2010至2017年間4760株常見革蘭陰性非發酵菌及其耐藥性動態變遷分析

易雪麗 羅斌 滕元姬 鄧鷹 韋穎

【摘要】目的了解亞胺培南對革蘭陰性非發酵菌的耐藥性及其變化趨勢，為臨床合理用藥提供依據。方法收集2010～2017年間從右江民族醫學院附屬醫院就診患者標本分離的革蘭陰性非發酵菌，進行鑒定及藥敏試驗，并對結果進行統計分析。結果4760株革蘭陰性非發酵菌分離自痰液、膿液、尿液及血液等標本，主要包括銅綠假單胞菌（4403%）、鮑曼不動桿菌（31.62%）、嗜麥芽窄食單胞菌（9.64%）和洋蔥伯克霍爾德菌（2.63%）等菌株。銅綠假單胞菌和嗜麥芽窄食單胞菌對大部分常見抗菌藥物耐藥率低于10%，鮑曼不動桿菌對大部分常見抗菌藥物耐藥率高于30%，洋蔥伯克霍爾德菌對部分常見抗菌藥物耐藥率高于70%。銅綠假單胞菌對亞胺培南的耐藥率較低且逐年下降，鮑曼不動桿菌對亞胺培南的耐藥率較高且波動較大，洋蔥伯克霍爾德菌對亞胺培南耐藥率較高且波動不大。結論亞胺培南對銅綠假單胞菌抗菌活性較強，但對鮑曼不動桿菌和洋蔥伯克霍爾德菌抗菌活性較差，應引起關注。

【關鍵詞】革蘭氏陰性非發酵菌；亞胺培南；耐藥性分析；多重耐藥菌

中圖分類號：R915 文獻標識碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2018.02.006

Analysis of 4760 Gramnegative nonfermentative bacteria and

their dynamic changes of drug resistance from 2010 to 2017

YI Xueli，LUO Bin，TENG Yuanji，DENG Ying，WEI Ying

（Department of Laboratory，Affiliated Hospital of Youjiang Medical University for Nationalities，Baise 533000，China）

【Abstract】ObjectiveTo understand the resistance of imipenem to Gramnegative nonfermentative bacteria and its changing trend，so as to provide evidence for rational clinical use of antimicrobial drugs.MethodsGramnegative nonfermentative bacteria isolated from the specimens of patients from the Affiliated Hospital of Youjiang Medical University for Nationalities from 2010 to 2017 were collected for identification and drug sensitivity test，and the results were statistically analyzed.Results4760 Gramnegative nonfermentative bacteria were isolated from the samples of sputum，pus，urine and blood，including Pseudomonas aeruginosa （44.03%），Acinetobacter baumannii（31.62%），Stenotrophomonas maltophilia（964%） and Burkholderia cepacia （2.63%）.The resistance rate of Pseudomonas aeruginosa and Stenotrophomonas maltophilia to most common antimicrobial agents was less than 10%，and the resistance rate of Acinetobacter baumannii to most common antimicrobial agents was higher than 30%.The resistance rate of Burkholderia cepacia to some common antimicrobial agents was higher than 70%.The resistance rate of Pseudomonas aeruginosa to imipenem was relatively low and decreased year by year.The resistance rate of Acinetobacter baumannii to imipenem was high and fluctuated greatly.Burkholderia cepacia had a high resistance rate to imipenem with little fluctuation.ConclusionImipenem has strong antibacterial activity against Pseudomonas aeruginosa，but it has poor antibacterial activity against Acinetobacter baumannii and Bacillus cepacia，which should be caused close attention.

【Key words】Gramnegative nonfermenting bacteria；imipenem；drug resistance analysis；multidrugresistant bacteria

