古城區(qū)七河鎮(zhèn)家畜血吸蟲(chóng)病監(jiān)測(cè)及現(xiàn)狀分析

麗江市古城區(qū)七河鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心 674102

和俊芳 李芒種 和云濤 和育文 云南省麗江市古城區(qū)七河鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 674102

七河鎮(zhèn)地處古城區(qū)南部，距古城22km，南與鶴慶縣交界，共有11個(gè)村民委員會(huì)，總?cè)丝跒?1426人、5079戶(hù)，耕地面積18929畝，耕牛3123頭。1954年確定為血吸蟲(chóng)病流行區(qū)，11個(gè)村民委員會(huì)中有5個(gè)行政村流行血吸蟲(chóng)病，歷史累計(jì)釘螺面積4895畝，累計(jì)查出病牛694頭，是古城區(qū)血吸蟲(chóng)病的重流行區(qū)。

1 家畜（牛）檢測(cè)的范圍

七河鎮(zhèn)血吸蟲(chóng)病流行的行政村包括五峰行政村、三義行政村、七河行政村、新民行政村和共和行政村。

2 病原學(xué)診斷（糞便毛蚴孵化法）

（1）材料準(zhǔn)備。pH為6.8～7.2無(wú)水蟲(chóng)和無(wú)化學(xué)物質(zhì)污染（包括氯氣）的澄清水，否則需作如下處理：有氯氣的自來(lái)水應(yīng)在盛器中存放8h以上。河水、池水、井水、雨水等混有水蟲(chóng)的水加溫至60℃，冷卻后再用。或在50L水中加含30%有效氯的漂白粉350mg，攪勻，放置20h，待氯氣逸盡；也可在放漂白粉后加入硫代硫酸鈉0.2～0.4g脫氯0.5h后再用。對(duì)渾濁的水，于每50L水中加明礬3～5g，充分?jǐn)嚢瑁吻搴笥谩?/p>

器材、試劑。竹筷、40～80目的銅篩濾杯、260目的尼龍篩兜、500mL量杯、糞桶、放大鏡、顯微鏡、吸管、載玻片、蓋玻片、取暖爐、水溫計(jì)、盆、水缸、水桶、剪刀、鬧鐘、天平、300～500L長(zhǎng)頸平底燒瓶或 200～250mL三角燒瓶、脫脂棉。

送糞卡。包括村名、組名、飼養(yǎng)員或畜主姓名、畜別、畜名或畜號(hào)、性別、年齡、有無(wú)孕、采糞日期。

孵育室 （箱）。室溫低于20℃時(shí)需要有設(shè)備保持20～25℃的環(huán)境條件，如有溫箱或有取暖設(shè)備的房間。

（2）操作方法。采糞和送檢。采糞季節(jié)宜于春秋兩季，其次是夏季，不宜于冬季。采糞最好于清晨從家畜直腸中采取，或新排出的糞便。采糞量為牛、馬屬200g，豬 100g，羊和犬糞（農(nóng)家）40g，每份糞樣需附上填好的送糞卡，于采糞當(dāng)天送到檢驗(yàn)室。

①洗糞和孵化。將每頭家畜的糞便分成3份，每份糞量牛、馬50g，豬 20g，羊、犬 10g，然后根據(jù)實(shí)際情況選用下列一種方法進(jìn)一步操作。

②尼龍兜淘洗孵化法。糞便在40目銅篩和量杯中用清水淘洗，細(xì)糞渣存于500mL量杯中，待沉淀后去上清液，沉渣倒入尼龍兜用水淘洗，把尼龍兜中的糞渣裝入三角燒瓶或長(zhǎng)頸平底燒瓶中加25℃清水，為了便于觀察毛蚴，在瓶頸下1/2處加一塊2～3cm厚的脫脂棉，再加清水至瓶口。

③塑料杯頂管法。置糞于銅篩量杯中加水充分淘洗，棄去糞篩量杯中的上層水，倒去2/3，加25℃清水，蓋上中間有孔的塑料蓋再加滿(mǎn)25℃清水，再將盛滿(mǎn)水的試管口塞一塊2～3cm厚的脫脂棉，倒插入塑料蓋孔中。

