EDDS對(duì)Cd脅迫下三葉鬼針草生長(zhǎng)和抗氧化酶系統(tǒng)及Cd積累的影響

楊 波，陳銀萍，柯昀琪，閆志強(qiáng)，余沛東，師小平

（蘭州交通大學(xué)環(huán)境與市政工程學(xué)院，蘭州 730070）

隨著人類(lèi)文明的進(jìn)步，工業(yè)化不斷加強(qiáng)，在促進(jìn)經(jīng)濟(jì)發(fā)展和提高人民生活水平的同時(shí)，越來(lái)越多的環(huán)境問(wèn)題相繼出現(xiàn)，尤其是由采礦、廢氣排放、污水灌溉和使用重金屬超標(biāo)制品等人為因素所致的重金屬污染日益加劇，引起了世界各國(guó)科學(xué)家的高度重視，重金屬環(huán)境污染防治已迫在眉睫。Cd污染是常見(jiàn)的重金屬污染之一，據(jù)全國(guó)土壤污染狀況調(diào)查，Cd含量分布呈現(xiàn)從西北到東南、從東北到西南方向逐漸升高的態(tài)勢(shì)，Cd污染物點(diǎn)位超標(biāo)率為7.0%，總體情況不容樂(lè)觀[1]。

重金屬污染土壤的傳統(tǒng)修復(fù)方法，如開(kāi)挖、洗滌和土地填埋等，由于對(duì)環(huán)境破壞大且成本高昂，限制了其可行性[2]。而植物修復(fù)技術(shù)是一種生物友好型的技術(shù)，越來(lái)越受到人們的關(guān)注[3-4]。但是它也有重大缺陷，就是對(duì)重金屬提取率不高。近年來(lái)，有大量關(guān)于施用螯合劑以增強(qiáng)植物對(duì)重金屬的吸收和富集的研究報(bào)道，其中生物友好型的螯合劑乙二胺二琥珀酸（EDDS）備受關(guān)注。Luo等[5]研究表明，EDDS可以增強(qiáng)多種植物物種對(duì)重金屬Cd、Cu、Pb、Zn和Ni的攝取量。白薇楊等[6]發(fā)現(xiàn)，螯合劑的存在明顯增加了植物對(duì)重金屬Pb、Cu和Cd的富集系數(shù)，且EDDS對(duì)環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)比較小。Attinti等[7]研究了EDDS對(duì)香根草萃取Pb效率的影響，土壤和滲濾液結(jié)果表明，EDDS的應(yīng)用增加了土壤中Pb的溶解度。

三葉鬼針草（Bidens pilosa L.）是一年生草本植物，生物量大，根系發(fā)達(dá)，抗逆性強(qiáng)，具有較強(qiáng)的爭(zhēng)光、爭(zhēng)水和爭(zhēng)肥能力，對(duì)重金屬污染耐性強(qiáng)，富集性和轉(zhuǎn)移性高[8]，是修復(fù)重金屬污染土壤較理想的種質(zhì)資源[9]，但關(guān)于EDDS強(qiáng)化三葉鬼針草吸收Cd的能力尚不明確。

本文通過(guò)盆栽實(shí)驗(yàn)研究不同濃度EDDS對(duì)Cd污染條件下三葉鬼針草生長(zhǎng)、抗氧化酶活性、Cd含量以及Cd富集系數(shù)和轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)的影響，以期為三葉鬼針草和EDDS應(yīng)用于Cd污染土壤的修復(fù)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

