孟怡君
(丹東市青山保護局,遼寧 丹東 118000)
軟棗獼猴桃(Actinidiaarguta)為獼猴桃科獼猴桃屬多年生落葉藤本植物,其營養豐富,成熟果實中的多糖、VC、黃酮及微量元素等含量均遠高于中華獼猴桃,是東北山區優良的經濟野果[1]。近年來,經過不斷人工馴化和栽培,遼寧東部地區篩選出一系列軟棗獼猴桃優良品種,其風味獨特、口感佳、營養豐富、食(藥)用價值極高[2]。目前,軟棗獼猴桃的傳統繁育方式主要為扦插和嫁接。由于軟棗獼猴桃存在一些野生習性,因此存在繁苗速度相對較慢、有些優良品種母株性狀難以保持且植株易帶菌及苗木成活率低的問題。開展軟棗獼猴桃組培工廠化育苗不僅可以縮短繁苗周期,降低育苗成本,提高苗木成活率,減少植株帶菌,而且還可以保持母株優良性狀,解決品種退化的問題。在組培過程中,組培苗生根的優劣直接影響苗木移栽后的成活率,因此,本文就軟棗獼猴桃的生根培養基及激素選擇進行了研究,旨在為今后軟棗獼猴桃良種推廣及應用提供技術參考。
試驗材料取自丹東市寬甸軟棗獼猴桃種植園,剪取2~3年生幼嫩枝條,帶回實驗室水培催芽20 d,取萌發的幼嫩莖段為外植體進行誘導培養及增殖培養。誘導培養基為MS+1.0 mgL-16-BA+0.2 mgL-1NAA;增殖培養基為MS+1.5 mgL-16-BA+0.5 mgL-1NAA。
1.2.1 基本培養基的選擇 用繼代培養所得的組培苗進行生根培養,將 4.0 cm 左右的健壯苗分別轉接到不同無機鹽濃度(MS、1/2MS、1/3MS、1/4MS)的生根培養基中,進行生根培養。每種處理 30 個,重復 3 次,30 d 觀察生根情況。
1.2.2 激素的選擇 確定最佳的無機鹽濃度基本生根培養后,向該培養基中分別加入不同濃度的 IBA(0.2、0.4、0.6 mgL-1)、NAA(0.2、0.4、0.6 mgL-1)進行生根培養,以不添加生長調節劑的基本培養基為對照,每種處理 30 個,重復 3 次,30 d 觀察組培苗的生根及生長情況,統計平均根長,平均生根數及生根率[3]。培養環境條件:培養溫度為25±2 ℃,空氣相對濕度50%~60%,光照時間14 hd-1,光強為2 000~3 000 lx。
1.2.3 煉苗馴化 將生根后的組培苗移到溫室里進行煉苗,遮陰,溫度不超過28 ℃,濕度控制在70%~80% ,基質為珍珠巖∶草炭土∶細河沙=1∶1∶1,使用前用多菌靈對基質進行消毒[4]。
將健壯待生根的組培苗分別接種到 MS、1/2MS、1/3MS、1/4MS 的生根培養基中,生根情況見表1。由表1可知,在接入 MS 培養基中生根率較低,為66.26%,根纖細。當接入 1/3MS和 1/4MS 培養基中,由于基本培養基中無機鹽的濃度較低,營養成分不足,根纖細,且顏色為黃褐色,1/4MS培養基中部分有愈傷組織出現。當基本培養基為1/2MS 時,生根率最高達到78.76%,平均根數不是最高,但平均根長最長。

表1 不同基本培養基對生根培養的影響
為使組培苗生根健壯,根系發達,又進一步添加了植物外源激素對軟棗獼猴桃組培苗進行生根培養。以篩選出的 1/2MS 為基本培養基,分別添加不同濃度的 NAA 和 IBA,培養30 d后統計生根情況,見表2。由表 2可知,添加IBA激素的生根情況總體要好于NAA,使用NAA時, 0.4 mgL-1濃度時生根率較好,但隨著 NAA 濃度的增加,平均生根數降低,并在莖基部與根之間會出現愈傷組織,見圖1。使用IBA生根時,平均生根數隨激素濃度的增加而增加, 0.4 mgL-1IBA 的生根率和平均根長均達到最高,根粗壯,組培苗長勢較好,因此,綜合考慮,最適合軟棗獼猴桃生根培養基為1/2MS+0.4 mgL-1IBA。

表2 不同濃度IBA和NAA對生根培養的影響

圖1 NAA處理下的生根情況

圖2 IBA處理下的生根情況
本試驗以消毒殺菌后的細河沙為煉苗基質,移栽后用塑料薄膜覆蓋,并保持濕度在70%左右,溫度保持在20~26 ℃,待40~50 d后,組培苗的毛細根系長7~10 cm,轉移至配好基質的營養缽中繼續生長,溫室內保持濕度60%~80%,苗木移栽成活率可以達到80%。
對軟棗獼猴桃組培中生根培養情況進行了研究,篩選出最佳生根培養基為1/2MS+0.4 mgL-1IBA,移栽后成活率可以達到80%。無機鹽濃度以及激素種類和濃度影響組培苗的生根[5]。研究表明,1/2MS培養基生根率和根的生長狀態比其他無機鹽濃度效果要好,這與曹明顏等研究的研究結果一致[6]。在1/3MS和1/4MS生根培養基中,由于無機鹽濃度較低,因此營養成分不足,會造成根系長勢弱,并伴有愈傷組織出現。
添加不同濃度的植物激素NAA 和 IBA 應用效果表明,在單獨添加NAA 的培養基中,組培苗的生根狀態比添加IBA長勢稍弱,根系短、易斷,因此不適合在軟棗獼猴桃生根培養中單獨使用;當單獨使用IBA 時,生根較好,組培苗長勢健壯。使用NAA和IBA的培養基中,隨著 NAA和IBA 濃度的增加,根系生長質量呈下降趨勢,這可能是由于當生長素水平過高時,根徑切口處容易產生大量的愈傷組織有關[7]。對于NAA和IBA組合使用對生根培養的影響,有待于今后進一步研究。
參考文獻:
[1] 祝儒剛,孫艷頔,陳罡,等.軟棗獼猴桃與中華獼猴桃功能成分比較研究[J].遼寧大學學報:自然科學版,2107,44(1):59-64
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[3] 鄧踐.軟棗獼猴桃“龍成2號”組培擴繁技術研究[J].遼寧林業科技,2017(2):38-40
[4] 謝志兵,魯旭東.獼猴桃組織培養中適宜激素組合的篩選[J].北方果樹,2003(3):7-8
[5] 劉延吉,郝桂杰,姜巖巖,等.不同品種野生軟棗獼猴桃最佳組培方法的研究[J].北方園藝,2012(17):124-126
[6] 曹明顏.大麗花離體快繁和再生體系的建立[D].保定:河北農業大學,2012
[7] 李桂君,宋嘉隆,吳捷.葛棗獼猴桃組培繁殖的研究[C]//中國生物產業大會2010海峽兩岸重大生物技術產業化論壇會刊,2010:216-217