紫地榆活性成分對致齲菌生長和產(chǎn)酸影響的體外研究

王麗梅，楊曉珍，藍(lán) 海*

（1.大理白族自治州人民醫(yī)院口腔科，云南大理 671000；2.大理大學(xué)藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理 671000）

齲病是在多因素影響下的牙齒硬組織發(fā)生的慢性疾病。其中致齲菌產(chǎn)酸可導(dǎo)致羥基磷灰石晶體溶解，無機鈣、磷離子移出等，因此致齲菌產(chǎn)酸是釉質(zhì)脫礦、發(fā)生齲損的主要原因。齲病表現(xiàn)為無機質(zhì)的脫礦和有機質(zhì)的分解，病變過程是一個脫礦與再礦化交替進(jìn)行的過程〔1〕。紫地榆（Geranium strictipesR.Knuth）是牻牛兒苗科老鸛草屬植物，其根入藥，能消積食。有文獻(xiàn)報道，紫地榆提取物能抑制牙釉質(zhì)脫礦并能促進(jìn)牙釉質(zhì)再礦化〔2-8〕。紫地榆的乙酸乙酯提取物和水提物均能有效抑制口腔中變形鏈球菌和血鏈球菌的生長和產(chǎn)酸〔9-11〕。本文旨在研究紫地榆活性成分對常駐口腔細(xì)菌的生長及產(chǎn)酸的影響。

1 材料

變形鏈球菌（批號：ATCC25175）、粘性放線菌（批號：ATCC27044）菌種購于廣東微生物菌種保藏中心；TPY液體培養(yǎng)基購于青島海博生物技術(shù)有限公司；沒食子酸，五倍子酸甲酯，兒茶素，鞣花酸，0.05%醋酸洗必泰（chlorhexidine acetate，CA），0.5、0.1 mol∕L氫氧化鈉，葡萄糖，蔗糖，0.5 mol∕L磷酸鹽緩沖液（PBS），無水乙醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇，三氯甲烷，以上試劑均為分析純。

2 方法

2.1 實驗溶液的制備 將紫地榆的4種活性成分溶于TPY液體培養(yǎng)基中，使其最終濃度為16.000 g∕L，使用時按2倍稀釋法〔12〕稀釋。

2.2 菌液的制備 將細(xì)菌復(fù)蘇48 h后接種于TPY液體培養(yǎng)基中于厭氧條件下（37℃，80%N2、20%CO2）培養(yǎng)18 h進(jìn)行增菌。經(jīng)鑒定為純培養(yǎng)后，離心，取菌體用無菌生理鹽水洗滌3次。調(diào)整2種細(xì)菌的菌懸液濃度約5×107CFU∕mL。

2.3 2種致齲菌最低抑菌濃度（MIC）及最低殺菌濃度（MBC）的測定 配制含有紫地榆活性成分的液體培養(yǎng)基，按2倍稀釋法調(diào)整活性成分的濃度在0.125 g∕L至16.000 g∕L。……