，本試驗外源Al施加量為 27 μg·g-1，增加量為 69.84 μg·g-1，增加量大于施加量；施加外源Pro后，土壤活性Al含量分別降低了4.3%、24.5%和19.7%。外源Al使土壤pH值降低，活性Al含量升高，說明土壤pH值降低對活性Al含量升高有一定的影響；添加外源Pro后，土壤pH值未明顯變化，但土壤活性Al含量顯著降低，說明外源Pro對Al脅迫下土壤活性Al含量的影響并不是通過調節土壤pH值實現的。

3 討論

3.1 外源Pro對Al脅迫下小白菜生長及生理特性的影響

植物在生長過程中需要適宜的土壤環境，但實際上土壤環境中存在著很多限制作物生長的因素，如土壤pH值降低、活性Al含量過多導致的Al毒[4]等。Al毒對植物生長發育的影響主要表現為根系吸收養分受到阻礙、生長受到抑制、產量降低等[21]。本試驗發現，在黃棕壤中施加外源Al后，土壤pH值下降了0.75個單位，小白菜的氮、磷、鉀含量分別減少了28.2%、40.9%和13.1%，養分總積累量分別降低了45.5%、55.2%和34.0%，小白菜株高降低了9.2%，產量減少了10.6%，說明土壤pH值降低是Al脅迫下小白菜產量下降和生長發育受限制的重要原因之一。

有研究[22]表明，逆境脅迫下，植物易產生活性氧，直接對植物的生理特性產生影響。植物體內與活性氧消除有關的酶活性在逆境脅迫下一般會增強，從而植物抗氧化能力得到提高。Okuma等[23]發現10 mmol·L-1Pro促進懸浮培養煙草細胞的生長；Hoque等[24]發現Pro可提高植物葉片抗氧化酶活性。本研究發現，外源Al使POD、SOD和CAT的活性顯著降低，分別降低了13.7%、21.1%和30.4%，使膜脂過氧化產物MDA含量顯著升高，升高了58.8%，對小白菜的抗氧化酶系統造成損害，施加不同濃度外源Pro后，促進小白菜SOD、POD和CAT活性，減少MDA在體內的積累，從而減輕膜脂過氧化程度和增強抗氧化能力。外源Pro緩解Al脅迫的原因可能在于作為活性氧消除劑，激發體內POD、SOD以及CAT的活性，降低活性氧對植物的危害，增強小白菜抵抗逆境的能力，Anjum等[25]研究也證實了這一點。除此之外，Ashraf等[26]研究認為外源Pro緩解逆境脅迫效果取決于作物的類型以及Pro的濃度等，適宜Pro濃度可能在5~60 mmol·L-1之間[27-28]。本試驗設置3個濃度，綜合數據發現在提高產量、抗氧化酶活性、葉綠素含量和養分總積累量以及降低MDA含量、植物葉片Al含量和土壤活性Al含量等方面，濃度為50 mmol·L-1時緩解效果較好，此濃度在研究范圍之內。

3.2 外源Pro及外源Al對小白菜和土壤Al含量的影響

本試驗中，外源Al的施入使得土壤活性Al含量增加，土壤活性Al含量從456.02μg·g-1增加到了525.86 μg·g-1，增加量為 69.84 μg·g-1，大于施加量 27 μg·g-1，說明外源Al可使土壤固定態Al轉化成活性Al，這與應介官等[29]研究生物炭及外源Al對土壤Al含量試驗結果相似。除此之外，施加不同濃度外源Pro后，小白菜和土壤中的Al含量加上外源Al的施入量，T2~T54個處理Al總量呈現下降的趨勢。有研究[30-31]表明，土壤活性Al含量與土壤pH值有密切關系，當土壤pH<5時，土壤活性Al含量隨pH值降低而升高，但在本實驗中，外源Pro并沒有顯著提高土壤pH值，因此降低土壤和植物中Al含量并不是通過提高土壤pH值來實現的，對此Bolan等[32]研究發現有機酸可以與活性Al形成對植物無害的穩定物質，宋敏等[21]的研究也證實外源Pro可與自由金屬離子形成無毒的金屬-Pro復合物，減輕金屬對植物抗氧化酶活性以及光合中心離子的毒害作用。因此本試驗主要原因可能在于外源Pro與土壤活性Al相結合使土壤活性Al轉化成Al-Pro穩定復合物，外源Pro被植物吸入體內直接轉化成內源Pro與體內Al形成某種穩定物質[21]，且這兩種物質對植物沒有危害，從而同時降低了土壤和小白菜中Al含量，這也解釋了總體下降趨勢的問題。