三葉鬼針草種子購(gòu)自泰山野菜種植基地。EDDS為麥卡希試劑，現(xiàn)用現(xiàn)配，其結(jié)構(gòu)如下所示：

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)土壤為采自甘肅省蘭州市榆中縣（103°49′15″~104°34′40″E，35°34′20″~36°26′30″N）周邊農(nóng)田耕地0~20 cm的表層土，室內(nèi)自然風(fēng)干后過(guò) 2 mm篩備用。土壤基本理化性質(zhì)：pH值7.76，有機(jī)質(zhì)含量 19.80 g·kg-1，全氮含量 1.19 g·kg-1，Cd 含量 0.49 mg·kg-1。將2 kg表層土壤與一定量的污染物（以CdCl2·2.5H2O 模擬 Cd 脅迫，濃度為 40 mg·kg-1，以溶液加入到土壤中）充分混勻后裝入塑料盆（口徑20 cm、高度15 cm），平衡3周后，選取均勻、飽滿的三葉鬼針草種子，將其浸泡在1%NaClO溶液中10 min，用蒸餾水沖洗干凈，晾干后播種以提高種子的發(fā)芽率和抗病性。種子播種到塑料盆中，播種深度 0.5 cm，盆栽置于光照培養(yǎng)架上，在溫度15~25℃、色溫 6500 K 光照下，每日光照 14 h（6：00—20：00），黑暗10 h，不定期的更換位置，待發(fā)芽后間苗，每盆10株，植株在重金屬污染土壤中生長(zhǎng)，以自來(lái)水澆灌（水中未檢測(cè)出Cd），使土壤含水量經(jīng)常保持在田間持水量（該土壤田間持水量在20%左右）的70%左右。為防止污染物淋溶滲漏損失，在盆下放置塑料托盤(pán)并將滲漏液倒回盆中。待三葉鬼針草生長(zhǎng)60 d左右、長(zhǎng)出6片真葉時(shí)，配制濃度為0（對(duì)照，CK）、0.5、1.5、2.5、5.0 mmol·L-1的 EDDS 溶液，將其pH調(diào)到7.0。分別取上述濃度的溶液100 mL施入土壤中，每個(gè)處理3個(gè)平行，7 d后取樣進(jìn)行各指標(biāo)測(cè)定。

1.3 測(cè)定方法

1.3.1 生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定

取不同處理的植株各5株，小心抖落根系土，然后依次用自來(lái)水和蒸餾水分別小心沖洗3次，操作時(shí)盡量不損傷根系，用濾紙吸干水分。分別稱量地上部（莖和葉混合）和地下部（根）鮮重，用直尺測(cè)量其根長(zhǎng)及株高。再將鮮植株置于烘箱中105℃殺青20 min，之后75℃下烘干至恒重，稱其地上部及地下部干重[10]。

1.3.2 Cd含量的測(cè)定

將烘干后的植物地上部和地下部分別研磨，稱取0.5 g于消解管中，加入15 mL HNO3-HClO4（4∶1，V/V），用DigiBlock EHD20型高溫消解儀消解至澄清，定容至25 mL；將花盆中土壤風(fēng)干，用四分法取部分樣品研磨過(guò)0.149 mm篩，稱取0.5 g，用HCl-HFHNO3-HClO4法消解至澄清，定容至25 mL。用美國(guó)Nicolet公司的220型火焰原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定Cd 含量[11]。

1.3.3 酶活性測(cè)定

紫外分光光度法測(cè)定抗壞血酸氧化酶（APX）、谷胱甘肽還原酶（GR）和過(guò)氧化氫酶（CAT）活性，愈創(chuàng)木酚法測(cè)定過(guò)氧化物酶（POD）活性，氮藍(lán)四唑法測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）活性[12]。

以上所有指標(biāo)的測(cè)定均重復(fù)3次。

1.3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

富集系數(shù)（Bioaccumulation Factor，BF）也稱吸收系數(shù)，是指植物重金屬濃度（地上部和地下部Cd濃度之和）與土壤中重金屬濃度（土壤Cd添加量即40 mg·kg-1）之比；轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)（Translocation Factor，TF）是指植物地上部重金屬濃度與地下部同種重金屬濃度的比值[13]。

采用Excel和SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析，利用Origin 2016軟件繪圖。采用單因素方差分析（One-way ANOVA）和Duncan法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 EDDS對(duì)Cd脅迫下三葉鬼針草生長(zhǎng)的影響

加入EDDS培養(yǎng)7 d之后，對(duì)比各處理對(duì)生長(zhǎng)的影響（表 1）可知：40 mg·kg-1Cd脅迫下，0.5~1.5 mmol·L-1的EDDS有利于三葉鬼針草生長(zhǎng)，但是施加2.5~5.0 mmol·L-1的EDDS不利于其生長(zhǎng)。與CK相比，施加 0.5 mmol·L-1和 1.5 mmol·L-1EDDS 分別使株高增加19.03%和16.69%、根長(zhǎng)增加13.10%和10.48%、地下部鮮重增加54.55%和45.45%、地上部鮮重增加54.49%和42.95%、地下部干重增加32.64%和7.53%、地上部干重增加23.99%和19.49%（P<0.05）；而施加 2.5 mmol·L-1和 5.0 mmol·L-1EDDS 均抑制了植物生長(zhǎng)，使株高、根長(zhǎng)、地下部和地上部鮮重、干重顯著降低（P<0.05）。

