雙向調節蛋白、轉錄因子E2啟動子結合因子1、白細胞介素6的表達與結直腸癌發生發展的相關性

陳艷昕，劉慶濱，黃江梅，周穎，肖芳

(河北秦皇島市第一醫院,a 病理科，b 普外科，066000)

·論著·

雙向調節蛋白、轉錄因子E2啟動子結合因子1、白細胞介素6的表達與結直腸癌發生發展的相關性

陳艷昕a，劉慶濱b，黃江梅a，周穎a，肖芳a

(河北秦皇島市第一醫院,a 病理科，b 普外科，066000)

[摘要]目的觀察結直腸癌患者的雙向調節蛋白(AREG)、轉錄因子E2啟動子結合因子1(E2F-1)、白細胞介素6(IL-6)的表達情況，并分析其臨床意義。方法選取在住院接受治療的結直腸癌患者為研究對象，同時選取同期住院接受治療的結腸息肉患者作為對照。觀察兩組患者AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6的表達，比較不同臨床病理特征結直腸癌患者的AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6的表達，分析影響AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6表達的因素。結果結直腸癌患者的AREG、IL-6水平，轉錄因子E2F-1陽性表達率高于結直腸息肉組；有淋巴結轉移、組織學分型為黏液腺癌、TNM分期為Ⅲ期+Ⅳ期的結直腸癌患者的AREG、IL-6水平，轉錄因子E2F-1陽性表達率較高；回歸分析結果顯示組織學分型和TNM分期是影響表達的因素。結論結直腸癌患者的AREG、IL-6水平，轉錄因子E2F-1陽性表達率較高，相關因子的表達與結直腸癌的組織學分型和TNM分期具有一定的相關性。

[關鍵詞]結直腸癌；雙向調節蛋白；E2F1轉錄因子；白細胞介素6

結直腸癌(CRC)發病率高、死亡率逐年上升，是目前世界上最常見的惡性腫瘤之一[1]，根據世界癌癥組織數據顯示2017年結直腸癌的新發病例達到132 700例，其中70 080例是男性患者，是男性第五大常見惡性腫瘤，女性患者有62 620例，同樣也是女性第三大常見惡性腫瘤，是世界第四大常見惡性腫瘤之一[2-4]。我國結直腸癌的病死率約為11.11/10萬，占全國惡性腫瘤病死率的第5位[5]。由于結直腸癌傳統手術治療難以達到徹底根治的效果，且患者術后生存率比較低，嚴重地威脅到了患者的生活質量，分子生物學研究為結直腸癌的治療提供了新的途徑，為此本文從分子生物學水平來探究結直腸癌發病機制，觀察結直腸癌患者的雙向調節蛋白(AREG)、轉錄因子E2啟動子結合因子1(E2F-1)、白細胞介素6(IL-6)的表達情況，并分析其臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2015年8月至2017年7月在我院接受治療的結直腸癌患者為研究對象。納入標準：(1)年齡≥18周歲；(2)通過腸鏡檢查確診為結直腸癌；(3)無其他部位原發腫瘤者；排除標準：(1)臨床資料不全者；(2)合并其他系統嚴重疾病者。根據納入排除標準共納入研究對象250例，其中直腸癌者110例，左、右半結腸及乙狀結腸癌140例；男150例，女100例，年齡范圍52～78歲，年齡(65.3±6.3)歲；淋巴結轉移者88例，無淋巴結轉移者162例；組織學分型：管腺癌155例，黏液腺癌95例；TNM分期：Ⅰ期+Ⅱ期150例，Ⅲ期+Ⅳ期100例；腫瘤大小：<5 cm為165例，≥5 cm為85例。選取同期在我院接受治療的結腸息肉患者作為對照，納入標準：年齡≥18歲且無腫瘤疾病者，共納入250例，男145例，女105例；年齡范圍54～75歲，年齡(65.4±5.4)歲。本項研究經我院倫理委員會評審通過，且參與本項研究的患者均簽署知情同意書。