3.3 外源Pro的應用前景

Pro是一種可溶性的滲透調節物質，中性條件下不帶電，具有分子量低、水溶性高等特點[33-34]。Pro性質穩定，可在常溫和常壓條件下穩定存在。Pro對植物具有兩方面積極作用，充當逆境調節物質和能量[35-36]：植物在逆境脅迫條件下，Pro可以與脅迫條件產生的氧自由基發生反應轉變為無害物質，消除活性氧危害；當植物從脅迫條件恢復正常時，Pro降解產生能量，可作為氮、磷的快速補償能源。目前關于Pro的研究很多，主要傾向于其在植物體內的抗逆機制[37]，多應用于緩解干旱、高溫、鹽脅迫和重金屬等[38]逆境脅迫，但是目前有關Pro功能和植物抗逆性的研究都是在培養室中進行的，在野外條件下還沒得到成功的驗證[13]。Pro由于其高水溶性可作為水溶肥施用，成本較低，為新型肥料研究提供新的思路。

4 結論

（1）外源Al使土壤pH值降低，土壤活性Al含量增加，植物體內Al含量升高，抗氧化酶活性減弱，膜脂過氧化程度增強，葉綠素破壞，養分總積累量減少，Al對小白菜生長產生脅迫作用。

（2）Al脅迫下施用不同濃度外源Pro未明顯提高土壤pH值，可使土壤活性Al含量下降，植物體內Al含量下降，抗氧化酶活性提高，膜脂過氧化程度減弱，葉綠素恢復到正常水平，養分總積累量增加。外源Pro有效地緩解了Al對小白菜生長的抑制，且50 mmol·L-1外源Pro對Al脅迫緩解效果較好。

[1]陳榮府,沈仁芳.水稻（Oryzasativa L.）鋁毒害與耐性機制及鋁毒害的緩解作用[J].土壤,2004,36（5）：481-491.CHEN Rong-fu,SHEN Ren-fang.Mechanisms of aluminum toxicity and tolerance of rice（Oryza Sativa L.）and catabolism of Al stress in acid soils[J].Soils,2004,36（5）：481-491.

[2]劉 鵬,Yang Y S,徐根娣,等.南方4種草本植物對鋁脅迫生理響應的研究[J].植物生態學報,2005,29（4）：644-651.LIU Peng,Yang Y S,XU Gen-di,et al.Physiological response of four sourthern herbaceous plants to aluminum stress[J].Acta Phytoecologica Sinica,2005,29（4）：644-651.

[3]吳道銘,傅友強,于智衛,等.我國南方紅壤酸化和鋁毒現狀及防治[J].土壤,2013,45（4）：577-584.WU Dao-ming,FU You-qiang,YU Zhi-wei,et al.Status of red soil acidification and aluminum toxicity in South China and prevention[J].Soils,2013,45（4）：577-584.

[4]Kochian L V,Hoekenga OA,Pi觡eros M A.How do crop plants tolerate acid soils?Mechanisms of aluminum tolerance and phosphorous efficiency[J].Annual Review of Plant Biology,2004,55（1）：459-493.

[5]Shah K,Kumar RG,Verma S,et al.Effect of cadmium on lipid peroxidation,superoxide anion generation and activities of antioxidant enzymesin growingriceseedlings[J].Plant Science,2001,161（6）：1135-1144.

[6]Habbasha E.Amelioration of thegrowth,yield and chemical constituents of canola plants grown under salinity stress condition by exogenous application of proline[J].2014,2（11）：501-508.

[7]沙漢景,劉化龍,王敬國,等.外源脯氨酸對鹽脅迫下水稻分蘗期生長的影響[J].農業現代化研究,2013,34（2）：230-234.SHA Han-jing,LIUHua-long,WANGJing-guo,et al.Effectsof exogenous proline on growth of rice at tillering stage under salt stress[J].Research of Agricultural Modernization,2013,34（2）：230-234.

[8]唐依萍,張曉艷,劉士壯,等.外源脯氨酸對NaCl脅迫下番茄幼苗光合特性的影響[J].安徽農業科學,2015,43（24）：9-11.TANG Yi-ping,ZHANG Xiao-yan,LIU Shi-zhuang,et al.Effects of exogenous proline on photosynthetic characteristics of tomato seedlings under NaCl stress[J].Anhui Agricultural Sciences,2015,43（24）：9-11.