2.2 EDDS對(duì)Cd脅迫下三葉鬼針草Cd含量及富集和轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)的影響

表1 EDDS對(duì)Cd脅迫下三葉鬼針草幼苗生長(zhǎng)的影響（平均數(shù)±SE）Table 1 Effectsof EDDSon the growth of the Bidens pilosa seedlings under Cd stress（mean±SE）

隨著EDDS濃度的升高，地上部和地下部Cd含量、轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)以及富集系數(shù)均呈先增后減的趨勢(shì)，但土壤Cd含量呈先減后增的趨勢(shì)（表2）。由表2可看出，施加5.0 mmol·L-1EDDS時(shí)，土壤中Cd含量最高，與CK相比無(wú)顯著差異，且顯著高于其他處理，這是因?yàn)楦邼舛菶DDS對(duì)植物生長(zhǎng)有抑制作用，使其生長(zhǎng)狀況不良，對(duì)Cd的吸收量減少，使土壤中Cd含量較高；而施加0.5~2.5 mmol·L-1EDDS時(shí)，由于植物對(duì)Cd的吸收作用，導(dǎo)致土壤中Cd含量低于CK。

與 CK 相比，施加低濃度（0.5~1.5 mmol·L-1）EDDS，均使植物地上部、地下部Cd含量顯著增加，其中施加1.5 mmol·L-1EDDS使地上部和地下部Cd含量達(dá)到最高，分別比CK顯著增加了146.72%和26.31%（P<0.05），其中地上部分 Cd 含量達(dá)到 109.454mg·kg-1，大于土壤重金屬污染修復(fù)植物應(yīng)具備的莖或葉富集重金屬的臨界Cd含量（100 mg·kg-1）。而施加2.5 mmol·L-1和 5.0 mmol·L-1EDDS 均使地下部 Cd 含量顯著減少，施加5.0 mmol·L-1EDDS使地上部Cd含量顯著減少（P<0.05）。

表2 EDDS對(duì)Cd脅迫下三葉鬼針草不同部位Cd含量、富集系數(shù)及轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)的影響（平均數(shù)±SE）Table 2 Effectsof EDDSon Cd content in different parts，bioaccumulation factor，and translocation factor of the Bidens pilosa seedlings under Cd stress（ mean ± SE）

施加0.5~2.5 mmol·L-1EDDS使富集系數(shù)和轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)均顯著高于CK（P<0.05），且大于1.0，說(shuō)明Cd脅迫下較低濃度的EDDS可顯著增加三葉鬼針草對(duì)Cd的富集和轉(zhuǎn)運(yùn)作用。而施加5.0 mmol·L-1EDDS，富集系數(shù)明顯低于CK，說(shuō)明該濃度不利于三葉鬼針草對(duì)Cd的吸收，但轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)略高于CK。

2.3 EDDS對(duì)Cd脅迫下三葉鬼針草抗氧化酶系統(tǒng)的影響

如圖1A所示，只有0.5 mmol·L-1EDDS使根中APX活性略高于CK，其余濃度EDDS均使根中APX活性顯著低于CK（P<0.05）；莖中APX活性在施加1.5 mmol·L-1EDDS后達(dá)到最大且顯著高于CK，而其余濃度均使APX活性顯著低于CK（P<0.05）；葉中APX 活性在施加較低濃度（0.5 mmol·L-1和 1.5 mmol·L-1）EDDS 后顯著增強(qiáng)，且在 1.5 mmol·L-1EDDS 時(shí)達(dá)到最大，較CK顯著增加了66.84%（P<0.05），但隨著EDDS施加濃度的進(jìn)一步增加，在施加2.5 mmol·L-1EDDS后APX活性增加不顯著（P>0.05），在施加5.0 mmol·L-1EDDS 后則顯著降低（P<0.05）。