非發酵菌是指一大群不發酵糖類，專性需氧、氧化酶陽性或陰性、無芽孢的革蘭陰性桿菌。在臨床上常見的革蘭陰性非發酵菌主要包括銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌等，主要分離自患者創口、血液、痰液等標本。亞胺培南為碳青霉烯類藥物的代表藥物，主要通過抑制細菌細胞壁的合成而發揮抗菌作用，臨床可用來治療革蘭陽性菌和革蘭陰性菌引起的感染，特別是對于多重耐藥或產生β內酰胺酶的革蘭陰性細菌有著良好的療效[1]。近幾年來，隨著抗菌藥物的大量使用，出現越來越多的耐碳青霉烯類藥物的革蘭陰性細菌。這些細菌對抗生素的耐藥性增加導致控制患者感染的難度加大。而且在同一病區有可能因為院內感染控制不到位而引起多重耐藥菌感染的暴發流行。除此之外，美國研究人員[2]報道部分細菌可以通過質粒傳播等機制引起其共生細菌耐藥，進而導致新的耐藥細菌的出現。因此，對這些多重耐藥菌的監測有助于幫助臨床控制院內多重耐藥菌暴發流行及預防出現新的耐藥變異菌株。

1資料與方法1.1菌株來源收集右江民族醫學院附屬醫院2010～2017年從臨床患者各類標本中分離出來的革蘭陰性非發酵菌，剔除同一患者的重復菌株后共計4760株。

1.2細菌鑒定及藥敏試驗使用法國梅里埃Vitek 2compact對分離菌株進行鑒定及藥敏試驗。同時使用英國OXOID的亞胺培南紙片和英國OXOID的MuellerHinton（MH）瓊脂對檢出菌株進行同步耐藥性檢測。

1.3質控菌株采用大腸埃希菌ATCC25922及銅綠假單胞菌ATCC27853作為質控菌株。

1.4統計學分析藥敏結果判定參考CLSI 2017 版藥敏折點，數據統計分析采用Whonet 5.6進行。

2結果2.1革蘭陰性非發酵菌檢出結果2010～2017年從臨床患者標本中共分離出4760株革蘭陰性非發酵菌。其中前三位分別為銅綠假單胞菌2096株（占44.03%）、鮑曼不動桿菌1505株（占31.62%）、嗜麥芽窄食單胞菌459株（占9.64%）。8年間主要革蘭陰性非發酵菌構成比見表1。8年間，除2011年各菌分離率變化波動較大之外，銅綠假單胞菌的分離率呈逐年上升趨勢，鮑曼不動與嗜麥芽窄食單胞菌的分離率基本保持平穩，洋蔥伯克霍爾德菌的分離率呈逐年下降趨勢。2010～2017年主要革蘭陰性非發酵菌分離率的變化趨勢見圖1。

2.2菌株分布4760株革蘭陰性非發酵菌主要分離自痰液（2979株占62.58%）、膿液（1035株占2174%）、尿液（260株占5.46%）及血液（130株占2.73%）、分泌物（38株占1.43%）、其他（288株占6.05%）等標本。其中銅綠假單胞菌主要分離自痰液和膿液標本，鮑曼不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌和洋蔥伯克霍爾德菌主要分離自痰液標本。

2.3常見革蘭陰性非發酵菌耐藥性分析銅綠假單胞菌對抗菌藥物耐藥率較低，除了氨曲南和哌拉西林之外耐藥率均低于10%。鮑曼不動桿菌對抗菌藥物耐藥率較高，除阿米卡星外其余抗菌藥物耐藥率均高于30%。洋蔥伯克霍爾德菌對阿米卡星、氨曲南、慶大霉素、妥布霉素和亞胺培南的耐藥率均高于70%，但是對復方新諾明、哌拉西林/他唑巴坦和頭孢他啶的耐藥率均低于10%。雖同為碳青霉烯類藥物，但洋蔥伯克霍爾德菌對亞胺培南的耐藥性明顯高于美羅培南。雖然嗜麥芽窄食單胞菌對碳青霉烯類藥物天然耐藥，但是對所檢測的復方新諾明、頭孢他啶和左旋氧氟沙星耐藥率均偏低。革蘭陰性非發酵菌對常見抗菌藥物的耐藥率見表2。

2.4主要革蘭陰性非發酵菌對亞胺培南的耐藥率及其變化趨勢銅綠假單胞菌對亞胺培南的耐藥率相對較低，且基本呈現一個逐年下降的趨勢。鮑曼不動桿菌對亞胺培南的耐藥率波動較大，2012～2014年呈現急劇下降趨勢， 2015～2017年開始慢慢平穩。洋蔥伯克霍爾德菌對亞胺培南的耐藥率基本保持平穩，2017年呈下降趨勢，但總體耐藥率仍遠高于銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌。2010～2017年主要革蘭陰性非發酵菌對亞胺培南的耐藥率及其變化趨勢見表3和圖2。