④孵育。將上述兩種方法裝好的三角燒瓶、長(zhǎng)頸燒瓶或塑料杯放于20～25℃的箱（室）中，在一定的光照（日光或燈光）條件下進(jìn)行孵育。從孵育開(kāi)始到1、3、5h后各觀察一次，尾蚴多數(shù)在水面下2mm范圍內(nèi)呈直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)。發(fā)現(xiàn)血吸蟲(chóng)毛蚴即判定為陽(yáng)性。血吸蟲(chóng)毛蚴肉眼觀察為針尖大小、灰白色、梭形、折光強(qiáng)和水中其他小蟲(chóng)不同之處是在近水面作水平或斜向直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)。當(dāng)用肉眼觀察難與水中的其他小蟲(chóng)相區(qū)別時(shí)，可用滴管將毛蚴吸出，置顯微鏡下可見(jiàn)毛蚴前部寬，前段中間有個(gè)頂突，兩側(cè)對(duì)稱(chēng)，后漸窄，周身有纖毛則可判為血吸蟲(chóng)毛蚴。在一個(gè)樣品中有1～5個(gè)毛蚴為+，6～10個(gè)毛蚴為++，11～20個(gè)毛蚴為+++，21個(gè)毛蚴以上為++++。以判斷、統(tǒng)計(jì)血吸蟲(chóng)病感染的強(qiáng)度。

3 家畜血吸蟲(chóng)病血清學(xué)診斷（間接血凝試驗(yàn)）

（1）材料準(zhǔn)備。器材。V型微孔有機(jī)玻璃血凝板（孔底角 90°），25μl定量移液器、滴管、可插針頭的滴管或1～2mL注射器、12號(hào)針頭；生理鹽水、蒸餾水；診斷液和陰、陽(yáng)性血清，按說(shuō)明書(shū)處理和保藏。

（2）操作方法。用滴管滴4滴生理鹽水于血凝板左邊第1孔內(nèi)，用同一滴管加入被檢血清1滴，使血清成5倍稀釋。用帶12號(hào)針頭滴管或移液管在左邊第2、3孔中各加生理鹽水1滴（25μl）。用移液器將第1孔血清混勻，混勻方法是反復(fù)吸吹3次，然后吸25μl已混勻液加入右邊鄰孔中，此孔血清成1∶10稀釋。用移液器混勻第2孔血清，吸取25μl加入第3孔中，此時(shí)該孔血清成1∶20稀釋。用移液器混勻第3孔血清，吸取25μl丟棄。每份被檢血清和陽(yáng)、陰性血清按同樣方法用3個(gè)孔，也可不用陰性血清而設(shè)生理鹽水對(duì)照孔，此時(shí)另取2個(gè)孔各加25μl生理鹽水作空白對(duì)照。用帶12號(hào)針頭的滴管或移液管加入1∶10、1∶20血清稀釋孔及空白對(duì)照孔各1滴診斷液，使診斷液和血清混勻，置20～37℃條件下 1～2h，等空白或陰性血清對(duì)照孔中血球全部沉于孔底中央，呈一圓形紅點(diǎn)，且陽(yáng)性血清兩孔中血球沒(méi)有全部沉入孔底中央，即無(wú)圓形紅點(diǎn)或僅有很小的圓形紅點(diǎn)即可判定結(jié)果。

（3）判定標(biāo)準(zhǔn)。紅血球全部下沉到孔底中央，形成緊密紅色圓點(diǎn)，周緣整齊為陰性（-）；紅血球少量沉于孔底中央，形成一較陰性小的紅色圓點(diǎn)，周?chē)猩倭磕t血球?yàn)槿蹶?yáng)性（+）；紅血球約半數(shù)沉于孔底中央，形成一更小紅色圓點(diǎn)，周?chē)幸粚拥t色凝集紅血球?yàn)殛?yáng)性（++）；紅血球均勻地分散于孔底，形成一淡紅色薄層為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。

（4）結(jié)果判定。以血清10倍和20倍稀釋孔出現(xiàn)凝集現(xiàn)象時(shí)被檢血清判為陽(yáng)性。如陰性或生理鹽水對(duì)照孔2h后紅細(xì)胞沉淀圖像不標(biāo)準(zhǔn)，說(shuō)明生理鹽水質(zhì)量不合標(biāo)準(zhǔn)或血凝板孔未洗凈，需檢查原因重新操作。

4 檢測(cè)結(jié)果

5年來(lái)對(duì)古城區(qū)七河鎮(zhèn)5個(gè)血吸蟲(chóng)病流行行政村的家畜血吸蟲(chóng)病監(jiān)測(cè)工作以村為單位，整村推進(jìn)，100%檢疫的策略進(jìn)行，共采集600頭耕牛血進(jìn)行血檢，均未發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性。共采集6000頭耕牛進(jìn)行糞檢，均未發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性病牛。