如圖1B所示，隨施加EDDS濃度的升高，根中CAT活性呈先升后降的趨勢(shì)，0.5~2.5 mmol·L-1EDDS均使根中CAT活性顯著高于CK（P<0.05），且在施加2.5 mmol·L-1EDDS時(shí)達(dá)到最大，較 CK增加了105.34%，而在施加5.0 mmol·L-1EDDS時(shí)顯著低于CK（P<0.05）；莖中 CAT活性呈一直上升的趨勢(shì)，且在施加5.0 mmol·L-1EDDS時(shí)達(dá)到最大；葉中CAT活性雖然呈先升后降的趨勢(shì)，但其活性均顯著高于CK（P<0.05）。

如圖1C所示，除0.5 mmol·L-1EDDS使根中GR活性低于CK外，其余濃度使根、莖和葉中GR均顯著高于CK（P<0.05）。隨施加EDDS濃度的升高，根中GR活性呈一直增強(qiáng)的趨勢(shì)，莖中在0.5 mmol·L-1EDDS時(shí)達(dá)到最大，之后呈一直下降的趨勢(shì)，但仍顯著高于CK，葉中隨施加EDDS濃度的升高呈先升后降的趨勢(shì)，在施加2.5 mmol·L-1EDDS時(shí)達(dá)到最大，在5.0 mmol·L-1EDDS時(shí)顯著下降，但仍顯著高于CK。

如圖1D所示，施加0.5 mmol·L-1EDDS使根、莖、葉中POD活性顯著增強(qiáng)，較CK分別增加了112.60%、174.31%、154.86%（P<0.05），但隨施加 EDDS濃度的升高，POD活性則持續(xù)下降。

如圖1E所示，施加0.5 mmol·L-1EDDS使根中SOD活性顯著增強(qiáng)，較CK增加了213.37%（P<0.05），隨施加EDDS濃度的升高，根中SOD活性呈一直下降的趨勢(shì)，與CK無(wú)顯著差異（P>0.05）；莖中SOD活性隨施加EDDS濃度的升高呈先升后降的趨勢(shì)，在施加2.5 mmol·L-1EDDS時(shí)達(dá)到最大，較CK顯著增加了29.59%（P<0.05）；施加 0.5、2.5、5.0 mmol·L-1EDDS均使葉中SOD活性顯著高于CK（P<0.05），盡管施加1.5 mmol·L-1EEDS時(shí)與CK差異不顯著，但SOD活性仍有提高。

2.4 三葉鬼針草幼苗根中Cd含量與抗氧化酶系統(tǒng)的相關(guān)性及回歸分析

根是植物吸收重金屬的主要部位，進(jìn)而才向地上部分轉(zhuǎn)移，為探討三葉鬼針草幼苗中抗氧化酶系統(tǒng)是否對(duì)其吸收和積累Cd的能力有影響，本研究對(duì)三葉鬼針草幼苗根中Cd含量與抗氧化酶系統(tǒng)做了相關(guān)性及回歸分析，結(jié)果表明（表3）：根中Cd含量與GR和APX負(fù)相關(guān)，與CAT、POD、SOD呈正相關(guān)，但其相關(guān)性并不顯著，說(shuō)明抗氧化酶系統(tǒng)與三葉鬼針草幼苗吸收和積累Cd的能力沒(méi)有直接的相關(guān)性，但Cd脅迫下，隨著EDDS濃度的變化抗氧化酶系統(tǒng)被啟動(dòng)，對(duì)脅迫過(guò)程中積累的活性氧進(jìn)行清除，減輕了外界脅迫對(duì)植物造成的膜損害。

圖1 EDDS對(duì)Cd脅迫下三葉鬼針草幼苗APX、CAT、GR、POD和SOD活性的影響Figure 1 Effects of EDDSon activities of APX，CAT，GR，POD，and SODin the Bidens pilosa seedlings under Cd stress

回歸分析結(jié)果如下：

Y=25.033-18.897X1R2=0.052

Y=14.758+0.060X2R2=0.308

Y=37.492-36.265X3R2=0.254

Y=8.241+0.157X4R2=0.250

Y=9.180+0.983X5R2=0.314

式 中 Y 為 Cd 含 量 ，X1、X2、X3、X4、X5分 別 為APX、CAT、GR、POD、SOD 活性，R 為相關(guān)系數(shù)。回歸分析與相關(guān)性分析結(jié)果相同。