1.2 方法 進行血樣采集，提前叮囑患者空腹8 h以上，次日清晨使用一次性真空干燥采血管采取兩組患者靜脈血3 mL，在4 ℃冰箱內自然沉降過夜，次日3000 g，離心15 min，吸取上清，置于-80 ℃冰箱內保存。

使用ELISA方法檢測兩組患者血清中AREG和轉錄因子E2F-1、IL-6的表達，嚴格按照AREG、E2F-1、IL-6檢測試劑盒(武漢博士德生物技術有限公司)的說明書進行操作。

2 結果

2.1 兩組患者AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6表達情況的比較 結直腸癌患者的AREG、IL-6水平，轉錄因子E2F-1陽性表達率高于結直腸息肉組，差異有統計學意義。見表1。

表1 兩組患者AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6表達情況的比較

注：AREG為雙向調節蛋白，E2F-1為E2啟動子結合因子1，IL-6為白細胞介素6，下表同

2.2 不同臨床病理特征的患者AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6表達情況的比較有淋巴結轉移、組織學分型為黏液腺癌、TNM分期為Ⅲ期+Ⅳ期的結直腸癌患者的AREG、IL-6水平，轉錄因子E2F-1陽性表達率較高。見表2。

2.3 影響結直腸癌患者AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6表達的因素 將單因素分析有意義的淋巴結轉移情況、組織學分型和TNM分期作為因變量，將結直腸癌患者AREG、IL-6水平，轉錄因子E2F-1陽性表達作為自變量，進行回歸分析，結果顯示組織學分型和TNM分期是影響表達的因素。見表3～5。

表3 結直腸癌患者AREG表達的影響因素分析

表4 結直腸癌患者E2F-1表達的影響因素分析

表2 不同臨床病理特征的患者AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6表達情況的比較

表5 結直腸癌患者IL-6表達的影響因素分析

3 討論

結直腸癌(結腸癌和直腸癌)是胃腸道中最常見的惡性腫瘤之一[6]，早期癥狀不明顯，隨著疾病的發展，患者將合并腹瀉、便秘、便血等癥狀，還可能出現腹痛、晚期貧血、體質量減輕等局部癥狀。結直腸癌發病率和致死率僅次于胃癌、食管癌和原發性肝癌[7]。結腸直腸癌的發生與基因、飲食、家族病史、吸煙、喝酒等因素有關，現代人飲食有許多偏向低纖高脂的精致飲食，以致結腸直腸癌的發病率逐年提高。由于近年來分子遺傳學理論的不斷發展以及分子生物學診斷水平的提高，人們對結直腸癌有了新的認識，臨床開始從DNA突變、染色體異常，癌基因的激活、抑癌基因失去功能等方向探究結直腸癌的致病機理[8-9]。本組研究將選用AREG、E2F-1、IL-6等細胞因子來探究結直腸癌的可能致病機理。

微效基因AREG 是一種位于人的4號染色體的長臂上具有雙功能生長調節作用的糖蛋白，具有激活成纖維細胞的增殖，抑制神經母細胞瘤和其他腺瘤細胞的生長等功能[10]。其功能主要表現為編碼雙調蛋白，屬于表皮生長因子EGF家族成員之一[11-13]。現已證明，AREG基因在正常組織中不表達或者微量表達，但在癌組織中是高表達的[14]。有文獻[15]報道，AREG基因對肺癌細胞的增殖有雙向調節作用，但是目前還未見有文獻報道AREG 基因的表達與結直腸癌的發生發展有直接關系。

轉錄因子E2F-1是細胞周期轉錄因子E2F的家族成員之一，它能參與多種病理、生理過程的調節。同時該物質還具有癌基因和抑癌基因的功能。在直腸癌的診斷中具有很重要的指導作用。IL-6是一種細胞因子，屬于白細胞介素的一種，它的靶細胞種類多樣，它能調節多種細胞的生長與分化,在機體的抗感染免疫反應中有重要的作用。本研究通過實驗發現AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6的表達水平可有效反映出結直腸癌患者進展情況，同時還可提示患者預后，或可作為結直腸癌進展及預后評估指標。