3討論對2010至2017年間4760株常見革蘭陰性非發酵菌監測結果顯示，銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌和洋蔥伯克霍爾德菌在所有分離菌株中占了極高的比例，統計數據與胡付品等[3]報道的CHINET中國細菌耐藥監測網統計數據相符合。因此對這四類細菌的耐藥性進行分析，對于指導臨床合理使用抗生素極為重要。除了嗜麥芽窄食單胞菌對亞胺培南天然耐藥之外，其余的大部分多重耐藥的革蘭陰性非發酵菌感染的治療方案多采用碳青霉烯類抗生素。因此革蘭陰性非發酵菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥性分析在耐藥監測中極為重要。

從本次的統計結果分析中發現，2010至2017年間，銅綠假單胞菌和嗜麥芽窄食單胞菌整體耐藥率偏低，鮑曼不動桿菌和洋蔥伯克霍爾德菌整體耐藥率偏高，這一現象與胡付品等[3]和茍建軍等[4]的報道相吻合。從亞胺培南對各菌的抗菌活性監測來看，銅綠假單胞菌對其耐藥率較低且呈逐年下降趨勢，鮑曼不動桿菌對其耐藥率較高且波動較大，洋蔥伯克霍爾德菌對其耐藥率較高且穩定。與茍建軍等[4]的報道相比，銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌的耐藥趨勢不完全符合。經分析發現，亞胺培南耐藥率變化與分離菌株來源科室比例變化密切相關，特別是重癥醫學科（ICU），分離自ICU患者的菌株耐藥率極高，當分離自ICU的菌株所占比例增高時，亞胺培南對菌株的耐藥率也相應增高。但需注意的是，這些菌株中鮑曼不動桿菌定植力較強，部分分離株有可能為定植菌株，不引起感染，故臨床治療時需要注意區分感染與定植，避免不合理使用抗生素。

由于抗生素的大量使用，近年來出現越來越多的多重耐藥菌，使臨床患者的治療面臨極大困難。多重耐藥菌的大量出現及不斷出現的新耐藥機制引起全球廣泛關注。例如英國和印度研究人員[5]報道的NDM1酶，這種酶最初是在肺炎克雷伯菌中發現的，隨后Hrabak J等[6]和Zafer MM等[7]在其他的腸桿菌科細菌和非發酵菌中也陸續發現攜帶NDM1基因的菌株。王盛書等[8]報道目前我國有25個省市也發現這類NDM1基因陽性菌株。面對著越來越嚴峻的形勢，我們力求通過加強細菌耐藥監測及合理使用抗生素來減少多重耐藥菌株的產生及暴發流行。參考文獻[1]Martirosov DM，Lodise TP.Emerging trends in epidemiology and management of infections caused by carbapenemresistant Enterobacteriaceae[J].Diagn Microbiol Infect Dis，2016，85（2）：266275.

[2]Moellering RJ.NDM1a cause for worldwide concern[J].N Engl J Med，2010，363（25）：23772379.

[3]胡付品 譯.2005-2014年CHINET中國細菌耐藥性監測網5種重要臨床分離菌的耐藥性變遷[J].中國感染與化療雜志，2017，17（1）：9399.

[4]茍建軍，任益慧，郭小兵，等.2010-2015年鄭州大學第一附屬醫院亞胺培南對革蘭陰性桿菌的耐藥性分析[J].現代預防醫學，2017，44（4）：760763.

[5]Kumarasamy KK，Toleman MA，Walsh TR，et al.Emergence of a new antibiotic resistance mechanism in India，Pakistan，and the UK： a molecular，biological，and epidemiological study[J].Lancet Infect Dis，2010，10（9）：597602.

[6]Hrabak J，Stolbova M，Studentova V，et al.NDM1 producing Acinetobacter baumannii isolated from a patient repatriated to the Czech Republic from Egypt，July 2011[J].Euro Surveill，2012，17（7）：pii： 20085.

[7]Zafer MM，Amin M，El Mahallawy H，et al.First report of NDM1producing Pseudomonas aeruginosa in Egypt[J].Int J Infect Dis，2014，29：8081.

[8]王盛書，孫金柱，蘇文莉，等.我國攜帶NDM1基因耐藥菌流行現況分析[J].軍事醫學，2015，39（11）：825830.