3 討論

3.1 EDDS對(duì)Cd脅迫下三葉鬼針草生長(zhǎng)及Cd富集能力的影響

螯合劑對(duì)金屬離子具有較強(qiáng)的螯合能力，進(jìn)入土壤后，可活化土壤中重金屬，減少土壤對(duì)重金屬的吸附，提高植物對(duì)重金屬的可利用性，進(jìn)而被植物最大限度地吸收[14]。目前，螯合劑輔助植物修復(fù)重金屬污染土壤已成為研究熱點(diǎn)之一。但是，施用螯合劑也有一定的風(fēng)險(xiǎn)，如對(duì)植物產(chǎn)生毒性（影響其生長(zhǎng)、葉片變黃等）[15-16]，破壞土壤結(jié)構(gòu)，使其養(yǎng)分流失，對(duì)土壤生態(tài)環(huán)境造成影響等。本研究結(jié)果表明：Cd脅迫下，施加較低濃度的EDDS有利于三葉鬼針草幼苗的生長(zhǎng)，使株高、根長(zhǎng)、地上部鮮干重和地下部鮮干重顯著增加，而施加高濃度EDDS則不利于植物的生長(zhǎng)，由表1可看出株高、根長(zhǎng)、地下部和地上部鮮重、干重顯著降低。該結(jié)果與袁菊紅[13]和Hseu等[17]研究結(jié)果一致，但劉金等[18]發(fā)現(xiàn)EDDS會(huì)不同程度減少苧麻生物量，熊?chē)?guó)煥等[19]的結(jié)果表明EDDS對(duì)大葉井口邊草生物量無(wú)明顯的影響。這種結(jié)果的差異可能與植物物種，試驗(yàn)方法，螯合劑種類(lèi)、濃度、施加方式、施加時(shí)間，土壤類(lèi)型等不同有關(guān)，而且這種差異究竟是何種原因?qū)е逻€需進(jìn)一步研究。

表3 三葉鬼針草幼苗根中抗氧化酶系統(tǒng)和Cd積累的相關(guān)性分析Table 3 Correlations between antioxidant enzyme systemand Cd accumulation in Bidens pilosa root

適宜濃度的EDDS可增加土壤中重金屬活性而被植物更有效地吸收，促進(jìn)植物地上部對(duì)重金屬更多的吸收和累積。在土壤重金屬污染植物修復(fù)研究中，富集系數(shù)越大，表明植物對(duì)重金屬的吸收累積能力就越強(qiáng)；轉(zhuǎn)移系數(shù)越大，則表明重金屬?gòu)母迪虻厣喜科鞴俎D(zhuǎn)運(yùn)能力就越強(qiáng)[20]，越有利于植物修復(fù)重金屬污染土壤。研究表明EDDS可促進(jìn)苧麻對(duì)Cd的吸收[21]，增加向日葵對(duì)鈾的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)能力[22]，促進(jìn)金盞菊根、莖、葉各器官對(duì)Cd的富集[23]，增加菊花和黑麥草對(duì)Cu的積累[24]。本研究結(jié)果表明：Cd脅迫下，施加低濃度EDDS顯著增加了三葉鬼針草地上部和地下部Cd含量，其中施加1.5 mmol·L-1時(shí)，Cd積累量大于土壤重金屬Cd污染修復(fù)植物應(yīng)具備的莖或葉富集重金屬的臨界含量，說(shuō)明低濃度EDDS可顯著增強(qiáng)植物對(duì)Cd的吸收和積累，而且三葉鬼針草的富集系數(shù)與轉(zhuǎn)移均在1.0之上，表明其具有超富集植物的特征[25]；而高濃度則受到抑制，這可能是由于高濃度EDDS對(duì)三葉鬼針草有一定毒害作用，不利于植物生長(zhǎng)。除施加5.0 mmol·L-1EDDS富集系數(shù)低于CK以外，添加EDDS使富集系數(shù)和轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)均高于CK，表明EDDS可以促進(jìn)Cd在植物中富集以及向地上部轉(zhuǎn)移，在植物修復(fù)方面是有利的。