[9]Szabados L,SavouréA.Proline：A multifunctional aminoacid[J].Trends in Plant Science,2010,15（2）：89-97.

[10]顏志明,孫 錦,郭世榮.外源脯氨酸對鹽脅迫下甜瓜幼苗生長、光合作用和光合熒光參數的影響[J].江蘇農業學報,2013,29（5）：1125-1130.YANZhi-ming,SUNJin,GUOShi-rong.Effects of exogenousproline on seedling growth,photosynthesis and photosynthetic fluorescence characteristicsin leavesof melon under salt stress[J].Jiangsu Journal of Agricultural Sciences,2013,29（5）：1125-1130.

[11]Dai QL,Chen C,Feng B,et al.Effectsof different NaCl concentration on theantioxidant enzymesin oilseed rape（Brassicanapus L.）seedlings[J].Plant Growth Regulation,2009,59（3）：273-278.

[12]黃運湘,王志坤,袁 紅,等.大豆對鎘脅迫的生理反應及耐鎘機理探討[J].農業環境科學學報,2011,30（8）：1514-1520.HUANGYun-xiang,WANGZhi-kun,YUANHong,et al.Physiological responsesof soybean（Glycine max）to cadmium stress and itstolerance mechanism[J].Journal of Agro-Environment Science,2011,30（8）：1514-1520.

[13]Mmf M,Ali EF.Evaluation of proline functionsin saline conditions[J].Phytochemistry,2017,140：52-68.

[14]張金鳳,孫明高,夏 陽,等.鹽脅迫對石榴和櫻桃脯氨酸含量和硝酸還原酶活性及電導率的影響[J].山東農業大學學報（自然科學版）,2004,35（2）：164-168.ZHANGJin-feng,SUNMing-gao,XIA Yang,et al.Salt stresses affect proline contents,nitratereductaseactivities and electrical conductivity of seedling leaves of megranate and cherry[J].Journal of Shandong A－gricultural University（Natural Science）,2004,35（2）：164-168.

[15]段九菊,郭世榮,樊懷福,等.鹽脅迫對黃瓜幼苗根系脯氨酸和多胺代謝的影響[J].西北植物學報,2006,26（12）：2486-2492.DUANJiu-ju,GUOShi-rong,FANHuai-fu,et al.Effectsof salt stress on proline and polyamine metabolisms in the roots of cucumber seedlings[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2006,26（12）：2486-2492.

[16]王學奎.植物生理生化實驗原理和技術[M].2版.北京：高等教育出版社,2015.WANGXue-kui.Principles and techniques of plant physiological biochemical experiment[M].2nd Edition.Beijing：Higher Education Press,2015.

[17]鮑士旦.土壤農化分析[M].3版.北京：中國農業出版社,2000.BAO Shi-dan.Soil and agricultural chemistry analysis[M].3rd Edition.Beijing：China Agriculture Press,2000.

[18]Ramsey M H,Dong D,Thornton I,et al.Discrimination between aluminium held within vegetation and that contributed by soil contamination usingacombination of Electron Probe Micro Analysis（EPMA）and Inductively Coupled Plasma-Atomic Emission Spectrometry（ICPAES）[J].Environmental Geochemistry&Health,1991,13（2）：114-118.

[19]龐叔薇,康德夢,王玉保,等.化學浸提法研究土壤中活性鋁的溶出及形態分布[J].環境化學,1986,5（3）：70-78.PANG Shu-wei,KANG De-meng,WANG Yu-bao,et al.Studies on the leaching of active aluminum from soil and the distribution of aluminum species by chemical extraction[J].Environmental Chemistry,1986,5（3）：70-78.

[20]王永華,黃 源,辛明華,等.周年氮磷鉀配施模式對砂姜黑土麥玉輪作體系籽粒產量和養分利用效率的影響[J].中國農業科學,2017,50（6）：1031-1046.WANGYong-hua,HUANGYuan,XINMing-hua,et al.Effects of the year-round management model of N,Pand K combined application on grain yield and nutrient efficiency of wheat-maize rotation system in limeconcretion black soil[J].Scientia Agricultura Sinica,2017,50（6）：1031-1046.

[21]宋 敏,徐文競,彭向永,等.外源脯氨酸對鎘脅迫下小麥幼苗生長的影響[J].應用生態學報,2013,24（1）：129-134.SONGMin,XUWen-jing,PENGXiang-yong,et al.Effectsof exogenous prolineon thegrowth of wheat seedlings under cadmiumstress[J].Chinese Journal of Applied Ecology,2013,24（1）：129-134.