本次對于分子生物學相關指標的研究，具有下列幾個方面的重要意義：(1)能夠為結直腸癌的診斷學的提供新的研究方向；(2)能夠為結直腸癌的發病原因的研究提供基礎，并為后續臨床藥理學實驗提供治療靶點。因此本文選取我院收治的結直腸癌患者作為研究對象進行深入性探究，對照組采用結腸息肉患者，檢查兩組患者的分子生物學相關指標，結直腸癌患者的AREG、IL-6水平，轉錄因子E2F-1陽性表達率高于結直腸息肉組；有淋巴結轉移、組織學分型為黏液腺癌、TNM分期為Ⅲ期+Ⅳ期的結直腸癌患者的AREG、IL-6水平，轉錄因子E2F-1陽性表達率較高；將單因素分析有意義的淋巴結轉移情況、組織學分型和TNM分期作為因變量，將結直腸癌患者AREG、IL-6水平，轉錄因子E2F-1陽性表達作為自變量，進行回歸分析，結果顯示組織學分型和TNM分期是影響表達的因素。本研究還發現AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6的表達水平與結直腸癌具有一定的相關性。

本研究的創新性在于深入研究了患者體內AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6的表達水平在結直腸癌患者中的變化，具有非常重要的臨床意義。綜上所述，結直腸癌患者的AREG、轉錄因子E2F-1、IL-6的表達水平較健康人群顯著地升高，在結直腸癌的診斷中提供了很好的研究方向。

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ThecorrelationbetweentheexpressionofAREG,transcriptionfactorE2F-1andIL-6andthedevelopmentofcolorectalcancer

ChenYanxin*，LiuQingbin，HuangJiangmei，ZhouYing，XiaoFang

(*DepartmentofPathology,QinhuangdaoFirstHospital,Qinhuangdao066000,China)

[Abstract]ObjectiveTo observe the expression of Two way regulatory protein (amphiregulin,AREG),transcription factor E2 promoter binding factor 1 (E2F-1),interleukin -6 (IL-6).in patients with colorectal cancer and to analyze its clinical significance.MethodsThe patients with colorectal cancer who were treated in our hospital from August 2015 to July in 2017 were selected as the subjects.Meanwhile,the patients with colon polyps who were treated in our hospital during the same period were selected as the control group.The expressions of AREG,transcription factor E2F-1 and IL-6 in two groups were observed.The expressions of AREG,transcription factor E2F-1 and IL-6 in different clinicopathological characteristics were compared,and the factors influencing AREG,transcription factor E2F-1 and IL-6 expression were analyzed.ResultsThe AREG and IL-6 levels of colorectal cancer patients and the positive expression rate of transcription factor E2F-1 were higher than those in the colorectal polyp group.The AREG and IL-6 levels of colorectal cancer patients with lymph node metastasis and histological type were mucinous adenocarcinoma and stage TNM stage Ⅲ+Ⅳ.The positive rate of transcription factor E2F-1 was high.The single factor analysis showed lymph node metastasis,histological type and TNM stage were the dependent variable,the AREG and IL-6 levels in patients with colorectal cancer,the positive expression of transcription factor E2F-1 as independent variables.Regression analysis showed that the histological type and TNM stage were the factors affecting the expression.ConclusionThe AREG and IL-6 levels of colorectal cancer patients,the positive expression rate of transcription factor E2F-1 are higher,and the histological and TNM stages are the factors that affect the expression level.

[Keywords]Colorectal neoplasms；amphiregulin；E2F1 transcription factor；Interleukin-6

中圖分類號：R735.3

A

10.3969/J.issn.1672-6790.2018.03.008

基金項目：河北省醫學科學研究重點課題(20171258)

作者簡介：陳艷昕，副主任醫師，Email:yanxinchen2012@163.com

2018-04-12)