3.2 EDDS對(duì)Cd脅迫下三葉鬼針草抗氧化酶系統(tǒng)的影響

在沒(méi)有受到外界脅迫的情況下，植物體內(nèi)活性氧（ROS）代謝處于穩(wěn)定狀態(tài)。在Cd和EDDS的脅迫下植物體內(nèi)平衡被打破，對(duì)植物生長(zhǎng)和生理特性產(chǎn)生影響，進(jìn)而影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育。因此，植物將對(duì)這種變化做出反應(yīng)，比如激活抗氧化酶系統(tǒng)，使之酶活性提高以維持活性氧平衡[26-28]。研究表明砷處理使大葉井口邊草葉[29]、黑麥草和叢枝菌根單一或聯(lián)合修復(fù)使黑麥草[30]、酸雨使毛竹[31]、低濃度Cd脅迫使三葉鬼針草幼苗[32]中抗氧化酶被誘導(dǎo)，活性增強(qiáng)，最大限度清除自由基，防止其對(duì)植物的損傷。本研究結(jié)果表明：Cd脅迫下，施加不同濃度的EDDS，三葉鬼針草根、莖和葉中APX、CAT、GR、POD和SOD活性變化不盡相同。在施加低濃度EDDS時(shí)，根中CAT和GR優(yōu)先啟動(dòng)，莖中APX、CAT和SOD優(yōu)先啟動(dòng)，葉中APX、CAT和GR優(yōu)先啟動(dòng)，清除植物體內(nèi)多余的ROS，保護(hù)植物細(xì)胞膜。在施加高濃度EDDS時(shí)，根中APX、POD和SOD起主要作用，莖中GR和POD，葉中SOD和POD起主要作用，從而減輕了外界脅迫對(duì)植物造成的膜傷害。酶活性在植物體內(nèi)反復(fù)變化一方面說(shuō)明對(duì)Cd脅迫和EDDS較為敏感，另一方面也表明植物隨著Cd脅迫的持續(xù)以及EDDS濃度和環(huán)境的變化在不斷調(diào)整自身，從而適應(yīng)多變環(huán)境，減輕逆境對(duì)植物自身的傷害，促進(jìn)植物生長(zhǎng)，并增加對(duì)重金屬的富集和轉(zhuǎn)運(yùn)[11]。酶作用的不同可能是由于植物物種的種類(lèi)、器官、實(shí)驗(yàn)條件等差異造成的，具體是何原因主導(dǎo)需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)探索。

本研究中，盡管抗氧化酶系統(tǒng)與三葉鬼針草幼苗吸收和積累Cd的能力沒(méi)有直接的相關(guān)性，但在Cd脅迫下，施加低濃度 EDDS（0.5~2.5 mmol·L-1）三葉鬼針草根中CAT、GR、SOD和POD活性能夠維持或增加，其中CAT活性增加尤為顯著，表明其具有強(qiáng)大的清除自由基的能力，減輕了脅迫對(duì)植物膜系統(tǒng)造成的損害，維持植物正常生長(zhǎng)狀況，有利于Cd的富集。而施加5.0 mmol·L-1EDDS 5種酶均顯著低于CK，說(shuō)明Cd脅迫和高濃度的EDDS對(duì)植物造成的影響已超過(guò)了植物抗氧化能力限度，引起細(xì)胞代謝失調(diào)，抑制了酶的合成，不能有效清除活性氧，細(xì)胞膜系統(tǒng)受損，植物生長(zhǎng)受到抑制，對(duì)Cd的吸收減少。表明EDDS施入Cd污染土壤后，通過(guò)影響三葉鬼針草生理生化過(guò)程以響應(yīng)重金屬Cd的脅迫[33]。

4 結(jié)論

（1）Cd脅迫下，施加低濃度EDDS會(huì)顯著促進(jìn)三葉鬼針草幼苗的生長(zhǎng)，增加其對(duì)Cd的吸收、富集和轉(zhuǎn)運(yùn)。

（2）Cd脅迫下，隨著不同濃度EDDS的施加，三葉鬼針草幼苗地上部和地下部組織中不同抗氧化酶優(yōu)先啟動(dòng)，清除Cd脅迫誘導(dǎo)產(chǎn)生的過(guò)量ROS，抵御膜脂過(guò)氧化，減輕逆境對(duì)膜系統(tǒng)造成的損傷。

（3）施加EDDS可增強(qiáng)三葉鬼針草對(duì)Cd污染土壤的修復(fù)效果，結(jié)合生長(zhǎng)指標(biāo)，充分考慮土壤重金屬類(lèi)型和螯合劑可能對(duì)環(huán)境造成的二次污染，優(yōu)先選擇施用量為 1.5 mmol·L-1。

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