[22]陶愛芬,陳嫻嫻,祁建民,等.外源硒及脯氨酸對菜用黃麻生長和生理特性的影響[J].中國麻業科學,2015,37（5）：239-245.TAOAi-fen,CHEN Xian-xian,QIJian-min,et al.Effects of exogenous selenium and proline on growth and physiological characteristics of ediblejute[J].Plant Fiber Sciencesin China,2015,37（5）：239-245.

[23]Okuma E,Soeda K,Tada M,et al.Exogenous proline mitigates the inhibition of growth of Nicotianatabacumcultured cellsunder salineconditions.[J].Soil Science&Plant Nutrition,2000,46（1）：257-263.

[24]Hoque M A, Banu M N, Okuma E, et al. Exogenous proline and glycinebetaine increase NaCl-induced ascorbate-glutathione cycle enzyme activities, and proline improves salt tolerance more than glycinebetaine in tobacco Bright Yellow-2 suspension-cultured cells[J]. Journal of Plant Physiology, 2007, 164（11）：1457-68.

[25]Anjum F,Rishi V,Ahmad F.Compatibility of osmolyteswith Gibbsenergy of stabilization of proteins[J].Biochimica et Biophysica Acta,2000,1476（1）：75-84.

[26]Ashraf M,Foolad MR.Rolesof glycine betaineand proline in improving plant abiotic stress resistance[J].Environmental&Experimental Botany,2007,59（2）：206-216.

[27]Roy D,Basu N,Bhunia A,et al.Counteraction of exogenous L-proline with NaCl in salt-sensitivecultivar of rice[J].Biologia Plantarum,1993,35（1）：69-72.

[28]Yamada M, Morishita H, Urano K, et al. Effects of free proline accumulation in petunias under drought stress[J]. Journal of Experimental Botany,2005, 56（417）：1975-1981.

[29]應介官,林慶毅,張夢陽,等.生物炭對鋁富集酸性土壤的毒性緩解效應及潛在機制[J].中國農業科學,2016,49（23）：4576-4583.YINGJie-guan,LINQing-yi,ZHANGMeng-yang,et al.Mitigativeeffect of biochar on aluminumtoxicity of acid soil and thepotential mechanism[J].Scientia Agricultura Sinica,2016,49（23）：4576-4583.

[30]王維君,陳家坊.土壤鋁形態及其溶液化學的研究[J].土壤學進展,1992,20（3）：10-18.WANGWei-jun,CHENJia-fang.Thestudy of soil aluminumformand itssolution chemistry[J].Progressin Soil Science,1992,20（3）：10-18.

[31]呂煥哲,王凱榮,謝小立.土地利用方式與坡位土壤活性鋁形態特征分析[J].水土保持學報,2007,21（1）：172-175.L譈 Huan-zhe,WANGKai-rong,XIE Xiao-li.Character of soil aluminum formsunder different land use and slope position[J].Journal of Soil&Water Conservation,2007,21（1）：172-175.

[32]Bolan DNS,Naidu R,Mahimairaja S,et al.Influenceof low-molecular-weight organic acids on the solubilization of phosphates[J].Biology&Fertility of Soils,1994,18（4）：311-319.

[33]Maggio A,Miyazaki S,Veronese P,et al.Does proline accumulation play an activerolein stress-induced growth reduction[J].Plant Journal,2002,31（6）：699-712.

[34]Jiao R,Liu H B,Liu GS,et al.Discussion of accumulation of proline and its relationship with osmotic stress tolerance of plants[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2011,71（10）：7704-7710.

[35]Floyd R A,Nagy I.Formation of long-lived hydroxyl free radical adductsof prolineand hydroxyprolinein afenton reaction[J].Biochimicaet Biophysica Acta,1984,790（1）：94-97.

[36]Ahmad I,Hellebust JA.The Relationship between inorganic nitrogen metabolism and proline accumulation in osmoregulatory responses of twoeuryhalinemicroalgae[J].Plant Physiology,1988,88（2）：348-354.

[37]Daly S,Yacoub A,Dundon W,et al.Isolation and characterization of a gene encoding alpha-tubulin from Candida albicans[J].Gene,1997,187（2）：151-158.

[38]Quan X Q,Zhang Y J,Shan L.The Rolesof prolinein plant growth and thetolerance to abiotic stresses[J].Letters in Biotechnology,2007（1）：159-162.