表1 家畜防治及監(jiān)測(cè)情況

5 討論

七河鎮(zhèn)于大理洲鶴慶縣耕地交錯(cuò)分布，交通便利，雙邊經(jīng)濟(jì)貿(mào)易互為密切，畜牧交易頻繁，七河鎮(zhèn)5個(gè)血吸蟲(chóng)病流行的行政村都有釘螺殘存點(diǎn)的存在，將使七河鎮(zhèn)面臨著血吸蟲(chóng)病疫情反彈的潛在威脅。2008年七河鎮(zhèn)達(dá)到血吸蟲(chóng)病傳播阻斷的標(biāo)準(zhǔn)，雖然傳播源被切斷，但是由于受防治技術(shù)水平的制約，客觀上存在的包括人畜和野生動(dòng)物中少量傳染源和殘存釘螺，可能一時(shí)難于查出，它們還會(huì)逐漸發(fā)展和蔓延，導(dǎo)致疫情回升。在周邊地區(qū)血吸蟲(chóng)病尚未完全控制和消滅的情況下，病人病畜等外來(lái)傳染源和外來(lái)釘螺又輸入到已經(jīng)消滅血吸蟲(chóng)病地區(qū)的可能性，雖然七河鎮(zhèn)已達(dá)到血吸蟲(chóng)病傳播阻斷的標(biāo)準(zhǔn)，還必須提高警惕，進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)期的監(jiān)測(cè)和鞏固工作。否則，血吸蟲(chóng)病在一定范圍內(nèi)有可能將不可避免地再次發(fā)生。

6 存在的問(wèn)題

（1）經(jīng)費(fèi)投入不足。要建立動(dòng)物防疫經(jīng)費(fèi)投入機(jī)制，動(dòng)物防疫、監(jiān)測(cè)和治療等經(jīng)費(fèi)還沒(méi)有列入各級(jí)財(cái)政預(yù)算，特別是受政府主管領(lǐng)導(dǎo)對(duì)這項(xiàng)工作重視程度的影響，七河鎮(zhèn)家畜血吸蟲(chóng)監(jiān)測(cè)查治工作時(shí)斷時(shí)續(xù)。

（2）血防力量薄弱，血吸蟲(chóng)病查治技術(shù)有待進(jìn)一步提高。我鎮(zhèn)的動(dòng)物防疫力量特別薄弱，而其他重大動(dòng)物疫病防治形勢(shì)又十分嚴(yán)峻，牽制了大量人力、物力。同時(shí)因機(jī)構(gòu)改革等原因，各地人員變動(dòng)頻繁，血防專(zhuān)業(yè)隊(duì)伍基本上是線(xiàn)斷、網(wǎng)破、人散，現(xiàn)有血防人員的血吸蟲(chóng)病查治技術(shù)亟待進(jìn)一步提高。

7 建議

（1）加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)。進(jìn)一步鞏固和完善政府統(tǒng)一領(lǐng)導(dǎo)、部門(mén)協(xié)同配合、群眾積極參與的血防工作機(jī)制，做到領(lǐng)導(dǎo)到位、責(zé)任到位、投入到位、工作到位。

（2）積極開(kāi)展血吸蟲(chóng)病傳播控制達(dá)標(biāo)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。做好家畜血防資料、野糞與家畜感染率調(diào)查達(dá)標(biāo)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工作的具體實(shí)施、技術(shù)指導(dǎo)、業(yè)務(wù)培訓(xùn)、質(zhì)量控制和資料匯總分析。

（3）加大技術(shù)培訓(xùn)，提高防控水平。當(dāng)前農(nóng)業(yè)血防工作任務(wù)艱巨，強(qiáng)化機(jī)構(gòu)隊(duì)伍建設(shè)，充實(shí)基層血防力量，開(kāi)展理論學(xué)習(xí)和現(xiàn)場(chǎng)操作相結(jié)合的培訓(xùn)，提高農(nóng)業(yè)血防專(zhuān)干查治技術(shù)水平，規(guī)范操作程序，提高實(shí)際操作能力，切實(shí)做好家畜血吸蟲(chóng)病查治工作。

（4）要大力推行家畜舍飼圈養(yǎng)。通過(guò)改造畜圈、種草養(yǎng)畜或者鼓勵(lì)發(fā)展圈養(yǎng)基地等措施，逐步改變疫區(qū)家畜放牧的飼養(yǎng)方式，杜絕患病家畜對(duì)有螺環(huán)境的污染。

[1]全國(guó)血吸蟲(chóng)病監(jiān)測(cè)點(diǎn)家畜病情監(jiān)測(cè)及查病技術(shù).

[2]麗江市古城區(qū)血吸蟲(chóng)病防治史志.